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植酸酶appA NR基因在克鲁维乳酸酵母中的表达及酶学性质分析
 
     论文目录
 
摘要第1-6页
Abstract第6-11页
第一部分 前言第11-22页
   ·植酸第11-12页
     ·植酸的概念第11页
     ·植酸的物理化学性质第11页
     ·植酸引起的问题第11-12页
   ·植酸酶第12-18页
     ·概念和分类第12-13页
     ·作用机理第13-14页
     ·酶学性质第14-15页
     ·植酸酶应用第15-16页
     ·植酸酶基因在微生物中的表达第16-18页
     ·appA植酸酶研究进展第18页
   ·克鲁维乳酸酵母表达系统第18-21页
     ·宿主菌第18-19页
     ·表达载体第19-20页
     ·表达系统优点第20-21页
   ·本实验的目的第21-22页
第二部分 材料与方法第22-33页
   ·实验材料与仪器第22-25页
     ·菌株和质粒第22页
     ·培养基第22页
     ·引物第22-23页
     ·试剂和酶第23页
     ·仪器和设备第23页
     ·实验所用溶液的配制第23-25页
     ·植酸钙的制备第25页
   ·实验方法第25-33页
     ·质粒的抽提第25页
     ·PCR扩增目的片段体系和条件第25-26页
     ·凝胶回收目的片段第26页
     ·载体、片段的酶切和连接第26页
     ·大肠杆菌感受态的制备第26-27页
     ·大肠杆菌转化方法第27页
     ·大肠杆菌重组子鉴定第27页
     ·克鲁维乳酸酵母感受态细胞的制备及转化第27-28页
     ·鉴定重组酵母菌株第28页
     ·重组克鲁维乳酸酵母在底物平板上的诱导表达第28页
     ·植酸酶基因在克鲁维乳酸酵母细胞中的诱导表达第28页
     ·SDS-PAGE检测目的蛋白第28-29页
     ·植酸酶酶活的测定方法第29-31页
     ·植酸酶的酶学性质的测定第31-33页
第三部分 结果与分析第33-41页
   ·表达载体pKLAC2-appA NR的构建第33-35页
     ·植酸酶基因appA NR的获得第33页
     ·构建重组表达载体pKLAC2-appA NR第33-34页
     ·重组表达载体pKLAC2-appA NR的酶切验证第34-35页
   ·克鲁维乳酸酵母的转化与重组菌株筛选第35-36页
     ·重组表达载体pKLAC2-appA NR的线性化第35页
     ·酵母的转化与筛选第35-36页
     ·克鲁维乳酸酵母重组菌株多拷贝检测第36页
   ·重组植酸酶appA NR的诱导表达第36-37页
   ·植酸酶appA NR酶学性质研究第37-41页
     ·热稳定性的测定第37-38页
     ·最适反应温度的测定第38页
     ·最适反应pH的测定第38-39页
     ·pH耐受性的测定第39页
     ·胃蛋白酶和胰蛋白酶对植酸酶活性的影响第39-41页
第四部分 讨论与展望第41-43页
参考文献第43-47页
致谢第47页

 
 
论文编号BS1865222,这篇论文共47
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