摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-9页 |
目录 | 第9-13页 |
符号说明 | 第13-14页 |
第一部分 小分子化合物与DNA凸起结构的作用 | 第14-117页 |
第一章 引言 | 第15-54页 |
·DNA结构 | 第15-20页 |
·DNA的二级结构 | 第16-20页 |
·核酸凸起结构 | 第20-26页 |
·小分子与DNA的相互作用 | 第26-33页 |
·小分子与DNA的作用方式 | 第26-28页 |
·小分子与DNA相互作用的研究方式 | 第28-33页 |
·Triplet repeat序列体外复制 | 第33-54页 |
·以质粒DNA为模板研究DNA聚合酶的暂停(pause)现象 | 第33-37页 |
·Triplet repeat寡合苷酸的体外复制 | 第37-49页 |
·小分子化合物对Triplet repeat寡合苷酸体外复制的影响 | 第49-54页 |
第二章 小分子与DNA凸起结构的结合作用 | 第54-71页 |
·实验试剂及仪器 | 第54-55页 |
·溶液及其配制 | 第54-55页 |
·分析仪器 | 第55页 |
·实验方法 | 第55-57页 |
·含有凸起结构的寡核苷酸的设计、合成、纯化、定量 | 第55-56页 |
·熔炼温度的测定 | 第56页 |
·圆二色谱的测定 | 第56页 |
·荧光光谱的测定 | 第56-57页 |
·SPR测定 | 第57页 |
·实验结果及讨论 | 第57-69页 |
·联萘酚氨基糖化合物与核酸凸起结构的选择性结合测定 | 第57-60页 |
·吩噻嗪氨基糖化合物与核酸凸起结构的选择性结合测定 | 第60-68页 |
·讨论 | 第68-69页 |
·结论 | 第69-71页 |
第三章 小分子对triplet repeat体外复制的调控 | 第71-109页 |
·实验试剂及仪器 | 第71-73页 |
·溶液及其配制 | 第71-72页 |
·仪器 | 第72-73页 |
·生物酶类 | 第73页 |
·其他 | 第73页 |
·实验方法 | 第73-76页 |
·寡合苷酸的标记 | 第73页 |
·寡合苷酸的退火 | 第73页 |
·体外复制反应 | 第73-74页 |
·反应的终止 | 第74页 |
·电泳 | 第74页 |
·结果检测 | 第74页 |
·普通转化(CaCl_2) | 第74-75页 |
·克隆测序 | 第75-76页 |
·实验结果及讨论 | 第76-107页 |
·联萘酚氨基糖化合物对triplet repeat体外复制的促进作用 | 第76-79页 |
·吩噻嗪氨基糖化合物对triplet repeat体外复制的促进作用 | 第79-80页 |
·偶氮苯氨基糖化合物对triplet repeat体外复制的调控作用 | 第80-82页 |
·Triplet repeat体外复制的性质研究 | 第82-98页 |
·不同的小分子化合物对Triplet repeat体外复制的促进作用 | 第98-103页 |
·讨论 | 第103-107页 |
·结论 | 第107-109页 |
第四章 总结 | 第109-111页 |
参考文献 | 第111-117页 |
第二部分 高效DNA酶的筛选 | 第117-174页 |
第一章 引言 | 第118-150页 |
·Deoxyribozyme简介 | 第118-121页 |
·Deoxyribozyme的分类 | 第121-140页 |
·具有RNA切割活性的DNA酶 | 第121-130页 |
·具有DNA切割活性的DNA酶 | 第130-134页 |
·具有金属化和氧化活性的DNA酶 | 第134-136页 |
·具有自身修饰活性的DNA酶 | 第136-140页 |
·Deoxyribozyme的应用 | 第140-150页 |
·具有RNA切割活性的DNA酶在体外作为RNA限制性酶 | 第140-141页 |
·具有RNA切割活性的DNA酶在体内切割mRNA | 第141-143页 |
·具有RNA切割活性的DNA酶作为传感器的应用 | 第143-144页 |
·具有RNA切割活性的DNA酶的其它应用 | 第144-145页 |
·具有RNA切割活性的DNA酶的药物应用 | 第145-147页 |
·具有非天然碱基的RNA切割DNA酶 | 第147页 |
·存在的问题与展望 | 第147-150页 |
第二章 高效DNAzyme的筛选 | 第150-165页 |
·实验试剂及仪器 | 第150-152页 |
·溶液及其配置 | 第150-151页 |
·仪器 | 第151-152页 |
·生物酶类 | 第152页 |
·DNA序列 | 第152页 |
·其他 | 第152页 |
·实验方法 | 第152-156页 |
·寡合苷酸库的磷酸化 | 第152-153页 |
·寡合苷酸库与底物和模板退火连接 | 第153页 |
·单链寡合苷酸库和底物的分离 | 第153页 |
·DNA酶的筛选反应 | 第153-154页 |
·DNA酶与未反应的DNA的分离 | 第154页 |
·PCR1,PCR2 | 第154页 |
·寡核苷酸库的获得 | 第154-155页 |
·TBAF的处理2'-OH保护基 | 第155页 |
·Neutravidin固相载体进行酶筛选反应 | 第155-156页 |
·实验结果与讨论 | 第156-165页 |
·筛选过程 | 第156-160页 |
·DNA酶的结构和酶学性质 | 第160-163页 |
·讨论 | 第163-165页 |
第三章 结论 | 第165-166页 |
参考文献 | 第166-174页 |
总结论 | 第174-176页 |
致谢 | 第176-177页 |
附录 | 第177-181页 |
附录1:联萘酚氨基糖的原始荧光数据 | 第177-179页 |
附录2:质粒pUC19的多克隆位点 | 第179页 |
附录3:ATT重复的重复单克隆的测序结果 | 第179页 |
附录4:测序得到的DNA酶的阳性克隆 | 第179-181页 |
个人简历及在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第181-182页 |
个人简历 | 第181页 |
在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第181-182页 |