中文摘要 | 第12-14页 |
Abstract | 第14-15页 |
第一章 前言 | 第16-23页 |
1. 膀胱癌简介 | 第16页 |
2. 巴西苏木素 | 第16-18页 |
3. 细胞死亡方式简介 | 第18-21页 |
3.1 细胞凋亡(Apoptosis) | 第18-19页 |
3.2 自噬性细胞死亡(Autophagic cell death) | 第19页 |
3.3 程序性细胞坏死(Necroptosis) | 第19-21页 |
4. 研究内容及意义 | 第21-23页 |
第二章 巴西苏木素作为膀胱癌治疗药物的广谱性及安全性测定 | 第23-31页 |
1. 实验材料 | 第23-24页 |
1.1 药物与细胞株 | 第23页 |
1.2 试剂与仪器 | 第23-24页 |
2. 实验方法 | 第24-25页 |
2.1 细胞培养 | 第24页 |
2.2 低血清实验检测巴西苏木素对不同膀胱癌细胞系的毒性 | 第24页 |
2.3 MTT法检测巴西苏木素对不同膀胱细胞的浓度依赖效应 | 第24-25页 |
2.4 MTT法检测巴西苏木素对不同膀胱细胞的时间依赖效应 | 第25页 |
3. 实验结果 | 第25-30页 |
3.1 巴西苏木素对膀胱癌细胞系具有广谱的杀伤效果 | 第25-28页 |
3.2 巴西苏木素对正常膀胱上皮SV-HUC-1 细胞毒性低于膀胱癌T24细胞 | 第28-29页 |
3.3 巴西苏木素对正常膀胱上皮SV-HUC-1 细胞毒性低于膀胱癌5637细胞 | 第29-30页 |
4. 讨论 | 第30-31页 |
第三章 巴西苏木素对膀胱癌T24细胞生理生化性质的影响 | 第31-39页 |
1. 实验材料 | 第31-32页 |
1.1 药物与细胞株 | 第31页 |
1.2 试剂与仪器 | 第31-32页 |
2. 实验方法 | 第32-33页 |
2.1 细胞培养 | 第32页 |
2.2 饱和细胞密度法检测细胞增殖现象 | 第32页 |
2.3 乳酸脱氢酶法检测细胞毒性 | 第32-33页 |
2.4 JC-1试剂盒检测线粒体膜电位情况 | 第33页 |
2.5 Flou-3 AM检测钙离子情况 | 第33页 |
3. 实验结果 | 第33-37页 |
3.1 巴西苏木素抑制膀胱癌T24细胞叠加生长 | 第33-34页 |
3.2 巴西苏木素诱导T24细胞乳酸脱氢酶释放 | 第34-35页 |
3.3 巴西苏木素诱导T24细胞线粒体膜电位降低 | 第35-36页 |
3.4 巴西苏木素诱导T24细胞钙离子增多 | 第36-37页 |
4. 讨论 | 第37-39页 |
第四章 巴西苏木素诱导膀胱癌T24细胞程序性坏死 | 第39-51页 |
1. 实验材料 | 第39-40页 |
1.1 药物与细胞株 | 第39页 |
1.2 试剂及仪器 | 第39-40页 |
2. 实验方法 | 第40-44页 |
2.1 细胞培养 | 第40-41页 |
2.2 凋亡抑制剂z-VAD-fmk对巴西苏木素致死T24细胞的抑制 | 第41页 |
2.3 酶活测定试剂盒检测caspase 3/8/9家族酶活情况 | 第41-43页 |
2.4 自噬抑制剂 3-MA对巴西苏木素致死T24细胞的抑制 | 第43页 |
2.5 程序性坏死抑制剂Nec-1 对巴西苏木素致死T24细胞的抑制 | 第43-44页 |
2.6 细胞形态观察与PI着色 | 第44页 |
2.7 电镜观察巴西苏木素作用T24后的形态变化 | 第44页 |
3. 实验结果 | 第44-50页 |
3.1 凋亡抑制剂z-VAD-fmk不能抑制巴西苏木素对T24细胞的致死效应29 | 第44-46页 |
3.2 巴西苏木素引起T24细胞中与凋亡相关的Caspase家族酶活性降低 | 第46页 |
3.3 自噬抑制剂 3-MA在一定程度上抑制巴西苏木素对T24细胞的影响31 | 第46-47页 |
3.4 程序性坏死抑制剂Nec-1在一定程度上抑制巴西苏木素对T24细胞的影响 | 第47-49页 |
3.5 巴西苏木素诱导T24细胞程序性坏死 | 第49-50页 |
4. 讨论 | 第50-51页 |
第五章 巴西苏木素通过RIP1/RIP3/MLKL诱导T24细胞程序性坏死 | 第51-56页 |
1. 实验材料 | 第51-52页 |
1.1 药物与细胞株 | 第51页 |
1.2 试剂与仪器 | 第51-52页 |
2. 实验方法 | 第52-54页 |
2.1 细胞培养 | 第52页 |
2.2 数字基因表达谱分析差异表达基因 | 第52-53页 |
2.3 Real-time PCR检测基因mRNA表达水平 | 第53-54页 |
3. 实验结果 | 第54-55页 |
3.1 数字基因表达谱数据显示程序性坏死相关基因RIP1/MLKL表达升高 | 第54页 |
3.2 巴西苏木素诱导RIP1/RIP3/MLKL mRNA水平升高 | 第54-55页 |
4. 讨论 | 第55-56页 |
全文总结 | 第56-58页 |
参考文献 | 第58-64页 |
致谢 | 第64-65页 |
个人简历 | 第65-66页 |