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S-腺苷甲硫氨酸脱羧酶基因在钙依赖的花生盐胁迫响应中的功能研究
 
     论文目录
 
中文摘要第8-10页
ABSTRACT第10-11页
符号说明第12-14页
第一章 前言第14-25页
    1.1 盐害对植物的影响第14页
    1.2 植物的耐盐机制第14-17页
        1.2.1 渗透调节第14-15页
        1.2.2 离子区域化第15-16页
        1.2.3 活性氧清除机制第16页
        1.2.4 基因表达的调控第16-17页
    1.3 钙在盐胁迫中的作用第17-19页
        1.3.1 钙缓解盐胁迫的机制第18-19页
            1.3.1.1 细胞壁第18页
            1.3.1.2 细胞膜第18页
            1.3.1.3 胞内信号传递第18-19页
    1.4 SAMDC的研究进展第19-23页
        1.4.1 多胺在植物体内的作用第19-20页
        1.4.2 腺苷甲硫氨酸脱羧酶第20-22页
            1.4.2.1 SAMDC基因的分离第20-21页
            1.4.2.2 SAMDC的分类第21页
            1.4.2.3 SAMDC基因的结构特征第21-22页
        1.4.3 SAMDC与植物耐抗盐性的关系第22-23页
        1.4.4 多胺抗盐机理第23页
    1.5 盐胁迫下钙与多胺的关系第23页
    1.6 研究目的与意义第23-25页
第二章 钙及SAMDC对花生盐胁迫的保护作用第25-43页
    2.1 材料与方法第25-30页
        2.1.1 实验材料与实验地点第25页
        2.1.2 主要生化试剂第25页
        2.1.3 材料处理第25-26页
        2.1.4 花生叶片过氧化氢含量的测定第26页
        2.1.5 花生叶片相对电导率的测定第26页
        2.1.6 花生叶片MDA含量的测定第26-27页
        2.1.7 花生叶片SOD酶的活性测定第27页
        2.1.8 花生叶片POD酶的活性测定第27页
        2.1.9 花生叶片CAT酶的活性测定第27页
        2.1.10 花生叶片可溶性蛋白含量的测定第27页
        2.1.11 花生叶片脯氨酸含量的测定第27-28页
        2.1.12 花生叶片可溶性糖含量的测定第28页
        2.1.13 SAMDC在花生中Real-time PCR检测第28-30页
            2.1.13.1 提取花生叶片总RNA第28页
            2.1.13.2 RNA样品的检测第28-29页
            2.1.13.3 RNA的反转录第29页
            2.1.13.4 Real-Time PCR第29-30页
        2.1.14 花生叶片多胺含量的测定第30页
    2.2 结果与分析第30-39页
        2.2.1 盐胁迫下钙对花生叶片过氧化氢含量的影响第30-31页
        2.2.2 钙对花生叶片抗氧化酶系统的影响第31-33页
        2.2.3 盐胁迫下钙对花生叶片细胞膜损伤的影响第33-34页
        2.2.4 盐胁迫下钙对花生叶片脯氨酸和可溶性糖含量的影响第34-35页
        2.2.5 盐胁迫下钙对花生叶片可溶性蛋白含量的影响第35-36页
        2.2.6 盐胁迫下不同处理对花生幼苗AhSAMDC表达水平的影响第36-37页
        2.2.7 盐胁迫下钙对花生幼苗内源游离多胺含量的影响第37页
        2.2.8 SAMDC抑制剂MGBG对花生盐胁迫的影响第37-39页
        2.2.9 盐胁迫下外源多胺对花生叶片MDA含量及抗氧化酶活性的影响第39页
    2.3 讨论第39-43页
        2.3.1 钙离子对花生幼苗抗盐性的影响第40-41页
        2.3.2 多胺对花生幼苗抗盐性的影响第41-43页
第三章 转AhSAMDC基因烟草的耐盐性分析第43-65页
    3.1 实验材料与方法第43-51页
        3.1.1 实验材料第43-45页
            3.1.1.1 植物材料第43页
            3.1.1.2 酶、质粒与生化试剂第43页
            3.1.1.3 主要仪器第43页
            3.1.1.4 培养基的配制第43-45页
        3.1.2 花生AhSAMDC基因的克隆第45页
            3.1.2.1 花生叶片总RNA的提取第45页
            3.1.2.2 花生叶片总RNA的反转录第45页
            3.1.2.3 AhSAMDC全长的PCR第45页
        3.1.3 植物表达载体的构建第45-46页
        3.1.4 转化农杆菌第46-48页
            3.1.4.1 农杆菌感受态的制备第46页
            3.1.4.2 冻融法转化农杆菌第46-48页
            3.1.4.3 重组农杆菌阳性鉴定第48页
        3.1.5 农杆菌介导的叶盘法转化烟草第48-49页
            3.1.5.1 外植体的侵染及培养第48页
            3.1.5.2 生根培养及移栽第48-49页
        3.1.6 转基因烟草的分子生物学检测第49页
            3.1.6.1 烟草基因组DNA的提取第49页
            3.1.6.2 转基因植株的PCR检测第49页
            3.1.6.3 转基因烟草植株的RT-PCR检测第49页
        3.1.7 转基因烟草的抗盐性分析第49-51页
            3.1.7.1 盐胁迫下转基因烟草种子的萌发实验第49-50页
            3.1.7.2 盐胁迫对烟草种子根发育影响的实验第50页
            3.1.7.3 烟草幼苗的盐胁迫处理第50页
            3.1.7.4 烟草叶片相对电导率的测定第50页
            3.1.7.5 烟草叶片MDA含量的测定第50页
            3.1.7.6 烟草叶片SOD酶的活性测定第50页
            3.1.7.7 烟草叶片POD酶的活性测定第50页
            3.1.7.8 烟草叶片CAT酶的活性测定第50页
            3.1.7.9 烟草叶片脯氨酸含量的测定第50页
            3.1.7.10 烟草叶片可溶性糖的测定第50-51页
            3.1.7.11 烟草叶片多胺含量的测定第51页
    3.2 结果与分析第51-61页
        3.2.1 AhSAMDC转化烟草第51-54页
            3.2.1.1 植物表达载体的构建第51-52页
            3.2.1.2 转化农杆菌第52页
            3.2.1.3 LBA-pBI121/samdc转化烟草第52页
            3.2.1.4 转基因烟草的分子生物学检测及生理形态第52-54页
        3.2.2 转AhSAMDC基因烟草的抗盐性分析第54-61页
            3.2.2.1 盐胁迫对各株系烟草种子萌发的影响第54-55页
            3.2.2.2 盐胁迫对各株系烟草根发育的影响第55-56页
            3.2.2.3 盐胁迫对各株系烟草叶片抗氧化酶活性的影响第56-57页
            3.2.2.4 盐胁迫对各株系烟草叶片渗透调节物质的影响第57页
            3.2.2.5 盐胁迫对各株系烟草叶片膜损伤的影响第57-59页
            3.2.2.6 盐胁迫对各株系烟草叶片内源多胺含量的影响第59-60页
            3.2.2.7 钙及其信号抑制剂对各株系烟草盐胁迫下细胞膜损伤的影响第60-61页
    3.3 讨论第61-65页
        3.3.1 外源基因表达的分子检测第62页
        3.3.2 转AhSAMDC基因对烟草植株抗盐性的影响第62-63页
        3.3.3 钙对烟草抗盐性的影响第63页
        3.3.4 AhSAMDC基因提高烟草植株抗盐性的可能机制第63-65页
第四章 结论第65-66页
参考文献第66-75页
致谢第75-76页
攻读学位期间发表的学术论文目录第76-77页
学术论文评阅及答辩情况表第77页

 
 
论文编号BS2765323,这篇论文共77
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