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当前位置:教育论文中心首页--硕士论文--9个潜在的香蕉枯萎病菌致病相关基因表达分析及酰胺转移酶基因的敲除和功能分析
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9个潜在的香蕉枯萎病菌致病相关基因表达分析及酰胺转移酶基因的敲除和功能分析
 
     论文目录
 
摘要第4-5页
Abstract第5-6页
1 导论第10-18页
    1.1 香蕉简介第10页
    1.2 香蕉枯萎病与尖孢镰刀菌第10-13页
        1.2.1 香蕉枯萎病第10-11页
        1.2.2 尖孢镰刀菌第11页
        1.2.3 尖孢镰刀菌致病机理第11页
        1.2.4 香蕉枯萎病发病主要症状第11-12页
        1.2.5 香蕉枯萎病菌的生理小种与危害第12页
        1.2.6 香蕉抗病机理及目前的香蕉枯萎病病害的治理第12-13页
    1.3 香蕉枯萎病菌的致病分子机制第13-14页
    1.4 利用比较蛋白质组学寻找致病基因第14页
    1.5 尖孢镰刀菌的遗传转化第14-16页
        1.5.1 丝状真菌的几种主要转化方法第14-15页
        1.5.2 转化DNA与基因组的整合第15-16页
    1.6 本实验的研究目的与意义第16-17页
    1.7 技术路线第17-18页
2 材料与方法第18-32页
    2.1 材料第18-21页
        2.1.1 菌株与质粒第18-19页
        2.1.2 试剂盒第19页
        2.1.3 试剂及配液第19-20页
        2.1.4 培养基第20页
        2.1.5 实验仪器第20-21页
    2.2 实验方法第21-32页
        2.2.1 前期蛋白质组实验数据整理第21页
        2.2.2 Foc1和Foc4的培养第21页
        2.2.3 香蕉的处理及采样第21-22页
        2.2.4 香蕉枯萎病菌RNA提取第22-23页
        2.2.5 反转录cDNA第23页
        2.2.6 基因全长克隆第23-24页
        2.2.7 基因表达分析——荧光定量PCR第24-25页
        2.2.8 香蕉枯萎病菌4号生理小种基因组DNA的提取第25-26页
        2.2.9 基因敲除载体的构建第26-28页
        2.2.10 原生质体的制备第28-29页
        2.2.11 PEG介导的原生质体转化第29页
        2.2.12 转化子基因敲除验证第29-30页
        2.2.13 敲除子的菌落形态观察第30页
        2.2.14 敲除子的玻璃纸穿透实验第30页
        2.2.15 敲除子的离体叶片实验第30页
        2.2.16 敲除子的苹果切片定殖实验第30-31页
        2.2.17 敲除子的过氧化氢耐受性实验第31页
        2.2.18 敲除子纤维素利用实验第31页
        2.2.19 敲除子渗透压胁迫实验第31页
        2.2.20 敲除子细胞壁选择性压力实验第31页
        2.2.21 敲除子致病性实验第31-32页
3 结果与分析第32-50页
    3.1 目的基因克隆第32-33页
    3.2 基因表达分析第33-35页
    3.3 目的基因敲除载体的构建第35-38页
        3.3.1 同源臂的扩增第35-37页
        3.3.2 载体构建第37页
        3.3.3 基因敲除载体的酶切验证第37-38页
    3.4 原生质体的获得第38-39页
    3.5 敲除转化子的验证第39-41页
        3.5.1 潮霉素抗性筛选第39页
        3.5.2 转化子的共聚焦显微镜观察第39-40页
        3.5.3 转化子PCR验证第40-41页
    3.6 敲除子的表型及生物特性分析第41-47页
        3.6.1 菌落形态第41-42页
        3.6.2 玻璃纸穿透第42-43页
        3.6.3 苹果切片穿透试验第43页
        3.6.4 香蕉离体叶片试验第43-44页
        3.6.5 过氧化氢耐受试验第44-45页
        3.6.6 纤维素利用第45页
        3.6.7 渗透压胁迫试验第45-46页
        3.6.8 细胞壁选择性胁迫试验第46-47页
    3.7 致病力测定第47-50页
4 讨论第50-54页
    4.1 基因表达分析第50-51页
    4.2 敲除载体的构建第51-52页
    4.3 原生质体的转化第52页
    4.4 转化子的检测与基因敲除第52页
    4.5 表型及致病性检测第52-54页
5 结论第54-55页
参考文献第55-60页
致谢第60页

 
 
论文编号BS4032373,这篇论文共60
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