摘要 | 第5-7页 |
abstract | 第7-9页 |
第一章 绪论 | 第14-23页 |
1.1 脂肽类生物表面活性剂 | 第14-16页 |
1.1.1 脂肽表面活性素 | 第14-15页 |
1.1.2 表面活性素的应用 | 第15-16页 |
1.2 表面活性素的生物合成 | 第16-17页 |
1.2.1 表面活性素的产生菌种 | 第16页 |
1.2.2 表面活性素合成的相关基因 | 第16页 |
1.2.3 表面活性素生产中的问题 | 第16-17页 |
1.3 微生物改良育种研究进展 | 第17-21页 |
1.3.1 基因工程育种 | 第18页 |
1.3.2 诱变育种 | 第18-19页 |
1.3.3 ARTP诱变 | 第19-20页 |
1.3.4 ARTP诱变机制的研究进展 | 第20-21页 |
1.4 本文研究背景与研究内容 | 第21-23页 |
1.4.1 研究背景 | 第21页 |
1.4.2 研究内容 | 第21-23页 |
第二章 ARTP诱变选育高产表面活性素菌株的研究 | 第23-41页 |
2.1 引言 | 第23页 |
2.2 材料与仪器 | 第23-25页 |
2.2.1 材料与试剂 | 第23-24页 |
2.2.2 仪器与设备 | 第24-25页 |
2.3 试验方法 | 第25-30页 |
2.3.1 培养基的配制、菌种培养与保藏 | 第25页 |
2.3.2 表面活性素测定方法的选择 | 第25-26页 |
2.3.3 表面活性素标准曲线的建立 | 第26页 |
2.3.4 出发菌株的筛选 | 第26-27页 |
2.3.5 出发菌株生长曲线的测定 | 第27页 |
2.3.6 常压室温等离子(ARTP)诱变处理 | 第27页 |
2.3.7 平板初筛 | 第27-28页 |
2.3.8 摇瓶发酵复筛 | 第28页 |
2.3.9 突变菌产表面活性素传代稳定性试验 | 第28页 |
2.3.10 发酵动力学模型的建立和比较 | 第28-29页 |
2.3.11 数据处理与分析 | 第29-30页 |
2.4 结果与分析 | 第30-40页 |
2.4.1 表面活性素测定方法的确定 | 第30-31页 |
2.4.2 表面活性素标准曲线的回归分析 | 第31页 |
2.4.3 诱变出发菌株的确定 | 第31-32页 |
2.4.4 出发菌株的生长曲线 | 第32页 |
2.4.5 ARTP对出发菌株的致死率曲线 | 第32-33页 |
2.4.6 平板初筛结果 | 第33-34页 |
2.4.7 摇瓶发酵复筛结果 | 第34-35页 |
2.4.8 突变菌产表面活性素传代稳定性结果 | 第35-36页 |
2.4.9 突变菌株和出发菌株发酵动力学模型的建立和比较 | 第36-40页 |
2.5 本章小结 | 第40-41页 |
第三章 ARTP诱变枯草芽孢杆菌机制的初步研究 | 第41-59页 |
3.1 引言 | 第41页 |
3.2 材料与仪器 | 第41-42页 |
3.2.1 材料与试剂 | 第41-42页 |
3.2.2 设备与仪器 | 第42页 |
3.3 试验方法 | 第42-45页 |
3.3.1 培养基的配制与菌种培养 | 第42页 |
3.3.2 ARTP诱变处理 | 第42页 |
3.3.3 扫描电镜观察形态变化 | 第42页 |
3.3.4 Fluo-4/AM探针法研究胞内钙离子浓度 | 第42-44页 |
3.3.5 基因组重测序样品制备 | 第44页 |
3.3.6 基因组DNA的建库测序 | 第44页 |
3.3.7 基因组重测序原始数据的质控 | 第44页 |
3.3.8 SNP突变位点的统计 | 第44-45页 |
3.3.9 数据处理与分析 | 第45页 |
3.4 结果与分析 | 第45-57页 |
3.4.1 ARTP诱变前后枯草芽孢杆菌形态的变化 | 第45-46页 |
3.4.2 ARTP诱变前后枯草芽孢杆菌胞内钙离子浓度的变化 | 第46-50页 |
3.4.3 基因组重测序Clean reads数据统计和质量评估 | 第50-52页 |
3.4.4 样本Clean Reads与参考基因组比对分析结果 | 第52页 |
3.4.5 SNP变异检测 | 第52-53页 |
3.4.6 基因功能注释分析 | 第53-57页 |
3.5 本章小结 | 第57-59页 |
第四章 高产表面活性素突变菌株M45的发酵条件优化与产物性质研究.. | 第59-87页 |
4.1 引言 | 第59页 |
4.2 材料与仪器 | 第59-60页 |
4.2.1 材料与试剂 | 第59-60页 |
4.2.2 仪器与设备 | 第60页 |
4.3 试验方法 | 第60-66页 |
4.3.1 培养基的配制与菌种培养 | 第60页 |
4.3.2 发酵指标的测定 | 第60-61页 |
4.3.3 突变菌株M45 发酵产表面活性素单因素试验 | 第61页 |
4.3.4 突变菌株M45 发酵产表面活性素响应面法优化试验 | 第61页 |
4.3.5 响应面最优条件的验证试验 | 第61-62页 |
4.3.6 表面活性素的提取及结构鉴定 | 第62-63页 |
4.3.7 表面活性素提取物表面张力和乳化活性的测定 | 第63页 |
4.3.8 表面活性素提取物抗氧化活性的测定 | 第63-64页 |
4.3.9 表面活性素提取物对癌细胞增殖的抑制效应研究 | 第64-65页 |
4.3.10 数据处理与分析 | 第65-66页 |
4.4 结果与分析 | 第66-85页 |
4.4.1 突变菌株M45 发酵产表面活性素单因素试验结果 | 第66-72页 |
4.4.2 突变菌株M45 发酵产表面活性素响应面优化试验结果 | 第72-75页 |
4.4.3 响应面最优条件验证结果 | 第75页 |
4.4.4 表面活性素提取物的结构鉴定 | 第75-78页 |
4.4.5 表面活性素提取物的表面活性和乳化活性 | 第78-80页 |
4.4.6 表面活性素提取物的抗氧化活性 | 第80页 |
4.4.7 表面活性素提取物对癌细胞增殖的抑制效应 | 第80-85页 |
4.5 本章小结 | 第85-87页 |
第五章 结论与展望 | 第87-89页 |
5.1 主要结论 | 第87-88页 |
5.2 创新点 | 第88页 |
5.3 展望 | 第88-89页 |
参考文献 | 第89-100页 |
致谢 | 第100-101页 |
攻读硕士期间获得的科研成果 | 第101页 |