提要 | 第1-6页 |
Summary | 第6-12页 |
前言 | 第12-16页 |
第一篇 文献综述 | 第16-38页 |
第一章 红景天及红景天苷研究进展 | 第16-26页 |
1 红景天的化学成分及药理作用 | 第16-19页 |
·红景天的化学成分 | 第16-17页 |
·红景天的药理作用 | 第17-19页 |
2 红景天的有效成分提取制备 | 第19-22页 |
·酪醇的提取与制备 | 第20页 |
·红景天苷的提取与制备 | 第20-22页 |
3 红景天的生态学研究 | 第22-23页 |
4 红景天的生物学研究进展 | 第23-26页 |
·组织培养及快速繁殖 | 第23页 |
·悬浮细胞培养 | 第23-24页 |
·发根培养 | 第24-26页 |
第二章 高等植物糖基转移酶的研究进展 | 第26-34页 |
1 糖基转移酶的分类 | 第26-27页 |
2 葡萄糖基转移酶的分析与鉴定 | 第27-33页 |
·通过蛋白纯化方法鉴定 | 第27-28页 |
·分子生物学方法鉴定 | 第28-31页 |
·借助功能基因组学方法鉴定 | 第31-33页 |
3 酪醇糖基转移酶 | 第33-34页 |
第三章 毛状根生产次生代谢物的研究进展 | 第34-38页 |
1 毛状根的优良特性 | 第34-35页 |
·激素自养 | 第34页 |
·生长迅速 | 第34-35页 |
·遗传稳定性 | 第35页 |
2 毛状根生产次生代谢产物的研究进展 | 第35-36页 |
3 展望 | 第36-38页 |
第二篇 研究内容 | 第38-104页 |
第一章 高山红景天糖基转移酶家族基因的分离及特性分析 | 第38-72页 |
1 材料与方法 | 第39-55页 |
·材料 | 第39-40页 |
·方法 | 第40-55页 |
2 结果与分析 | 第55-69页 |
·红景天愈伤细胞与根中糖基转移酶活性随时间变化趋势 | 第55-56页 |
·总RNA 的提取 | 第56-57页 |
·UGTC2 和UGTR 基因3'端序列的分离 | 第57-58页 |
·UGTC2 和UGTR 基因5'端序列的克隆 | 第58-59页 |
·UGTC2 和UGTR 基因的电子合并及全长cDNA 的克隆 | 第59-60页 |
·UGTC1 基因全长cDNA 的克隆 | 第60-61页 |
·UGTC2 和UGTR 基因的生物信息学分析 | 第61-64页 |
·UGTC2 和UGTR 基因的结构和功能域分析 | 第64页 |
·UGTC2 和UGTR 与其它植物UDP-葡萄糖基转移酶氨基酸序列的多序列比对 | 第64-66页 |
·UGTC1,UGTC2 和UGTR 与拟南芥和其它植物部分已鉴定葡萄糖基转移酶基因的系统进化树构建与分析 | 第66-69页 |
3 讨论 | 第69-71页 |
·高山红景天糖基转移酶基因克隆方案的选择 | 第69-70页 |
·引物设计方法的选择 | 第70-71页 |
4 小结 | 第71-72页 |
第二章 高山红景天糖基转移酶基因异源表达及其催化功能研究 | 第72-84页 |
1 材料与方法 | 第72-77页 |
·材料 | 第72-73页 |
·方法 | 第73-77页 |
2 结果与分析 | 第77-82页 |
·重组载体pET-28a-UGTC1、pET-28a-UGTC2 和pET-28a-UGTR的鉴定 | 第77-78页 |
·重组载体pET-28a-UGTC1、pET-28a-UGTC2 和pET-28a-UGTR的测序 | 第78页 |
·UGTC1、UGTC2 和UGTR 基因在E.coli 中诱导表达的SDS-PAGE分析 | 第78-79页 |
·纯化后的蛋白的SDS-PAGE 分析 | 第79-80页 |
·蛋白浓度的测定 | 第80页 |
·重组蛋白对酪醇催化性质的研究 | 第80-82页 |
3 讨论 | 第82-83页 |
4 小结 | 第83-84页 |
第三章 发根农杆菌介导的葡萄糖基转移酶转化高山红景天 | 第84-104页 |
1 材料与方法 | 第84-93页 |
·材料 | 第84-85页 |
·方法 | 第85-93页 |
2 结果与分析 | 第93-102页 |
·pCAUGTC1、pCAUGTC2 和pCAUGTR 载体的构建 | 第93-97页 |
·重组载体 pCAUGTC1、pCAUGTC2 和 pCAUGTR 载体的鉴定 | 第97-98页 |
·转基因发根系统的建立 | 第98-99页 |
·转基因发根的鉴定 | 第99-100页 |
·高山红景天转基因发根红景天苷的HPLC 检测 | 第100-102页 |
3 讨论 | 第102-103页 |
·转化系统的选择 | 第102页 |
·转基因系统的构建 | 第102-103页 |
·转基因发根检测 | 第103页 |
4. 小结 | 第103-104页 |
结论 | 第104-106页 |
参考文献 | 第106-120页 |
攻博期间发表的学术论文及其他成果 | 第120-121页 |
中文摘要 | 第121-124页 |
Abstract | 第124-127页 |
致谢 | 第127-128页 |
导师简介 | 第128-129页 |
作者简介 | 第129页 |