1 前言 | 第1-25页 |
1.1 体细胞无性系变异研究的进展 | 第8-9页 |
1.2 体细胞无性系变异的特点 | 第9页 |
1.3 体细胞无性系变异的类型 | 第9页 |
1.4 植物体细胞无性系变异的机理 | 第9-13页 |
1.4.1 细胞水平变异 | 第10页 |
1.4.2 分子水平变异 | 第10-13页 |
1.4.2.1 基因突变 | 第10-11页 |
1.4.2.2 碱基修饰 | 第11页 |
1.4.2.3 基因扩增和丢失 | 第11-12页 |
1.4.2.4 基因重排 | 第12页 |
1.4.2.5 转座子的激活 | 第12-13页 |
1.5 体细胞无性系变异的应用 | 第13-14页 |
1.6 DNA标记技术概述 | 第14-19页 |
1.6.1 RFLP(Restriction fragment length polymorphism) | 第14-15页 |
1.6.2 ISSR标记(inter-simple sequence repeat) | 第15页 |
1.6.3 SCAR标记(Sequence-characterized amplifiedregions) | 第15-16页 |
1.6.4 RGA | 第16页 |
1.6.5 CAPS(cleaved amplified polymorphic sequence) | 第16-17页 |
1.6.6 RAPD(Random Amplified Ploymorphic DNA) | 第17页 |
1.6.7 AFLP(amplified fragment length polymorphism) | 第17-19页 |
1.7 植物病原真菌毒素及其致病的分子机理 | 第19-21页 |
1.8 镰刀菌病害及其防治 | 第21-22页 |
1.9 西瓜枯萎病的发病机理 | 第22-23页 |
1.10 本研究的目的和意义 | 第23-25页 |
2 材料与方法 | 第25-34页 |
2.1 西瓜组织培养植株的再生与抗性植株的筛选 | 第25-26页 |
2.1.1 材料和试剂 | 第25页 |
2.1.2 实验方法 | 第25-26页 |
2.1.2.1 西瓜组织培养植株的再生 | 第25页 |
2.1.2.2 抗性诱导与筛选 | 第25-26页 |
2.1.2.3 再生植株的田间抗病性鉴定 | 第26页 |
2.2 AFLP银染检测实验 | 第26-34页 |
2.2.1 实测材料与试剂 | 第26页 |
2.2.2 实验方法 | 第26-34页 |
2.2.2.1 西瓜植株总DNA的提取 | 第26-28页 |
2.2.2.2 模板DNA质量和浓度的检测 | 第28页 |
2.2.2.3 模板DNA的酶切反应 | 第28-29页 |
2.2.2.4 连接反应 | 第29页 |
2.2.2.5 模板DNA片段的预扩增 | 第29-30页 |
2.2.2.6 AFLP反应的选择性扩增 | 第30页 |
2.2.2.7 PCR产物变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第30-34页 |
2.2.2.7.1 制胶前的准备工作 | 第31页 |
2.2.2.7.2 6%变性聚丙烯酰胺凝胶的制备 | 第31-32页 |
2.2.2.7.3 电泳 | 第32页 |
2.2.2.7.4 银染 | 第32-34页 |
3 结果与分析 | 第34-41页 |
3.1 不同激素配比对外植体愈伤组织形成和分化的影响 | 第34-35页 |
3.2 西瓜组织培养植株再生体系的建立 | 第35页 |
3.3 用镰刀菌酸(FA)诱导筛选西瓜体细胞无性系突变体 | 第35-37页 |
3.3.1 镰刀菌酸使用浓度的确定 | 第35-36页 |
3.3.2 镰刀菌酸对西瓜离体组织培养的影响 | 第36-37页 |
3.3.2.1 镰刀菌酸对不定芽诱导的影响 | 第36-37页 |
3.3.2.2 镰刀菌酸对根系发育的影响 | 第37页 |
3.3.2.3 抗(耐)镰刀菌酸变异体植株的筛选 | 第37页 |
3.4 利用AFLP银染技术对变异植株进行分子检测 | 第37-41页 |
3.4.1 西瓜植株总DNA的提取 | 第38页 |
3.4.2 DNA的酶切以及与adaptor的连接 | 第38页 |
3.4.3 西瓜AFLP银染反应体系的建立和优化 | 第38-39页 |
3.4.3.1 AFLP反应的预扩增 | 第39页 |
3.4.3.2 AFLP反应的选择性扩增 | 第39页 |
3.4.4 选择性PCR反应产物的变性聚丙烯酰胺凝胶电泳及银染显示结果 | 第39-41页 |
3.4.4.1 PCR反应产物在PAGE胶上的电泳 | 第39-40页 |
3.4.4.2 凝胶的银染显示结果 | 第40-41页 |
4 讨论 | 第41-43页 |
5 结论 | 第43-44页 |
版图 | 第44-48页 |
参考文献 | 第48-53页 |
附录 | 第53-58页 |