缩略词表 | 第1-7页 |
摘要 | 第7-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
1 综述 | 第11-32页 |
·雌配子体的形成和双受精 | 第14-16页 |
·胚和胚乳发育 | 第16-23页 |
·胚的发育及影响胚发育的突变体 | 第16-20页 |
·胚乳发育 | 第20-21页 |
·影响胚乳发育的突变体 | 第21-23页 |
·基因印记影响胚乳发育 | 第23-28页 |
·具有不同染色体倍性亲本之间的相互杂交 | 第23-26页 |
·植物印记基因及机理 | 第26-28页 |
·FIS polycomb基因和DNA甲基化的相互作用 | 第28页 |
·种子大小的控制 | 第28-32页 |
·拟南芥中来自母本的珠被(种皮)影响种子大小 | 第29-30页 |
·胚乳影响种子大小 | 第30-32页 |
2 材料与方法 | 第32-44页 |
·材料与生长条件 | 第32页 |
·遗传定位IKU1 | 第32-33页 |
·iku1的候选基因(At2g35230)互补载体构建 | 第33-34页 |
·胚乳特异性启动子(GA3)驱动At2g35230基因的表达载体构建 | 第34页 |
·IKU1蛋白功能区分析的相关载体构建 | 第34-35页 |
·IKU1启动子引导的(GUS表达载体构建 | 第35-36页 |
·Real-time PCR | 第36页 |
·35S启动子驱动的GFP∷IKU1融合表达载体构建 | 第36-38页 |
·35S启动子启动的IKU1基因VQ突变及氨基酸重复区域删除突变的GFP融合表达构建 | 第38页 |
·IKU1启动子驱动的GFP∷IKU1或IKU1部分序列∷GFP融合表达载体构建 | 第38-39页 |
·35S启动子启动的GFP∷MINI3融合表达载体构建 | 第39-40页 |
·酵母双杂交试验的表达载体构建 | 第40页 |
·农杆菌介导培养液的制备 | 第40-41页 |
·基因枪转化洋葱表皮细胞前处理 | 第41页 |
·酵母双杂交方法 | 第41-42页 |
·烟草叶片转化方法 | 第42-43页 |
·本试验中的其它方法 | 第43-44页 |
3 结果 | 第44-71页 |
·IKU1定位及突变位点 | 第44-45页 |
·At2g35230能够遗传互补iku1突变体的基因缺陷,使之结出野生型大小的种子 | 第45-47页 |
·IKU1是包含VQ motif的蛋白 | 第47-54页 |
·GA3∷IKU1表达载体部分互补ikul突变体的种子表现型 | 第54页 |
·VQ motif是IKU1重要的功能区 | 第54-56页 |
·IKU1的广泛表达 | 第56-59页 |
·IKU1是核定位蛋白 | 第59-62页 |
·GFP∷IKU1蛋白表面的亮点形成与IKU1氨基酸重复序列有关 | 第62-63页 |
·带有IKU1启动子的GFP∷IKU1能够使iku1突变体种子恢复野生型性状 | 第63-66页 |
·转录因子MINI3/WRKY10也是核定位蛋白 | 第66-67页 |
·双突变体mini3/iku1单粒重量与单突变体种重差异不明显 | 第67-68页 |
·IKU1与MINI3/WRKY10在酵母中存在相互作用 | 第68-71页 |
4 讨论 | 第71-79页 |
·IKU1编码包含VQ motif的蛋白 | 第71-72页 |
·IKU1基因功能在胚乳 | 第72-75页 |
·GFP∷IKU1结合蛋白定位于细胞核内 | 第75-76页 |
·35S作用下的IKU1具有基因沉默现象 | 第76-77页 |
·核蛋白IKU1与MINI3/WRKY10相互作用,是MINI3/WRKY10的共转录因子 | 第77-79页 |
5 结论 | 第79-81页 |
参考文献 | 第81-92页 |
附录 | 第92-114页 |
S1 35S作用下的IKU1可能发生基因沉默 | 第92-94页 |
S1.1 构建35S∷IKU1 ∷HA | 第92页 |
S1.2 IKU1∷HA转化株检验PCR | 第92页 |
S1.3 提取叶片蛋白检查转化株IKU1∷HA蛋白 | 第92-93页 |
S1.4 结果 | 第93-94页 |
S2 比较MINI3/WRKY10、WRKY25、WRKY33氨基酸序列 | 第94-95页 |
S3 BiFC组合检验IKU1、MINI3两蛋白相互作用 | 第95-98页 |
S3.1 BiFC试验组合及表达载体构建 | 第95-96页 |
S3.2 BiFC组合验证IKU1与MINI3/WRKY10极可能存在相互作用 | 第96-98页 |
S4 IKU1测序引物 | 第98-114页 |
致谢 | 第114-115页 |