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钩虫病患者血清对美洲钩虫抗原反应性分析及美洲钩虫成虫cDNA文库的构建 |
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论文目录 |
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摘要 | 第7-9页 | Abstract | 第9-10页 | 前言 | 第11-15页 | 技术路线 | 第15-16页 | 材料与方法 | 第16-28页 | 1. 材料 | 第16页 | 2. 试剂及其配置 | 第16-18页 | 3. 仪器 | 第18-20页 | 4. 方法 | 第20-28页 | 4.1 钩虫病患者血清对美洲钩虫成虫抗原反应性分析 | 第20-21页 | 4.1.1 钩虫成虫可溶性抗原的制备 | 第20页 | 4.1.2 制备的钩虫成虫可溶性抗原诊断效能的评价 | 第20-21页 | 4.1.3 钩虫病人血清对制备的钩虫成虫抗原的反应性分析 | 第21页 | 4.2 美洲钩虫成虫cDNA文库的构建 | 第21-25页 | 4.2.1 总RNA的抽提与mRNA的纯化 | 第21页 | 4.2.2 cDNA入门文库的构建 | 第21-24页 | 4.2.2.1 cDNA第一链的合成 | 第22页 | 4.2.2.2 cDNA第二链的合成 | 第22页 | 4.2.2.3 cDNA连接attB1接头 | 第22-23页 | 4.2.2.4 合成cDNA纯化 | 第23页 | 4.2.2.5 BP重组反应 | 第23页 | 4.2.2.6 重组质粒转化大肠杆菌感受态细胞 | 第23-24页 | 4.2.2.7 cDNA入门文库滴度测定 | 第24页 | 4.2.3 cDNA表达文库的构建 | 第24-25页 | 4.3 美洲钩虫cDNA表达文库的免疫筛选 | 第25-27页 | 4.3.1 大肠杆菌(E.coli)BL21(DE3)菌株裂解液的制备 | 第25页 | 4.3.2 筛库血清的处理 | 第25-26页 | 4.3.3 构建的cDNA表达文库的免疫筛选 | 第26页 | 4.3.4 阳性克隆的测序和序列分析 | 第26-27页 | 4.4 重组蛋白的表达及评价 | 第27-28页 | 4.4.1 重组蛋白的表达 | 第27页 | 4.4.2 重组蛋白的纯化 | 第27页 | 4.4.3 重组蛋白诊断价值评价 | 第27-28页 | 结果 | 第28-39页 | 1. 钩虫病患者血清对钩虫抗原的反应性分析 | 第28-31页 | 2. 美洲钩虫成虫cDNA文库的构建 | 第31-36页 | 3. 重组蛋白诊断价值评价 | 第36-39页 | 讨论 | 第39-42页 | 参考文献 | 第42-46页 | 附图:表达重组蛋白的生物信息学分析 | 第46-61页 | 致谢 | 第61-62页 | 附件 | 第62-69页 |
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