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当前位置:教育论文中心首页--博士论文--大麦草酸氧化酶与WRKY转录因子参与调控核盘菌抗性的分子机理
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大麦草酸氧化酶与WRKY转录因子参与调控核盘菌抗性的分子机理
 
     论文目录
 
摘要第8-10页
Abstract第10-11页
缩略语表第12-13页
第一章 文献综述第13-30页
    1 病菌的生物学特性第13-17页
        1.1 菌核病的基本介绍第13页
        1.2 核盘菌的生物学特性第13-15页
        1.3 核盘菌致病机理第15-16页
            1.3.1 核盘菌对植物的入侵过程第15页
            1.3.2 草酸在核盘菌浸染中的重要性第15-16页
        1.4 油菜菌核病抗性分子机制研究进展第16-17页
            1.4.1 转录水平研究植物对核盘菌的反应第16-17页
            1.4.2 蛋白组水平研究植物对核盘菌的反应第17页
    2 WRKY转录因子第17-30页
        2.1 WRKY转录因子的结构与分类第18-20页
        2.2 W-box第20-23页
        2.3 WRKY转录因子互作蛋白第23-27页
            2.3.1 WRKY-WRKY之间的互作第23页
            2.3.2 WRKY蛋白与VQ蛋白之间的互作第23-25页
            2.3.3 WRKY转录因子与MAPK之间的互作第25-26页
            2.3.4 与WRKY蛋白互作的其他蛋白第26-27页
        2.4 WRKY转录因子的生物学功能第27-30页
            2.4.1 WRKY蛋白参与植物防卫反应信号的传递第28页
            2.4.2 WRKY转录因子在植物发育过程中的作用第28-30页
第二章 转化大麦草酸氧化酶提高甘蓝型油菜菌核病抗性及其抗性机理初析第30-55页
    1 材料与方法第30-40页
        1.1 试验材料第30-31页
        1.2 大麦草酸氧化酶基因片段的获得及植物转化载体构建第31-34页
        1.3 植物转化载体转化农杆菌第34页
        1.4 甘蓝型油菜转基因植株的获得第34-35页
        1.5 草酸氧化酶酶活测定第35-36页
        1.6 转基因植株菌核病抗性鉴定第36页
        1.7 对油菜叶片用过氧化氢及脱落酸(abscisic acid, ABA)进行处理第36页
        1.8 检测转基因植株的过氧化氢水平与草酸盐水平第36-37页
        1.9 DNA提取及基于PCR水平对转基因单株的鉴定第37-38页
        1.10 RNA分离及定量PCR第38-40页
    2 结果与分析第40-52页
        2.1 植物表达载体的构建及转基因植株的获得第40-41页
        2.2 转基因油菜植株的获得及抗性鉴定第41页
        2.3 转基因植株菌核病抗性鉴定第41-44页
        2.4 转基因植株的草酸氧化酶酶活测定以及接种核盘菌后草酸盐含量测定第44-45页
        2.5 草酸氧化酶酶活的升高是与过氧化氢水平的升高是相关的第45-47页
        2.6 过氧化氢途径相关的基因在转基因材料中被激活第47-50页
        2.7 转基因植株表现出对外施ABA的敏感性第50-52页
    3 讨论第52-55页
        3.1 转BOXO基因可以高甘蓝型油菜对核盘菌的抗性第52页
        3.2 H_2O_2及其途径上相关基因对抗性的贡献第52-54页
        3.3 ABA与菌核病抗性的关系第54-55页
第三章 WRKY15可以调控WRKY33对菌核病的抗性第55-105页
    1 材料与方法第55-69页
        1.1 试验材料第55页
        1.2 油菜水的杨酸处理及核盘菌接种第55-56页
        1.3 RNA提取及q PCR第56页
        1.4 载体构建第56-61页
            1.4.1 过表达载体构建第56-57页
            1.4.2 RNAi载体构建第57页
            1.4.3 启动子分离及启动子载体构建第57-59页
            1.4.4 亚细胞定位载体构建第59-60页
            1.4.5 原核表达载体构建第60页
            1.4.6 Bradford法蛋白定量第60页
            1.4.7 原生质体瞬时表达载体构建第60-61页
            1.4.8 酵母单杂载体构建第61页
        1.5 油菜的农杆菌转化及PCR鉴定第61-62页
        1.6 拟南芥的农杆菌转化第62页
        1.7 转基因材料的PCR检测第62页
        1.8 拟南芥原生质体的转化第62-63页
        1.9 亚细胞定位第63-64页
        1.10 GUS染色第64-65页
        1.11     酵母文库的构建及筛库第65-68页
        1.12     原核表达第68页
        1.13     凝胶阻滞电泳第68页
        1.14     原生质体的瞬时表达第68-69页
    2 结果与分析第69-98页
        2.1 Bn WRKY33在染色体上的定位及序列分析第69-71页
        2.2 Bn WRKY33受到水杨酸和核盘菌的诱导表达第71-72页
        2.3 Bn WRKY33基因的亚细胞定位第72-73页
        2.4 Bn WRKY33参与甘蓝型油菜对菌核病的抗性第73-75页
        2.5 Bn WRKY33过表达提高camalexin合成途径基因的表达第75页
        2.6 Bn WRKY33启动子表达模式分析第75-76页
        2.7 Bn WRKY33启动子截短分析第76-77页
        2.8 酵母文库的构建及筛选第77-81页
        2.9 凝胶阻滞电泳体外验证Bn WRKY15、Bn WRKY33与W-box的结合第81-83页
        2.10 原生质体瞬时表达检测Bn WRKY15、Bn WRKY33与W-box的结合第83-85页
        2.11 Bn WRKY15的生物信息学分析第85-86页
        2.12 Bn WRKY15的表达模式第86-88页
        2.13 Bn WRKY15的亚细胞定位第88-89页
        2.14 Bn WRKY15与Bn WRKY33的转录激活活性第89-91页
        2.15 Bn WRKY15和Bn WRKY33的转录激活或抑制结构域的作图第91-93页
        2.16 Bn WRKY15对Bn WRKY33转录调控的影响机制第93-95页
        2.17 其他WRKY类转录因子对WRKY33的调控第95-97页
        2.18 Bn WRKY15过表达甘蓝型油菜表型鉴定第97-98页
    3 讨论第98-105页
        3.1 Bn WRKY33参与油菜对核盘菌的抗性第98-99页
        3.2 Bn WRKY33启动子上其他两个W-box的作用第99-100页
        3.3 Bn WRKY33参与对自身的信号放大效应第100-101页
        3.4 Bn WRKY15对Bn WRKY33的调控机制第101-102页
        3.5 Bn WRKY15对于Bn WRKY33的调控作用第102-103页
        3.6 Bn WRKY33在植物对环境刺激的反应中起着调控中心的作用第103-105页
参考文献第105-117页
致谢第117-119页
附录1 甘蓝型油菜农杆菌转化所用的培养基与试剂配方第119-120页
附录2 Hoagland营养液配方第120-121页
作者简介及在读期间发表论文第121页

 
 
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