致谢 | 第5-6页 |
摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
第一章 前言 | 第13-17页 |
1.1 文昌鱼简介 | 第13页 |
1.2 文昌鱼资源历史与现状 | 第13-14页 |
1.3 文昌鱼免疫学研究 | 第14-15页 |
1.4 研究目的 | 第15-16页 |
1.5 技术路线 | 第16-17页 |
第2章 文献综述 | 第17-25页 |
2.1 过氧化氢酶的结构与功能 | 第17-21页 |
2.1.1 CAT的结构 | 第17-19页 |
2.1.2 CAT的功能 | 第19-21页 |
2.1.2.1 CAT在微生物中的功能 | 第19页 |
2.1.2.2 CAT在植物中的功能 | 第19-20页 |
2.1.2.3 CAT在动物中的功能 | 第20-21页 |
2.2 近几年研究的十种动物CAT的基因序列分析 | 第21-23页 |
2.3 过氧化氢酶的表达研究 | 第23-25页 |
第三章 文昌鱼过氧化氢酶基因的克隆、生物信息学分析及功能分析 | 第25-59页 |
3.1 前言 | 第25页 |
3.2 材料与方法 | 第25-40页 |
3.2.1 青岛文昌鱼Amphicat基因cDNA序列全长的克隆 | 第25-31页 |
3.2.1.1 文昌鱼总RNA的提取 | 第25-26页 |
3.2.1.2 Amphicat基因cDNA保守序列的获取 | 第26-28页 |
3.2.1.3 cDNA全长的获取 | 第28-30页 |
3.2.1.4 文昌鱼Amphicat基因的克隆与测序 | 第30-31页 |
3.2.2 文昌鱼Amphicat基因DNA序列的克隆 | 第31-33页 |
3.2.2.1 文昌鱼DNA的提取 | 第31-32页 |
3.2.2.2 DNA片段的获取 | 第32-33页 |
3.2.3 文昌鱼Amphicat基因序列分析 | 第33-34页 |
3.2.4 文昌鱼各组织中Amphicat基因表达的初步研究 | 第34-39页 |
3.2.4.1 原位杂交中涉及到的一些试剂的配制 | 第34-36页 |
3.2.4.2 探针制备 | 第36-37页 |
3.2.4.3 文昌鱼石蜡切片的制作 | 第37-38页 |
3.2.4.4 组织切片原位杂交 | 第38-39页 |
3.2.5 重金属铬对文昌鱼Amphicat基因表达影响的研究 | 第39-40页 |
3.2.5.1 材料处理 | 第39页 |
3.2.5.2 引物设计 | 第39页 |
3.2.5.3 PCR反应 | 第39-40页 |
3.3 结果 | 第40-56页 |
3.3.1 总RNA的提取 | 第40-41页 |
3.3.2 CAT基因cDNA保守序列的获取 | 第41-42页 |
3.3.3 3 ’RACE和 5’RACE序列的获取 | 第42-43页 |
3.3.4 CAT基因cDNA全序列的获得 | 第43页 |
3.3.5 文昌鱼DNA的提取 | 第43-44页 |
3.3.6 文昌鱼Amphicat基因DNA序列的获得 | 第44-46页 |
3.3.6.1 DNA序列获取电泳结果图 | 第44-45页 |
3.3.6.2 DNA序列测序结果 | 第45页 |
3.3.6.3 DNA序列拼接后基因结构预测 | 第45-46页 |
3.3.7 Amphicat基因序列分析 | 第46-48页 |
3.3.8 CAT蛋白质的理化性质预测 | 第48页 |
3.3.9 CAT氨基酸序列相似性分析 | 第48-51页 |
3.3.10 CAT蛋白的结构与功能预测 | 第51-52页 |
3.3.11 CAT基因序列的系统进化分析 | 第52-53页 |
3.3.12 原位杂交技术检测Amphicat基因的表达水平 | 第53-54页 |
3.3.13 实时定量PCR检测Amphicat基因在重金属作用下的影响 | 第54-56页 |
3.4 讨论 | 第56-59页 |
3.4.1 文昌鱼过氧化氢酶基因序列与氨基酸序列分析 | 第56页 |
3.4.2 文昌鱼过氧化氢酶结构分析 | 第56-57页 |
3.4.3 文昌鱼过氧化氢酶功能分析 | 第57-59页 |
总结与展望 | 第59-60页 |
参考文献 | 第60-66页 |
附录A | 第66-69页 |
附录B | 第69-76页 |
作者简历 | 第76页 |