摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
英文缩略表 | 第18-19页 |
第一章 引言 | 第19-37页 |
1.1 昆虫的触角感器 | 第20-23页 |
1.1.1 昆虫触角的类型 | 第20-21页 |
1.1.2 昆虫触角嗅觉感受器的种类、形态、结构与功能 | 第21-23页 |
1.2 昆虫触角气味认知的分子机制 | 第23-24页 |
1.3 昆虫气味结合蛋白OBPs研究概述 | 第24-28页 |
1.3.1 气味结合蛋白OBPs种类 | 第24-25页 |
1.3.2 气味结合蛋白OBPs的表达特征 | 第25-26页 |
1.3.3 气味结合蛋白OBPs的结合特性 | 第26页 |
1.3.4 气味结合蛋白OBPs的三维结构 | 第26-27页 |
1.3.5 气味结合蛋白OBPs的生理功能 | 第27-28页 |
1.4 昆虫化学感受蛋白CSPs研究概述 | 第28-30页 |
1.4.1 化学感受蛋白CSPs的基因结构及进化特点 | 第28页 |
1.4.2 昆虫化学感受蛋白CSPs的表达分布 | 第28-29页 |
1.4.3 昆虫化学感受蛋白CSPs的结构特点 | 第29页 |
1.4.4 昆虫化学感受蛋白CSPs的生理功能 | 第29-30页 |
1.5 昆虫嗅觉受体ORs研究概述 | 第30-32页 |
1.5.1 昆虫嗅觉受体ORs的表达分布 | 第30页 |
1.5.2 昆虫嗅觉受体ORs的结构特点 | 第30-31页 |
1.5.3 昆虫嗅觉受体ORs的功能研究 | 第31-32页 |
1.6 离子型受体IRs | 第32-33页 |
1.7 昆虫感觉神经元膜蛋白SNMPs研究概述 | 第33-34页 |
1.8 研究思路 | 第34-37页 |
1.8.1 立题依据 | 第34-35页 |
1.8.2 技术路线 | 第35-37页 |
第二章 大草蛉触角感器的扫描电镜观察 | 第37-42页 |
2.1 材料与方法 | 第37-38页 |
2.1.1 供试昆虫 | 第37页 |
2.1.2 样品的制备与观察 | 第37-38页 |
2.1.3 触角感器的鉴定与命名 | 第38页 |
2.2 结果与分析 | 第38-39页 |
2.2.1 毛形感器(sensilla trichodea, ST) | 第38-39页 |
2.2.2 刺形感器(sensilla chaetica, SC) | 第39页 |
2.2.3 锥形感器(sensilla basiconica, SB) | 第39页 |
2.2.4 B?hm氏鬃毛 (B?hm bristles, BB) | 第39页 |
2.3 讨论 | 第39-42页 |
第三章 基于Illumina RNA Denovo高通量测序的大草蛉嗅觉相关基因的发掘 | 第42-67页 |
3.1 材料与方法 | 第42-54页 |
3.1.1 触角cDNA文库构建和Solexa TruSeq RNA测序 | 第42-43页 |
3.1.2 大草蛉触角转录组生物信息学分析 | 第43-44页 |
3.1.3 大草蛉嗅觉相关基因的鉴定 | 第44页 |
3.1.4 生物信息学分析 | 第44页 |
3.1.5 大草蛉嗅觉基因的表达谱研究(RT-PCR和qRT-PCR) | 第44-54页 |
3.2 结果与分析 | 第54-59页 |
3.2.1 序列组装 | 第54-55页 |
3.2.2 同源比对 | 第55页 |
3.2.3 大草蛉触角unigenes的Gene Ontology (GO)功能分类 | 第55-56页 |
3.2.4 大草蛉气味结合蛋白OBPs基因的鉴定及组织表达谱分析 | 第56-57页 |
3.2.5 大草蛉气味结合蛋白CSPs基因的鉴定及组织表达谱分析 | 第57页 |
3.2.6 大草蛉气味受体基因ORs的鉴定及组织表达谱分析 | 第57页 |
3.2.7 大草蛉离子型受体基因IRs的鉴定及组织表达谱分析 | 第57-58页 |
3.2.8 大草蛉味觉受体基因GRs的鉴定及组织表达谱分析 | 第58页 |
3.2.9 大草蛉感觉神经元膜蛋白基因SNMPs的鉴定及组织表达谱分析 | 第58-59页 |
3.3 讨论 | 第59-67页 |
第四章 大草蛉气味结合蛋白和化学感受蛋白的研究 | 第67-95页 |
4.1 材料与方法 | 第68-75页 |
4.1.1 主要试剂 | 第68页 |
4.1.2 气味化合物标样 | 第68页 |
4.1.3 昆虫饲养和材料准备 | 第68页 |
4.1.4 大草蛉各组织总RNA的提取 | 第68页 |
4.1.5 cDNA的合成 | 第68-69页 |
4.1.6 大草蛉OBPs基因和CSPs基因的编码区序列克隆 | 第69-70页 |
4.1.7 序列分析和进化树构建 | 第70页 |
4.1.8 大草蛉OBPs基因和CSPs基因的表达谱分析 | 第70-71页 |
4.1.9 大草蛉CpalCSP1蛋白和CpalCSP3蛋白的原核表达 | 第71-72页 |
4.1.10 目的蛋白的Western blot检测 | 第72页 |
4.1.11 目的蛋白的纯化 | 第72-73页 |
4.1.12 荧光竞争结合实验 | 第73页 |
4.1.13 大草蛉CpalCSP1蛋白的三维结构预测 | 第73-75页 |
4.2 结果与分析 | 第75-91页 |
4.2.1 序列分析 | 第75-76页 |
4.2.2 序列比对及进化树构建 | 第76-83页 |
4.2.3 大草蛉OBPs基因的组织表达谱分析 | 第83-84页 |
4.2.4 大草蛉CSPs基因的组织表达谱分析 | 第84-85页 |
4.2.5 大草蛉CpalCSP1和CpalCSP3蛋白的原核表达 | 第85-86页 |
4.2.6 荧光竞争结合实验 | 第86-90页 |
4.2.7 大草蛉化学感受蛋白CpalCSP1的三维结构预测 | 第90-91页 |
4.3 讨论 | 第91-95页 |
第五章 大草蛉成虫触角电位研究 | 第95-100页 |
5.1 材料与方法 | 第95-96页 |
5.1.1 供试昆虫 | 第95页 |
5.1.2 样品的制备 | 第95页 |
5.1.3 触角电位(EAG)测定 | 第95-96页 |
5.1.4 数据分析 | 第96页 |
5.2 结果与分析 | 第96-97页 |
5.3 讨论 | 第97-100页 |
第六章 大草蛉感觉神经元膜蛋白基因的研究 | 第100-116页 |
6.1 材料和方法 | 第100-104页 |
6.1.1 主要试剂 | 第100-101页 |
6.1.2 昆虫饲养和材料准备 | 第101页 |
6.1.3 RNA提取 | 第101页 |
6.1.4 第一链cDNA的合成 | 第101-102页 |
6.1.5 大草蛉SNMP基因片段的克隆 | 第102页 |
6.1.6 大草蛉SNMP全长基因的克隆 | 第102-103页 |
6.1.7 生物信息学分析 | 第103页 |
6.1.8 大草蛉SNMP基因的表达谱研究 | 第103-104页 |
6.2 结果与分析 | 第104-113页 |
6.2.1 大草蛉SNMP基因的序列分析 | 第104页 |
6.2.2 大草蛉SNMP蛋白序列比对及进化树构建 | 第104-111页 |
6.2.3 大草蛉SNMP基因在不同组织间的表达谱研究 | 第111页 |
6.2.4 大草蛉SNMP基因在不同发育龄期个体之间的表达谱研究 | 第111页 |
6.2.5 大草蛉SNMP基因在不同发育阶段成虫触角之间的表达谱研究 | 第111页 |
6.2.6 大草蛉雌、雄成虫交配对SNMP基因表达量的影响 | 第111-113页 |
6.3 讨论 | 第113-116页 |
第七章 全文结论与展望 | 第116-121页 |
7.1 大草蛉触角扫描电镜观察 | 第116页 |
7.2 基于大草蛉触角转录组测序基础上嗅觉相关基因的鉴定 | 第116-117页 |
7.3 大草蛉气味结合蛋白和化学感受蛋白的研究 | 第117-118页 |
7.4 大草蛉成虫触角电生理反应研究 | 第118-119页 |
7.5 大草蛉感觉神经元膜蛋白基因的研究 | 第119页 |
7.6 本研究存在的不足及展望 | 第119-121页 |
参考文献 | 第121-137页 |
致谢 | 第137-138页 |
作者简历 | 第138-139页 |