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当前位置:教育论文中心首页--硕士论文--鸡柔嫩艾美耳球虫杨凌株SO7和TA4抗原基因的克隆与表达及免疫保护性试验
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鸡柔嫩艾美耳球虫杨凌株SO7和TA4抗原基因的克隆与表达及免疫保护性试验
 
     论文目录
 
摘要第1-5页
ABSTRACT第5-10页
第一章 鸡球虫病的免疫及疫苗研究进展第10-26页
   ·鸡球虫概述第10-11页
   ·鸡球虫病免疫防治的现状第11-19页
     ·抗球虫药物对鸡球虫病的免疫防治现状第11页
     ·虫体疫苗对鸡球虫病的免疫防治现状第11-14页
     ·鸡球虫基因疫苗对鸡球虫病的免疫防治现状第14-19页
   ·基因疫苗的外源表达系统研究进展第19-21页
   ·鸡球虫病免疫机制第21-24页
     ·细胞免疫第21-22页
     ·体液免疫第22-23页
     ·黏膜免疫第23页
     ·细胞因子第23-24页
   ·展望第24-26页
第二章 柔嫩艾美耳球虫YL 株抗原SO7、TA4 基因的克隆及序列分析第26-43页
   ·材料第26-28页
     ·试验动物第26页
     ·实验所用虫株第26页
     ·菌株、载体第26页
     ·分子生物学试剂和试剂盒第26-27页
     ·培养基及配制第27页
     ·引物第27页
     ·主要试剂第27页
     ·CaCl_2 法转化用材料第27页
     ·琼脂糖凝胶电泳所需材料第27-28页
   ·方法第28-32页
     ·球虫卵囊的复苏与纯化第28页
     ·E. tenella YL 株子孢子总RNA 的提取第28页
     ·SO7、TA4 基因的RT-PCR第28-29页
     ·RT-PCR 产物的回收纯化第29-30页
     ·RT-PCR 产物与pMD18-T easy 的连接第30页
     ·连接产物转化 E.coli DH5α(CaCl_2 法)第30-31页
     ·转化克隆的PCR 鉴定第31页
     ·阳性克隆的序列测定及分析第31-32页
   ·结果第32-42页
     ·SO7、TA4 的RT-PCR 结果第32页
     ·转化菌落的PCR 鉴定第32-33页
     ·SO7、TA4 基因的序列分析第33-42页
   ·讨论第42-43页
     ·E. tenellaYL 株抗原基因TA4/SO7 的克隆第42页
     ·TA4/SO7 基因抗原亲水性、抗原指数等分析第42-43页
第三章 柔嫩艾美耳球虫YL 株抗原基因SO7 和TA4 在大肠埃希菌中的表达第43-56页
   ·材料第43-45页
     ·主要仪器第43页
     ·菌株、载体第43页
     ·引物第43页
     ·常用分子生物学试剂和试剂盒第43-44页
     ·常规化学试剂第44页
     ·CaCl_2 法转化所需材料第44页
     ·培养基第44页
     ·SDS-PAGE 所需材料第44-45页
     ·免疫印迹所需材料第45页
     ·纯化包涵体所用溶液第45页
     ·融合蛋白纯化所用溶液第45页
   ·方法第45-50页
     ·SO7、TA4 基因片段的扩增第45-46页
     ·载体的制备第46-47页
     ·pET-32a(+)与SO7/TA4 的连接第47页
     ·用CaCl2 法将连接产物转化入宿主细菌E. coli BL21第47页
     ·转化克隆的PCR 鉴定第47-48页
     ·PCR 阳性克隆的酶切鉴定第48页
     ·SO7/TA4 在E.coli BL21 的诱导表达第48-49页
     ·重组蛋白的大量表达和纯化第49-50页
     ·蛋白质浓度与纯度的检测第50页
   ·结果第50-54页
     ·SO7、TA4 基因片段的扩增结果第50-51页
     ·转化菌落的PCR 鉴定和质粒的酶切鉴定第51-52页
     ·SO7/TA4 重组大肠埃希菌的诱导表达纯化和Western bloting 鉴定第52-54页
     ·SO7/TA4 融合蛋白浓度的测定第54页
   ·讨论第54-56页
第四章 SO7/TA4 融合蛋白的动物保护性试验第56-61页
   ·材料与方法第56-58页
     ·所需仪器及材料第56页
     ·方法第56-58页
   ·结果第58-60页
     ·临床症状观察结果第58页
     ·盲肠病变计分第58页
     ·OPG 值测定结果第58-59页
     ·鸡只增重变化第59-60页
     ·重组蛋白免疫对球虫感染的综合保护效果第60页
   ·讨论第60-61页
结论第61-62页
参考文献第62-68页
缩略语英汉对照表第68-69页
致谢第69-70页
作者简介第70页

 
 
论文编号BS544274,这篇论文共70
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