中文摘要 | 第1-9页 |
英文摘要 | 第9-11页 |
英文缩略语 | 第11-12页 |
前言 | 第12-13页 |
文献综述 | 第13-29页 |
中药抗肿瘤研究 | 第13-15页 |
1 抗肿瘤中药的研发 | 第13页 |
2 防己的药理学研究 | 第13-15页 |
泛素化蛋白酶体 | 第15-29页 |
1 泛素化蛋白酶体的组成 | 第15-18页 |
2 泛素化蛋白酶体对生理功能的调控 | 第18-24页 |
·泛素化蛋白酶体系统对细胞周期相关蛋白的调控 | 第18-20页 |
·泛素化蛋白酶体系统对细胞凋亡相关蛋白的调控 | 第20-22页 |
·泛素化蛋白酶体系统对转录因子的调控 | 第22-24页 |
3 蛋白酶体功能异常与疾病的关系及蛋白酶体抑制剂的研发 | 第24-26页 |
4 蛋白酶体β1亚基的研究进展 | 第26-29页 |
实验研究 | 第29-90页 |
第一部分 防己诺林碱对PC-3细胞的抗增殖作用研究 | 第29-42页 |
1 实验药品、试剂及仪器 | 第29-31页 |
·实验药品 | 第29页 |
·细胞株 | 第29页 |
·实验试剂 | 第29-30页 |
·实验仪器 | 第30-31页 |
2 试剂配制 | 第31-32页 |
3 实验方法 | 第32-35页 |
·细胞培养 | 第32-33页 |
·MTT检测实验 | 第33页 |
·细胞周期阻滞实验 | 第33-34页 |
·细胞凋亡检测实验 | 第34页 |
·western blot方法检测防己诺林碱对PC-3细胞的促凋亡作用 | 第34-35页 |
·统计学分析 | 第35页 |
4 实验结果 | 第35-41页 |
·MTT检测结果 | 第35-36页 |
·细胞周期组织实验检测结果 | 第36-38页 |
·细胞凋亡实验检测结果 | 第38-40页 |
·Western blot检测防己诺林碱对PC-3细胞凋亡相关蛋白表达水平的影响 | 第40-41页 |
5 本章小结 | 第41-42页 |
第二部分 防己诺林碱体外对PC-3细胞蛋白酶体活性的抑制作用研究 | 第42-51页 |
1 实验药品、试剂及仪器 | 第42-44页 |
·实验药品 | 第42页 |
·细胞株 | 第42页 |
·实验试剂 | 第42-44页 |
·实验仪器 | 第44页 |
2 试剂配制 | 第44-45页 |
3 实验方法 | 第45-46页 |
·防己诺林碱对PC-3细胞蛋白酶体活性检测实验 | 第45页 |
·western blot检测防己诺林碱对PC-3细胞的泛素化蛋白酶体活性 | 第45-46页 |
4 实验结果 | 第46-50页 |
·防己诺林碱对PC-3细胞蛋白酶体活性检测结果 | 第46-47页 |
·防己诺林碱对PC-3细胞的泛素化蛋白酶体活性检测结果 | 第47-50页 |
5 本章总结 | 第50-51页 |
第三部分 防己诺林碱体外对蛋白酶体β1重组蛋白的作用研究 | 第51-59页 |
1 实验药品、试剂及仪器 | 第51-53页 |
·实验药品 | 第51页 |
·菌株 | 第51页 |
·实验试剂 | 第51-53页 |
·实验仪器 | 第53页 |
2 试剂配制 | 第53-54页 |
3 实验方法 | 第54-55页 |
·蛋白酶体β1重组蛋白的纯化实验 | 第54-55页 |
·BIAcore分析蛋白酶体β1重组蛋白与防己诺林碱的结合活性 | 第55页 |
·防己诺林碱对蛋白酶体β1重组蛋白的酶活检测实验 | 第55页 |
4 实验结果 | 第55-58页 |
·蛋白酶体β1重组蛋白的纯化实验结果 | 第55-56页 |
·蛋白酶体β1重组蛋白与防己诺林碱结合活性的检测结果 | 第56-57页 |
·防己诺林碱对蛋白酶体β1重组蛋白的酶活检测实验结果 | 第57-58页 |
5 本章小结 | 第58-59页 |
第四部分 防己诺林碱的在体抗肿瘤作用及蛋白酶体抑制作用在其中的参与 | 第59-68页 |
1 实验药品、试剂及仪器 | 第59-61页 |
·实验药品 | 第59页 |
·细胞株 | 第59页 |
·实验动物 | 第59页 |
·实验试剂 | 第59-61页 |
·实验仪器 | 第61页 |
2 试剂配制 | 第61-62页 |
3 实验方法 | 第62-63页 |
·防己诺林碱在体抗肿瘤作用检测实验 | 第62页 |
·防己诺林碱对裸鼠肿瘤模型的蛋白酶体活性检测实验 | 第62页 |
·western blot检测防己诺林碱在体内的泛素化蛋白酶体活性 | 第62-63页 |
4 实验结果 | 第63-68页 |
·防己诺林碱在体抗肿瘤作用检测实验结果 | 第63-66页 |
·防己诺林碱对裸鼠肿瘤模型的蛋白酶体活性检测结果 | 第66-67页 |
·western blot检测防己诺林碱在体内的泛素化蛋白酶体活性结果 | 第67-68页 |
5 本章小结 | 第68页 |
第五部分 防己诺林碱对其他肿瘤细胞的蛋白酶体活性的抑制作用 | 第68-83页 |
1 实验药品、试剂及仪器 | 第68-70页 |
·实验药品 | 第68页 |
·细胞株 | 第68-69页 |
·实验试剂 | 第69页 |
·实验仪器 | 第69-70页 |
2 试剂配制 | 第70页 |
3 实验方法 | 第70页 |
·MTT检测实验 | 第70页 |
·细胞蛋白酶体活性检测实验 | 第70页 |
4 实验结果 | 第70-82页 |
·MTT检测实验结果 | 第70-74页 |
·细胞蛋白酶体活性检测实验结果 | 第74-82页 |
5 本章小结 | 第82-83页 |
第六部分 防己诺林碱类似结构粉防己碱抑制蛋白酶体活性的作用研究 | 第83-90页 |
1 实验药品、试剂及仪器 | 第83-85页 |
·实验药品 | 第83页 |
·细胞株 | 第83页 |
·菌株 | 第83页 |
·实验试剂 | 第83-84页 |
·实验仪器 | 第84-85页 |
2 试剂配制 | 第85页 |
3 实验方法 | 第85页 |
·粉防己碱对PC-3细胞的MTT检测实验 | 第85页 |
·粉防己碱对PC-3细胞的蛋白酶体活性检测实验 | 第85页 |
·粉防己碱对蛋白酶体β1重组蛋白活性检测实验 | 第85页 |
4 实验结果 | 第85-88页 |
·粉防己碱对PC-3细胞的MTT检测实验结果 | 第85-87页 |
·粉防己碱对PC-3细胞的蛋白酶体活性检测实验结果 | 第87-88页 |
·粉防己碱对蛋白酶体β1重组蛋白活性检测实验结果 | 第88页 |
5 本章小结 | 第88-90页 |
讨论 | 第90-95页 |
结语 | 第95-96页 |
致谢 | 第96-97页 |
参考文献 | 第97-110页 |