中文摘要 | 第1-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
缩略词表 | 第11-12页 |
第一章 引言 | 第12-17页 |
第二章 DACH1 在结直肠癌细胞系中的表达及甲基化改变 | 第17-32页 |
第一节 试剂材料 | 第17-20页 |
·实验材料 | 第17页 |
·主要实验仪器 | 第17-18页 |
·实验试剂与耗材 | 第18-20页 |
第二节 实验方法 | 第20-26页 |
·细胞培养及药物干预 | 第20页 |
·细胞总 RNA 提取及 RT-PCR | 第20-22页 |
·细胞 DNA 提取及甲基化特异性 PCR(MSP) | 第22-24页 |
·亚硫酸盐基因组测序(Bisulfite genomic sequencing,BGS) | 第24-26页 |
第三节 实验结果 | 第26-29页 |
·DACH1 在结直肠癌细胞系中的甲基化改变 | 第26-28页 |
·DACH1 在结直肠癌细胞系中的表达变化 | 第28-29页 |
第四节 讨论 | 第29-31页 |
小结 | 第31-32页 |
第三章 DACH1 在结直肠癌组织中的表达及甲基化改变与临床病理关系研究 | 第32-43页 |
第一节 试剂材料 | 第32-34页 |
·组织标本 | 第32页 |
·主要实验仪器和设备 | 第32-33页 |
·实验试剂与耗材 | 第33-34页 |
第二节 实验方法 | 第34-37页 |
·DACH1 免疫组织化学染色 | 第34-36页 |
·结肠癌组织基因组 DNA 制备及 MSP | 第36-37页 |
·统计学处理 | 第37页 |
第三节 实验结果 | 第37-41页 |
·DACH1 在结肠癌和癌旁组织中的表达差异 | 第37-38页 |
·DACH1 在结肠癌组织标本中的甲基化改变 | 第38-39页 |
·例结直肠癌患者 DACH1 甲基化状态与临床病理资料分析 | 第39-41页 |
第四节 讨论 | 第41-42页 |
小结 | 第42-43页 |
第四章 DACH1 对 TGF-β和 Wnt 信号通路的影响 | 第43-56页 |
第一节 试剂材料 | 第44-45页 |
·实验材料及设备 | 第44页 |
·实验试剂及耗材 | 第44-45页 |
第二节 实验方法 | 第45-47页 |
·Western blot | 第45-46页 |
·双荧光素酶报告基因系统检测 | 第46-47页 |
·免疫组织化学染色(IHC) | 第47页 |
·统计分析 | 第47页 |
第三节 实验结果 | 第47-53页 |
·DACH1 抑制 TGF-β信号通路的活性 | 第47-49页 |
·DACH1 抑制 Wnt 信号通路的活性 | 第49-53页 |
第四节 讨论 | 第53-55页 |
小结 | 第55-56页 |
第五章 DACH1 在体外、体内实验中的抑癌作用 | 第56-68页 |
第一节 试剂材料 | 第56-57页 |
·实验材料和设备 | 第56页 |
·实验试剂和耗材 | 第56-57页 |
·实验动物 | 第57页 |
第二节 实验方法 | 第57-60页 |
·细胞增殖实验 | 第57页 |
·克隆形成实验 | 第57-58页 |
·细胞凋亡及周期检测 | 第58-59页 |
·Western blot 法检测 DACH1 及下游效应蛋白表达 | 第59页 |
·裸鼠成瘤实验 | 第59-60页 |
·统计分析 | 第60页 |
第三节 实验结果 | 第60-65页 |
·DACH1 在体外实验中的抑癌作用 | 第60-62页 |
·DACH1 在体内实验中的抑癌作用 | 第62-65页 |
第四节 讨论 | 第65-67页 |
小结 | 第67-68页 |
第六章 结论 | 第68-69页 |
参考文献 | 第69-75页 |
文献综述(1) | 第75-85页 |
参考文献 | 第80-85页 |
文献综述(2) | 第85-100页 |
Referenses | 第94-100页 |
攻读学位期间发表文章情况 | 第100-101页 |
致谢 | 第101-102页 |