| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-14页 |
| 第一章 绪论 | 第14-64页 |
| ·基因治疗概述 | 第14-16页 |
| ·常用的基于高分子的基因传递系统 | 第16-33页 |
| ·基于聚赖氨酸的阳离子高分子基因传递系统 | 第16-21页 |
| ·聚赖氨酸接枝聚乙二醇共聚物(PLL-g-PEG) | 第17-18页 |
| ·聚赖氨酸和靶向配体的轭合物 | 第18-20页 |
| ·三倍体系统(Terplex system) | 第20-21页 |
| ·基于聚乙烯亚胺的阳离子高分子基因传递系统 | 第21-26页 |
| ·聚乙烯亚胺接枝聚乙二醇共聚物(PEI-g-PEG) | 第22-23页 |
| ·聚乙烯亚胺与靶向配基的轭合物 | 第23-25页 |
| ·水溶性的类脂聚合物(water-soluble lipopolymer,WSLP) | 第25-26页 |
| ·生物可降解的多聚阳离子基因传递系统 | 第26-28页 |
| ·生物可降解的聚赖氨酸类似物(Poly(α-[4-aminobutyl]-L-glycolicacid,PAGA) | 第27页 |
| ·聚β-氨基酯(Poly(β-amino ester)s) | 第27-28页 |
| ·聚2-氨基乙基丙烯磷酸酯(Poly(2-aminoethyl propylene phosphate),PPE-EA) | 第28页 |
| ·可降解的聚乙烯亚胺(Degradable PEIs) | 第28页 |
| ·基于多糖(Polysaccharide)的基因传递系统 | 第28-30页 |
| ·环糊精(Cyclodextrin) | 第28-30页 |
| ·壳聚糖(Chitosan) | 第30页 |
| ·基于树形高分子(Dendrimer)的基因传递系统 | 第30-32页 |
| ·基于中性高分子聚合物的基因传递系统 | 第32-33页 |
| ·阳离子高分子基因传递系统的机制 | 第33-34页 |
| ·阳离子高分子介导基因传递的主要屏障 | 第34-40页 |
| ·细胞内摄阶段 | 第35-37页 |
| ·内涵体逃逸阶段 | 第37-38页 |
| ·经细胞质进入细胞核阶段 | 第38-40页 |
| ·克服主要屏障提高基因转染效率的方法 | 第40-42页 |
| ·细胞内摄阶段 | 第40-41页 |
| ·内涵体逃逸阶段 | 第41-42页 |
| ·经细胞质进入细胞核阶段 | 第42页 |
| ·选题思路 | 第42-45页 |
| 参考文献 | 第45-64页 |
| 第二章 简易制备含有聚乙烯亚胺的生物可降解高分子基因载体 | 第64-86页 |
| ·前言 | 第64-65页 |
| ·实验部分 | 第65-70页 |
| ·试剂 | 第65页 |
| ·聚琥珀酰亚胺(PSIs)的合成 | 第65-66页 |
| ·聚琥珀酰亚胺接枝聚乙烯亚胺(PSI-g-PEIs,PSPs)的合成 | 第66页 |
| ·聚合物的结构表征 | 第66页 |
| ·细胞培养 | 第66-67页 |
| ·pDNA的提取、分离和纯化 | 第67页 |
| ·PSPs的细胞存活率的检测 | 第67页 |
| ·酸碱滴定 | 第67-68页 |
| ·PSP/pDNA复合物的制备 | 第68页 |
| ·凝胶电泳 | 第68页 |
| ·PSP/pDNAs复合物电势和粒径的测定 | 第68页 |
| ·扫描电镜(SEM) | 第68-69页 |
| ·复合物的体外转染实验 | 第69页 |
| ·荧光共聚焦显微技术检测 | 第69-70页 |
| ·结果与讨论 | 第70-82页 |
| ·PSPs的合成及表征 | 第70-74页 |
| ·细胞毒性 | 第74页 |
| ·缓冲能力 | 第74-76页 |
| ·凝胶电泳 | 第76-77页 |
| ·复合物的电势和粒径 | 第77-78页 |
| ·形态学观察 | 第78-79页 |
| ·体外转染 | 第79-81页 |
| ·细胞吞噬实验 | 第81-82页 |
| ·结论 | 第82-83页 |
| 参考文献 | 第83-86页 |
| 第三章 聚乙二醇修饰的聚琥珀酰亚胺接枝聚乙烯亚胺载体的合成及应用 | 第86-108页 |
| ·前言 | 第86页 |
| ·实验部分 | 第86-90页 |
| ·试剂 | 第86-87页 |
| ·异佛尔酮二异氰酸酯活化的聚乙二醇(PEG-NCO)的合成 | 第87页 |
| ·聚乙二醇修饰的聚乙烯亚胺接枝聚琥珀酰亚胺(PSI-g-PEI-g-PEGs)的合成 | 第87页 |
| ·聚合物的结构表征 | 第87-88页 |
| ·细胞培养 | 第88页 |
| ·pDNA的提取、分离和纯化 | 第88页 |
| ·PSI-g-PEI-g-PEGs的细胞存活率的检测 | 第88页 |
| ·酸碱滴定 | 第88-89页 |
| ·PSI-g-PEI-g-PEG/pDNAs复合物的制备 | 第89页 |
| ·凝胶电泳 | 第89页 |
| ·PSI-g-PEI-g-PEG/pDNAs复合物粒径和电位的测定 | 第89页 |
| ·扫描电镜(SEM) | 第89页 |
| ·复合物的体外转染实验 | 第89-90页 |
| ·荧光共聚焦显微技术检测 | 第90页 |
| ·统计学分析 | 第90页 |
| ·结果与讨论 | 第90-104页 |
| ·PSI-g-PEI-g-PEGs的合成与表征 | 第90-94页 |
| ·细胞毒性 | 第94-96页 |
| ·缓冲能力 | 第96-97页 |
| ·凝胶电泳 | 第97-98页 |
| ·粒径和电位的测定 | 第98-99页 |
| ·复合物形态的观察 | 第99-101页 |
| ·体外转染 | 第101-103页 |
| ·细胞吞噬实验 | 第103-104页 |
| ·结论 | 第104-106页 |
| 参考文献 | 第106-108页 |
| 第四章 基于聚乙烯亚胺的肝靶向载体有效地介导p53基因的转染 | 第108-140页 |
| ·前言 | 第108-109页 |
| ·实验部分 | 第109-116页 |
| ·试剂 | 第109-110页 |
| ·乳糖酸修饰的聚乙烯亚胺接枝聚琥珀酰亚胺(PSI-g-PEI-g-LA)的合成 | 第110页 |
| ·聚合物的结构表征 | 第110页 |
| ·细胞培养 | 第110页 |
| ·pDNA的分离和纯化 | 第110-111页 |
| ·PSI-g-PEI-g-LA的细胞存活率的检测 | 第111页 |
| ·酸碱滴定 | 第111页 |
| ·PSI-g-PEI-g-LA/pDNAs复合物的制备 | 第111-112页 |
| ·凝胶电泳 | 第112页 |
| ·PSI-g-PEI-g-LA/pDNAs复合物粒径和电位的测定 | 第112页 |
| ·扫描电镜(SEM) | 第112页 |
| ·复合物的体外转染实验 | 第112-114页 |
| ·荧光素酶分析 | 第112-113页 |
| ·定量的绿色荧光蛋白分析 | 第113页 |
| ·定性的绿色荧光蛋白分析 | 第113页 |
| ·pGL-3细胞内吞的形态学鉴定 | 第113-114页 |
| ·蛋白印迹分析 | 第114页 |
| ·细胞凋亡分析 | 第114-116页 |
| ·细胞凋亡率分析 | 第114-115页 |
| ·细胞凋亡形态学鉴定 | 第115-116页 |
| ·统计学分析 | 第116页 |
| ·结果与讨论 | 第116-134页 |
| ·PSI-g-PEI-g-LA的合成及表征 | 第116-119页 |
| ·细胞毒性 | 第119-121页 |
| ·缓冲能力 | 第121-122页 |
| ·凝胶电泳 | 第122-123页 |
| ·复合物的电势和粒径 | 第123-124页 |
| ·复合物形态的观察 | 第124-125页 |
| ·体外转染 | 第125-130页 |
| ·p53的蛋白印迹分析和细胞凋亡分析 | 第130-134页 |
| ·结论 | 第134-136页 |
| 参考文献 | 第136-140页 |
| 附录 作者在攻读博士学位期间已发表和待发表的论文 | 第140-141页 |
| 致谢 | 第141页 |
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