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当前位置:教育论文中心首页--硕士论文--枸杞抗坏血酸过氧化物酶基因LmAPX的克隆及表达分析
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枸杞抗坏血酸过氧化物酶基因LmAPX的克隆及表达分析
 
     论文目录
 
中文摘要第4-5页
ABSTRACT第5-6页
第一章 文献综述第10-17页
    1.1 活性氧产生途径及对植物的伤害第10-11页
        1.1.1 活性氧的产生途径第10-11页
        1.1.2 活性氧对植物的伤害第11页
    1.2 高等植物中活性氧的清除途径第11-12页
    1.3 抗坏血酸过氧化物酶的研究进展第12-14页
        1.3.1 APX分子和酶学特征第12-13页
        1.3.2 APX基因工程第13页
        1.3.3 APX抗氧化胁迫机制第13-14页
    1.4 研究目的意义与技术路线第14-17页
        1.4.1 研究意义第14-15页
        1.4.2 技术路线第15-17页
第二章 枸杞LmAPX基因的克隆及序列分析第17-29页
    2.1 实验材料第17-20页
        2.1.1 植物材料第17页
        2.1.2 菌株及质粒第17页
        2.1.3 主要试剂第17页
        2.1.4 主要实验仪器第17-18页
        2.1.5 试剂配制第18-19页
        2.1.6 培养基第19-20页
    2.2 实验方法第20-25页
        2.2.1 枸杞APX基因的克隆第20-23页
        2.2.2 大肠杆菌感受态细胞的制备第23页
        2.2.3 热激法转化感受态细胞第23-24页
        2.2.4 PCR产物与pMD18-T载体连接第24页
        2.2.5 质粒提取第24页
        2.2.6 质粒PCR验证第24-25页
        2.2.7 生物信息学分析第25页
    2.3 结果与分析第25-28页
        2.3.1 枸杞叶片总RNA的提取第25-26页
        2.3.2 LmAPX基因全长序列的克隆第26页
        2.3.3 LmAPX基因序列分析第26-28页
    2.4 小结第28-29页
第三章 LmAPX基因的原核表达第29-37页
    3.1 实验材料第29-30页
        3.1.1 菌株及质粒第29页
        3.1.2 主要试剂第29页
        3.1.3 主要仪器第29页
        3.1.4 培养基第29页
        3.1.5 引物设计第29-30页
    3.2 实验方法第30-33页
        3.2.1 原核表达载体的构建第30-31页
        3.2.2 原核表达载体pET-28a-LmAPX的转化第31页
        3.2.3 LmAPX的诱导表达及纯化第31页
        3.2.4 SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳第31-32页
        3.2.5 LmAPX蛋白酶学特性分析第32-33页
    3.3 结果与分析第33-36页
        3.3.1 重组载体pET-28a-LmAPX的构建第33-34页
        3.3.2 融合蛋白的诱导表达及SDS-PAGE第34-35页
        3.3.3 LmAPX蛋白酶学特性分析第35-36页
    3.4 小结第36-37页
第四章 酵母表达载体的构建及转化酵母抗逆性分析第37-45页
    4.1 实验材料第37-38页
        4.1.1 菌株及质粒第37页
        4.1.2 主要试剂第37页
        4.1.3 主要仪器第37页
        4.1.4 培养基第37-38页
    4.2 实验方法第38-41页
        4.2.1 酵母表达载体pYES2-LmAPX的构建及转化大肠杆菌第38页
        4.2.2 酿酒酵母感受态细胞的制备第38-39页
        4.2.3 重组表达载体的酵母转化及鉴定第39-40页
        4.2.4 重组表达载体转化酵母的抗逆性分析第40-41页
    4.3 结果与分析第41-44页
        4.3.1 酵母表达载体pYES2-LmAPX的构建第41页
        4.3.2 酵母阳性转化子的鉴定第41-42页
        4.3.3 重组表达载体转化酵母的抗逆性分析第42-44页
    4.4 小结第44-45页
第五章 枸杞LmAPX基因在烟草中的表达分析第45-61页
    5.1 实验材料第45-46页
        5.1.1 菌株和质粒第45页
        5.1.2 植物材料第45页
        5.1.3 主要仪器第45页
        5.1.4 主要试剂第45页
        5.1.5 所用培养基第45-46页
    5.2 实验方法第46-53页
        5.2.1 植物表达载体的构建及鉴定第46页
        5.2.2 农杆菌转化第46-47页
        5.2.3 烟草叶盘法转化及再生第47-48页
        5.2.4 转基因烟草的分子检测第48-51页
        5.2.5 转基因烟草的耐盐性检测第51-53页
    5.3 实验结果及分析第53-60页
        5.3.1 植物表达载体的构建第53-54页
        5.3.2 植物表达载体的农杆菌转化第54-55页
        5.3.3 转基因烟草植株的获得第55页
        5.3.4 转基因烟草的分子检测第55-60页
    5.4 小结第60-61页
第六章 讨论、结论与展望第61-65页
    6.1 讨论第61-63页
        6.1.1 LmAPX基因的克隆第61页
        6.1.2 LmAPX在大肠杆菌中的表达分析第61-62页
        6.1.3 LmAPX在酵母菌中的表达分析第62页
        6.1.4 LmAPX在植物中的表达分析第62-63页
    6.2 研究总结第63-64页
    6.3 展望第64-65页
参考文献第65-71页
发表论文和科研情况说明第71-72页
致谢第72-73页

 
 
论文编号BS3285276,这篇论文共73
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