摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
第一章 绪论 | 第11-13页 |
第二章 材料与方法 | 第13-29页 |
2.1 材料 | 第13-16页 |
2.1.1 实验动物 | 第13页 |
2.1.2 主要试剂 | 第13-15页 |
2.1.3 实验仪器 | 第15页 |
2.1.4 试剂配制 | 第15-16页 |
2.2 实验流程与方法 | 第16-29页 |
2.2.1 靶向调控BDNF的miRNA的预测和确定 | 第16-22页 |
2.2.1.1 软件预测靶向调控BDNF的miRNA | 第16-17页 |
2.2.1.2 靶向调控BDNF的miRNA的确定 | 第17-22页 |
2.2.2 坐骨神经再生过程中miR-1 和BDNF的表达变化 | 第22-26页 |
2.2.2.1 大鼠坐骨神经模型制备和样品收集 | 第22页 |
2.2.2.2 miRNA引物设计 | 第22页 |
2.2.2.3 Trizol法提取总RNA | 第22-23页 |
2.2.2.4 逆转录反应 | 第23-24页 |
2.2.2.5 Real-time PCR | 第24-25页 |
2.2.2.6 蛋白质凝胶电泳 | 第25-26页 |
2.2.3 miR-1 功能分析 | 第26-28页 |
2.2.3.1 施万细胞的培养与纯化 | 第26-27页 |
2.2.3.2 施万细胞转染 | 第27页 |
2.2.3.3 增殖实验 | 第27页 |
2.2.3.4 迁移实验 | 第27-28页 |
2.2.3.5 ELISA实验 | 第28页 |
2.2.4 统计分析 | 第28-29页 |
第三章 结果 | 第29-45页 |
3.1 miR-1 直接靶向调节BDNF | 第29-34页 |
3.1.1 芯片结果显示大鼠坐骨神经损伤后BD NF m RNA与miR-1 呈现负相关关系 | 第29页 |
3.1.2 软件预测miR-1 与BDNF 3’-UTR存在靶向匹配区 | 第29-31页 |
3.1.3 miR-1 直接靶向调节靶基因BDNF | 第31-34页 |
3.2 miR-1 通过降解BDNF m RNA抑制BDNF的表达 | 第34-36页 |
3.3 miR-1 与BDNF在坐骨神经再生中的表达变化 | 第36-38页 |
3.4 miR-1 抑制施万细胞增殖 | 第38-39页 |
3.5 miR-1 抑制施万细胞迁移 | 第39-40页 |
3.6 miR-1 抑制施万细胞分泌BDNF | 第40-41页 |
3.7 miR-1 通过BDNF抑制施万细胞增殖和迁移 | 第41-45页 |
3.7.1 BDNF knockdown抑制施万细胞BDNF m RNA的表达 | 第41-42页 |
3.7.2 BDNF knockdown 抑制施万细胞的增殖和迁移 | 第42页 |
3.7.3 BDNF knockdown逆转Anti-miR-1 对施万细胞的促增殖效应 | 第42-44页 |
3.7.4 BDNF knockdown逆转Anti-miR-1 对施万细胞的促迁移效应 | 第44-45页 |
第四章 讨论 | 第45-48页 |
第五章 结论 | 第48-49页 |
参考文献 | 第49-52页 |
英文缩写词表 | 第52-54页 |
综述 | 第54-67页 |
参考文献 | 第62-67页 |
公开发表的论文、参加的项目和获得的荣誉 | 第67-68页 |
致谢 | 第68页 |