| 摘要 | 第1-12页 |
| Abstract | 第12-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-34页 |
| 第一节 噬菌体编码的毒力基因和多样性 | 第14-16页 |
| 第二节 Wolbachia基因组及调控宿主生殖方式 | 第16-22页 |
| 第三节 WO噬菌体国内外研究的现状 | 第22-29页 |
| 第四节 实时荧光定量PCR技术概述 | 第29-31页 |
| 第五节 研究内容及创新点 | 第31-33页 |
| 第六节 技术路线 | 第33-34页 |
| 第二章 WO噬菌体的发现 | 第34-43页 |
| 第一节 WO噬菌体在昆虫纲主要类群中的发现 | 第34-40页 |
| 1 材料与方法 | 第34-36页 |
| 2 结果与分析 | 第36-39页 |
| 3 结论与讨论 | 第39-40页 |
| 第二节 WO噬菌体颗粒的提取与显微观察 | 第40-43页 |
| 1 材料与方法 | 第40-41页 |
| 2 结果与分析 | 第41页 |
| 3 结论与讨论 | 第41-43页 |
| 第三章 WO噬菌体与宿主Wolbachia的协同进化关系 | 第43-67页 |
| 1 材料和方法 | 第43-50页 |
| 2 结果与分析 | 第50-61页 |
| ·DNA的提取结果 | 第50-51页 |
| ·orf7基因片段PCR扩增结果 | 第51页 |
| ·转化子的筛选和鉴定 | 第51-52页 |
| ·测序结果 | 第52-57页 |
| ·稻水象甲体内orf7基因序列分析 | 第57-58页 |
| ·麦蛾茧蜂体内orf7基因序列分析 | 第58-60页 |
| ·基于orf7基因序列各昆虫体内WO噬菌体的序列分析 | 第60-61页 |
| ·基于wsp基因建立的昆虫Wolbachia序列分析 | 第61页 |
| 3 结论与与讨论 | 第61-67页 |
| ·标识基因 | 第61-62页 |
| ·序列命名、排序和分析 | 第62页 |
| ·WO噬菌体的多样性分析 | 第62页 |
| ·WO噬菌体的系统发育分析 | 第62-67页 |
| 第四章 Wolbachia和WO噬菌体的侵染关系及稳定性的研究 | 第67-75页 |
| 1 材料与方法 | 第67-68页 |
| 2 结果与分析 | 第68-73页 |
| ·抗生素处理结果 | 第68页 |
| ·连续饲养的米蛾和黑腹果蝇中WO噬菌体存在的稳定性 | 第68-69页 |
| ·wsp基因检测结果 | 第69页 |
| ·4个地区的黑腹果蝇体内WO噬菌体存在的稳定性 | 第69-73页 |
| 3 结论与讨论 | 第73-75页 |
| 第五章 WO噬菌体orf7基因表达及实时荧光定量研究 | 第75-101页 |
| 第一节 米蛾体内WO噬菌体orf7基因与Wolbachia的wsp基因表达情况 | 第76-84页 |
| 1 材料与方法 | 第76-80页 |
| 2 结果与分析 | 第80-83页 |
| ·总RNA的提取结果 | 第80-81页 |
| ·总RNA的OD值检测 | 第81页 |
| ·RT-PCR扩增结果检测 | 第81页 |
| ·cDNA扩增测序结果 | 第81-83页 |
| 3 结论与讨论 | 第83-84页 |
| 第二节 Real-Time PCR方法检测米蛾不同发育时期wsp和orf7基因的相对表达量 | 第84-91页 |
| 1 材料与方法 | 第84-86页 |
| 2 结果与分析 | 第86-90页 |
| ·经过Real-time荧光定量PCR仪分析得到Ct值与荧光强度关系图及溶解曲线图 | 第86-88页 |
| ·数据分析 | 第88-90页 |
| 3 结论与讨论 | 第90-91页 |
| 第三节 Real-Time PCR方法检测三种昆虫体内wsp基因和orf7基因的相对表达量 | 第91-101页 |
| 1 材料与方法 | 第91-92页 |
| 2 结果与分析 | 第92-99页 |
| ·米蛾、黑腹果蝇、麦蛾茧蜂总RNA的提取结果 | 第92页 |
| ·三种昆虫总RNA的Real-time PCR凝胶电泳检测结果 | 第92-94页 |
| ·标准曲线的制定 | 第94-97页 |
| ·wsp和orf7基因定量结果及相对表达量的计算 | 第97-99页 |
| 3 结论与讨论 | 第99-101页 |
| 第六章 结论与讨论 | 第101-106页 |
| 1 主要结论 | 第101-102页 |
| 2 讨论 | 第102-106页 |
| 参考文献 | 第106-120页 |
| 致谢 | 第120-121页 |
| 附录1:本论文常用缩写词及英汉对照 | 第121-122页 |
| 附录2:转化子的蓝白筛选 | 第122页 |
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