| 摘要 | 第1-6页 |
| Summary | 第6-8页 |
| 目录 | 第8-11页 |
| 缩略词表 | 第11-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-23页 |
| 1 引言 | 第12页 |
| 2 奶牛乳房炎的发病原因 | 第12-13页 |
| 3 链球菌性和肠球菌性乳房炎 | 第13-22页 |
| ·肠球菌和链球菌的关系 | 第13页 |
| ·引起奶牛乳房炎的链球菌和肠球菌 | 第13-14页 |
| ·链球菌和肠球菌的特征 | 第14-15页 |
| ·链球菌和肠球菌的致病机理 | 第15-18页 |
| ·链球菌致病机理 | 第15-16页 |
| ·肠球菌致病机理 | 第16-18页 |
| ·细胞溶血素（Cyl） | 第16页 |
| ·明胶酶(GelE) | 第16-17页 |
| ·肠球菌表面蛋白（Esp） | 第17页 |
| ·肠球菌胶原蛋白粘附素（Ace） | 第17页 |
| ·聚集物质（AS） | 第17-18页 |
| ·链球菌性乳房炎 | 第18-19页 |
| ·环境链球菌性乳房炎 | 第18页 |
| ·传染性乳房炎 | 第18-19页 |
| ·链球菌性乳房炎的流行病学 | 第19-20页 |
| ·链球菌性乳房炎的防治措施 | 第20-21页 |
| ·做好饲养管理工作增强奶牛机体抵抗力 | 第20页 |
| ·链球菌乳房炎的治疗 | 第20-21页 |
| ·抗生素治疗 | 第20页 |
| ·非抗生素治疗 | 第20-21页 |
| ·人源性和动物源性肠球菌病的研究进展 | 第21-22页 |
| 4 实验目的意义 | 第22-23页 |
| 第二章 研究内容 | 第23-50页 |
| 实验一：奶牛乳房炎无乳链球菌的分离及 PCR 鉴定 | 第23-33页 |
| 1.材料与方法 | 第24-27页 |
| ·待检材料 | 第24页 |
| ·主要设备及试剂 | 第24页 |
| ·主要设备 | 第24页 |
| ·试剂 | 第24页 |
| ·方法 | 第24-27页 |
| ·无乳链球菌的分离 | 第24-25页 |
| ·细菌分子鉴定 | 第25-26页 |
| ·PCR 扩增片段的琼脂糖凝胶回收 | 第26页 |
| ·PCR 产物连接 T 载体 | 第26页 |
| ·转化大肠杆菌 DH5a 感受态细胞 | 第26-27页 |
| 2.结果 | 第27-31页 |
| ·无乳链球菌分离结果 | 第27页 |
| ·病原菌与菌落形态 | 第27-28页 |
| ·无乳链球菌 DNA 提取结果 | 第28-29页 |
| ·16s rRNA 与 cfb 基因及系统发育分析 | 第29-31页 |
| 3.讨论 | 第31-33页 |
| 实验二：利用 16s～23s rRNA RFLP 分型及 16s rRNA 基因序列鉴定奶牛乳房炎链球菌和肠球菌 | 第33-42页 |
| 1.材料与方法 | 第33-36页 |
| ·待检材料 | 第33页 |
| ·主要试剂及菌株 | 第33-34页 |
| ·试剂 | 第33-34页 |
| ·菌株 | 第34页 |
| ·方法 | 第34-36页 |
| ·细菌分离与纯化 | 第34页 |
| ·细菌 16s rRNA 基因和 16s～23s rRNA 区间基因的克隆 | 第34-35页 |
| ·16s rRNA 扩增片段的琼脂糖凝胶回收 | 第35页 |
| ·参考菌株和分离株细菌 16s～23s rRNA 基因扩增产物的 RFLP 分析 | 第35页 |
| ·16s rRNA 基因测序 | 第35-36页 |
| 2.结果 | 第36-39页 |
| ·细菌分离结果 | 第36页 |
| ·16s rRNA 和 16s～23s rRNA 基因扩增 | 第36-38页 |
| ·16s～23s rRNA 基因 RFLP 酶切分析结果 | 第38页 |
| ·分离株 16s～23s rRNA 基因 RFLP 归类和 16s rRNA 测序结果 | 第38-39页 |
| 3.讨论 | 第39-42页 |
| 实验三：牛源性肠球菌的分离鉴定及毒力因子基因的检测 | 第42-50页 |
| 1 材料与方法 | 第42-44页 |
| ·菌株 | 第42页 |
| ·主要试剂 | 第42-43页 |
| ·方法 | 第43-44页 |
| ·肠球菌的分离鉴定 | 第43-44页 |
| ·样品采集与初步鉴定无菌 | 第43页 |
| ·可疑菌株的 PCR 鉴定 | 第43-44页 |
| ·6 种毒力因子基因的检测 | 第44页 |
| ·引物的设计 | 第44页 |
| ·PCR 扩增及测序 | 第44页 |
| 2 结果 | 第44-48页 |
| ·肠球菌的分离鉴定 | 第44-45页 |
| ·扩增产物的琼脂糖凝胶电泳 | 第45-46页 |
| ·分离菌株对 6 种毒力因子基因的携带情况 | 第46-47页 |
| ·毒力基因组合情况 | 第47-48页 |
| 3 讨论 | 第48-50页 |
| 总结论 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
| 作者简介 | 第61-62页 |
| 导师简介 | 第62-63页 |
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