摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-15页 |
文献综述 | 第15-29页 |
第一章 FOXC2研究进展 | 第15-19页 |
·FOXC2的表达及功能 | 第15-16页 |
·FOXC2对脂代谢的影响 | 第16-17页 |
·FOXC2调控脂代谢的分子机制 | 第17-19页 |
第二章 细胞内质网应激研究进展 | 第19-24页 |
·内质网应激与未折叠蛋白反应 | 第19-20页 |
·内质网应激与脂代谢 | 第20-22页 |
·FOXC2家族成员与内质网应激 | 第22页 |
·内质网应激相关的通路 | 第22-24页 |
第三章 细胞自噬研究进展 | 第24-29页 |
·自噬的过程 | 第25页 |
·细胞自噬与脂代谢 | 第25-26页 |
·FOXC2家族成员与细胞自噬 | 第26-27页 |
·自噬相关的信号通路 | 第27-29页 |
实验研究 | 第29-56页 |
前言 | 第29-30页 |
第四章 FOXC2基因对脂肪细胞内质网应激的影响 | 第30-36页 |
·材料 | 第30页 |
·细胞 | 第30页 |
·主要试剂 | 第30页 |
·设备仪器 | 第30页 |
·方法 | 第30-31页 |
·质粒载体提取 | 第30-31页 |
·细胞培养 | 第31页 |
·质粒载体转染 | 第31页 |
·反转录及实时定量PCR | 第31页 |
·细胞总RNA提取流程 | 第31页 |
·细胞总蛋白提取 | 第31页 |
·油红O染色流程 | 第31页 |
·数据统计及分析 | 第31页 |
·结果与分析 | 第31-34页 |
·衣霉素诱导内质网应激模型的构建 | 第31-32页 |
·Foxc2超表达及干扰效率检测 | 第32-33页 |
·Foxc2及 4-BPA对内质网应激因子的影响 | 第33-34页 |
·Foxc2调控内质网应激的相关信号通路 | 第34页 |
·讨论 | 第34-35页 |
·小结 | 第35-36页 |
第五章 FOXC2基因对衣霉素诱导的脂肪细胞自噬的影响 | 第36-43页 |
·材料 | 第36-37页 |
·细胞 | 第36页 |
·主要试剂 | 第36页 |
·仪器设备 | 第36-37页 |
·方法 | 第37页 |
·质粒载体提取 | 第37页 |
·细胞培养 | 第37页 |
·细胞转染 | 第37页 |
·MDC(单丹磺酰尸胺)染色步骤 | 第37页 |
·脂肪细胞内总RNA的提取 | 第37页 |
·cDNA的反转录及RT-PCR测定 | 第37页 |
·脂肪细胞内总蛋白的提取 | 第37页 |
·Western Blot检测 | 第37页 |
·数据统计及分析 | 第37页 |
·结果与分析 | 第37-41页 |
·衣霉素诱导脂肪细胞内自噬模型的建立 | 第37-38页 |
·MDC染色和荧光显微镜检测 | 第38-39页 |
·Foxc2对内质网应激诱导的自噬的影响 | 第39-40页 |
·Foxc2调控衣霉素诱导的自噬的相关通路 | 第40-41页 |
·讨论 | 第41-42页 |
·小结 | 第42-43页 |
第六章 FOXC2对EBSS诱导的脂肪细胞自噬的影响 | 第43-49页 |
·材料 | 第43页 |
·3T3-L1脂肪细胞 | 第43页 |
·主要试剂 | 第43页 |
·仪器设备 | 第43页 |
·方法 | 第43-44页 |
·质粒载体提取 | 第43-44页 |
·细胞培养 | 第44页 |
·脂肪细胞的转染 | 第44页 |
·脂肪细胞总RNA提取 | 第44页 |
·cDNA的反转录及RT-PCR | 第44页 |
·脂肪细胞总蛋白提取 | 第44页 |
·Western Blot检测 | 第44页 |
·数据统计及分析 | 第44页 |
·实验结果与分析 | 第44-47页 |
·EBSS诱导的 3T3-L1脂肪细胞自噬模型的检测 | 第44-45页 |
·MDC染色及GFP-LC3荧光显微镜检测 | 第45页 |
·Foxc2对EBSS诱导的脂肪细胞自噬的影响 | 第45-46页 |
·Foxc2调控EBSS诱导的脂肪细胞自噬的信号通路 | 第46-47页 |
·讨论 | 第47-48页 |
·小结 | 第48-49页 |
第七章 FOXC2通过内质网应激与自噬影响脂肪细胞生热作用 | 第49-56页 |
·材料 | 第49-50页 |
·3T3-L1脂肪细胞 | 第49页 |
·主要试剂 | 第49-50页 |
·仪器设备 | 第50页 |
·方法 | 第50-51页 |
·质粒载体提取 | 第50页 |
·细胞培养 | 第50页 |
·3T3-L1脂肪细胞的转染 | 第50页 |
·3T3-L1脂肪细胞的分化 | 第50页 |
·3T3-L1脂肪细胞总RNA提取 | 第50页 |
·反转录及实时定量PCR (RT-PCR) | 第50页 |
·3T3-L1脂肪细胞总蛋白提取 | 第50页 |
·Western Blot检测 | 第50页 |
·数据统计及分析 | 第50-51页 |
·实验结果与分析 | 第51-54页 |
·内质网应激与自噬发生或抑制时对Foxc2和生热基因表达的影响 | 第51-52页 |
·内质网应激与自噬发生或抑制条件下对脂滴沉积的影响 | 第52页 |
·Foxc2通过影响内质网应激与自噬促进脂肪细胞内生热基因的表达 | 第52-54页 |
·讨论 | 第54-55页 |
·小结 | 第55-56页 |
结论、创新点以及进一步研究内容 | 第56-57页 |
1 结论 | 第56页 |
2 创新点 | 第56页 |
3 进一步研究内容 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-62页 |
附录 | 第62-71页 |
致谢 | 第71-72页 |
作者简介 | 第72页 |