内容提要 | 第4-5页 |
中文摘要 | 第5-9页 |
Abstract | 第9-13页 |
英文缩略表 | 第16-18页 |
第1章 文献综述 | 第18-28页 |
1.1 MicroRNA 及其特点和作用 | 第18页 |
1.2 miRNAs 与肺癌 | 第18-23页 |
1.2.1 肺癌诊断中的 miRNAs | 第19-22页 |
1.2.2 miRNAs 与肺癌的治疗 | 第22-23页 |
1.3 microRNA 与电离辐射 | 第23-24页 |
1.4 miR-9 与肿瘤 | 第24-25页 |
1.5 microRNA 的临床应用及其前景 | 第25页 |
1.6 NRP1 及其对肿瘤的影响 | 第25-26页 |
1.7 立题依据 | 第26-28页 |
第2章 材料与方法 | 第28-45页 |
2.1 主要器材与试剂 | 第28-31页 |
2.1.1 实验器材 | 第28页 |
2.1.2 实验试剂 | 第28-31页 |
2.2 主要仪器 | 第31-32页 |
2.3 试剂的配制 | 第32-34页 |
2.3.1 细胞培养相关试剂的配制 | 第32页 |
2.3.2 细菌培养相关试剂的配制 | 第32-33页 |
2.3.3 Western blot 实验相关试剂的配制 | 第33-34页 |
2.4 细胞株 | 第34页 |
2.4.1 细胞培养 | 第34页 |
2.4.2 细胞转染 | 第34页 |
2.5 照射条件 | 第34-35页 |
2.6 应用生物信息学对靶基因的预测 | 第35页 |
2.7 双荧光报告基因分析 | 第35-39页 |
2.7.1 荧光素酶报告基因载体的构建 | 第35-38页 |
2.7.2 荧光素酶报告基因分析(Liciferase reporter assay) | 第38-39页 |
2.8 细胞表型相关指标的检测 | 第39-41页 |
2.8.1 MTT 实验 | 第39页 |
2.8.2 细胞周期 | 第39页 |
2.8.3 细胞凋亡率的检测:Annexin V/PI 双染法 | 第39-40页 |
2.8.4 Transwell 法 | 第40-41页 |
2.9 细胞放射敏感性指标的检测 | 第41-42页 |
2.10 Real-Time PCR 法检测转录水平的变化 | 第42-43页 |
2.11 Western blot 法检测蛋白水平的变化 | 第43-44页 |
2.12 统计学分析 | 第44-45页 |
第3章 实验结果 | 第45-56页 |
3.1 验证 miR-9 与 NRP1 的靶向调控关系 | 第45-48页 |
3.1.1 miR-9 靶基因的预测 | 第45页 |
3.1.2 pEZX-MT05-NRP1-3'UTR 质粒的构建 | 第45-46页 |
3.1.3 pEZX-MT05-NRP1-3'UTR 突变质粒的构建 | 第46页 |
3.1.4 双荧光素酶报告基因实验 | 第46-47页 |
3.1.5 miR-9 对 A549 细胞 NRP1 基因转录水平的影响 | 第47-48页 |
3.1.6 miR-9 对 A549 细胞 NRP1 蛋白表达水平的影响 | 第48页 |
3.2 miR-9 靶向调控 NRP1 对 A549 细胞辐射反应的影响 | 第48-52页 |
3.2.1 miR-9 对 A549 细胞生长增殖的影响 | 第48-49页 |
3.2.2 miR-9 对细胞周期的影响 | 第49-50页 |
3.2.3 miR-9 对 A549 细胞凋亡率的影响 | 第50-51页 |
3.2.4 miR-9 对 A549 细胞迁移、侵袭能力的影响 | 第51-52页 |
3.3 miR-9 增强 A549 细胞的放射敏感性 | 第52-53页 |
3.3.1 miR-9 对 A549 细胞集落形成能力的影响 | 第52-53页 |
3.4 miR-9 增强 A549 细胞的放射敏感性的信号通路机制 | 第53-56页 |
第4章 讨论 | 第56-61页 |
4.1 miR-9 与靶基因 NRP1 | 第57页 |
4.2 miR-9 靶向调控 NRP1 对 A549 细胞辐射反应的影响 | 第57-59页 |
4.3 miR-9 增强 A549 细胞的辐射敏感性 | 第59页 |
4.4 miR-9 增强 A549 细胞辐射敏感性的信号通路机制 | 第59-61页 |
结论 | 第61-62页 |
参考文献 | 第62-68页 |
作者简介及在学期间所取得的科研成果 | 第68-69页 |
致谢 | 第69页 |