| 摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-7页 |
| 第1章 绪论 | 第10-21页 |
| 1.1 研究现状 | 第10-12页 |
| 1.1.1 蜂王浆 | 第10-11页 |
| 1.1.2 蜂王浆的生物活性 | 第11-12页 |
| 1.2 糖蛋白及其糖链的研究 | 第12-18页 |
| 1.2.1 糖基化类型 | 第12页 |
| 1.2.2 N-糖链的研究方法 | 第12-18页 |
| 1.3 糖蛋白中糖链与免疫的关系 | 第18-19页 |
| 1.4 研究内容和意义 | 第19-20页 |
| 1.5 研究技术路线 | 第20-21页 |
| 第2章 蜂王浆主蛋白分离、纯化与鉴定 | 第21-30页 |
| 2.1 材料 | 第21-22页 |
| 2.1.1 实验试剂 | 第21页 |
| 2.1.2 实验仪器与设备 | 第21-22页 |
| 2.2 实验方法 | 第22-25页 |
| 2.2.1 MRJPs的提取分离 | 第22页 |
| 2.2.2 十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis, SDS-PAGE)鉴定 | 第22-24页 |
| 2.2.3 蜂王浆蛋白含量的测定 | 第24页 |
| 2.2.4 蜂王浆总糖含量的测定 | 第24页 |
| 2.2.5 蜂王浆中10-HDA含量测定 | 第24页 |
| 2.2.6 LC-MS鉴定MRJP1、MRJP2和MRJP3蛋白 | 第24-25页 |
| 2.3 实验结果与讨论 | 第25-29页 |
| 2.3.1 聚丙烯酰胺电泳(SDS-PAGE)结果分析 | 第25-26页 |
| 2.3.2 蜂王浆蛋白含量的结果分析 | 第26-27页 |
| 2.3.3 蜂王浆总糖含量的结果分析 | 第27-28页 |
| 2.3.4 蜂王浆中10-HDA含量的结果分析 | 第28页 |
| 2.3.5 蜂王浆主蛋白鉴定结果分析 | 第28-29页 |
| 2.4 本章小结 | 第29-30页 |
| 第3章 蜂王浆主蛋白N-糖链的结构表征 | 第30-46页 |
| 3.1 实验材料 | 第30-31页 |
| 3.1.1 实验试剂与材料 | 第30页 |
| 3.1.2 实验设备 | 第30-31页 |
| 3.2 实验方法 | 第31-32页 |
| 3.2.1 胰蛋白酶酶解 | 第31页 |
| 3.2.2 C18 Sep-Pak柱纯化糖肽 | 第31页 |
| 3.2.3 N-糖链的释放与纯化 | 第31页 |
| 3.2.4 N-糖链的甲基化 | 第31-32页 |
| 3.2.5 质谱分析N-糖链 | 第32页 |
| 3.2.6 质谱数据解析 | 第32页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第32-44页 |
| 3.3.1 N-糖链结构解析 | 第32-44页 |
| 3.4 本章小结 | 第44-46页 |
| 第4章 去糖基化对蜂王浆主蛋白1(MRJP1)免疫活性的影响 | 第46-61页 |
| 4.1 实验材料 | 第46-47页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第46页 |
| 4.1.2 实验试剂 | 第46-47页 |
| 4.1.3 实验设备 | 第47页 |
| 4.2 实验方法 | 第47-52页 |
| 4.2.1 蜂王浆主蛋白1(MRJP1)线性抗原表位预测 | 第47-48页 |
| 4.2.2 MRJP1多克隆抗体的制备 | 第48页 |
| 4.2.3 多克隆抗体效价的测定 | 第48-49页 |
| 4.2.4 去糖基化MRJP1对过敏原免疫活性影响 | 第49-51页 |
| 4.2.5 小鼠免疫方案 | 第51-52页 |
| 4.2.6 小鼠血清中蜂王浆主蛋白1特异性IgE含量的测定 | 第52页 |
| 4.2.7 数据统计学分析 | 第52页 |
| 4.3 实验结果与讨论 | 第52-60页 |
| 4.3.1 MRJP1抗原表位预测与分析 | 第52-55页 |
| 4.3.2 MRJP1效价评价 | 第55-56页 |
| 4.3.3 去糖基化免疫评价 | 第56-59页 |
| 4.3.4 小鼠血清中特异性IgE含量分析 | 第59-60页 |
| 4.4 本章小结 | 第60-61页 |
| 第5章 结论与展望 | 第61-63页 |
| 5.1 结论 | 第61页 |
| 5.2 创新点 | 第61-62页 |
| 5.3 展望 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-76页 |
| 附录一 10-HDA的液相色谱图 | 第76-79页 |
| 附录二 蛋白鉴定图谱 | 第79-81页 |
| 附录三 中英文名词术语对照表 | 第81-82页 |
| 致谢 | 第82-83页 |
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