摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
目录 | 第6-8页 |
1 前言 | 第8-24页 |
·橡胶树种质资源概述 | 第8-9页 |
·巴西橡胶树REF、RT、SRPP基因的国内外研究现状 | 第9-11页 |
·橡胶延长因子(Rubber Elongation Factor,REF) | 第9-10页 |
·橡胶转移酶(Rubber Transferase,RT) | 第10-11页 |
·小橡胶粒子蛋白(small rubber particle protein,SRPP) | 第11页 |
·橡胶核型研究进展 | 第11页 |
·植物原位PCR的研究进展 | 第11-16页 |
·原位PCR的基本原理 | 第12-13页 |
·植物原位PCR技术的主要操作步骤 | 第13-15页 |
·植物原位PCR应用进展 | 第15-16页 |
·植物荧光原位杂交技术的研究进展 | 第16-23页 |
·荧光原位杂交技术的主要操作步骤 | 第16-20页 |
·多色荧光原位杂交技术 | 第20页 |
·植物原位杂交的应用进展 | 第20-23页 |
·橡胶树基因定位研究进展 | 第23页 |
·本研究的目的意义和技术路线 | 第23-24页 |
·本研究的目的意义 | 第23-24页 |
·技术路线 | 第24页 |
2 材料和方法 | 第24-33页 |
·试验材料与试剂 | 第24-25页 |
·供试材料 | 第24-25页 |
·主要的仪器 | 第25页 |
·试剂 | 第25页 |
·试验方法 | 第25-33页 |
·染色体标本的制备 | 第25-26页 |
·橡胶树DNA提取 | 第26-27页 |
·特异引物合成与筛选 | 第27-29页 |
·原位PCR技术流程 | 第29-31页 |
·荧光原位杂交技术流程 | 第31-33页 |
·信号位置的确定 | 第33页 |
3 结果与分析 | 第33-47页 |
·橡胶树染色体制片技术体系的优化 | 第33-34页 |
·基因特异DNA序列的扩增与分析 | 第34-37页 |
·橡胶树基因组DNA的提取 | 第34-35页 |
·基因特异DNA序列的PCR扩增与测序结果 | 第35-37页 |
·原位PCR体系的优化 | 第37-39页 |
·甲酰胺的处理 | 第38页 |
·后处理的优化 | 第38-39页 |
·橡胶树荧光原位杂交技术体系的建立 | 第39-42页 |
·探针的制备及标记效果的检测 | 第39页 |
·标本预处理的优化 | 第39-41页 |
·橡胶树基因特异DNA序列的荧光原位杂交体系的建立 | 第41-42页 |
·橡胶树REF、RT和SRPP基因的染色体定位分析 | 第42-47页 |
·橡胶树REF基因的原位PCR和FISH分析 | 第42-44页 |
·橡胶树RT和SRPP基因的FISH定位分析 | 第44-47页 |
4 讨论 | 第47-51页 |
·关于染色体标本制备的问题 | 第47页 |
·关于原位PCR技术的改进 | 第47-48页 |
·关于FISH技术的信号问题 | 第48-49页 |
·关于原位PCR与FISH检测的灵敏度 | 第49-51页 |
5 结论 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-60页 |
附录 | 第60-63页 |
缩略语 | 第63-64页 |
致谢 | 第64页 |