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猪带绦虫囊尾蚴在实验感染家猪体内的分布及发育
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【中医养生学论文】作者：方文, 肖靓靓, 包怀恩, 牟荣【摘要】 目的： 探讨猪带绦虫卵实验感染中间宿主家猪后，不同时期囊尾蚴在家猪体内各个器官的分布及发育情况。方法: 以猪带绦虫卵实验感染20～30日龄的家猪4头，在感染后不同时间宰杀感染家猪，肉眼观察囊尾蚴在家猪体内各个器官上的分布数量及大小。结果: 感染后第40天剖杀家猪，多数脏器和组织，如肝脏、心脏、脑、肺、舌、四肢及驱干肌肉内有未成熟囊尾蚴寄生；感染第80天时各器官及组织内囊尾蚴先后发育成熟，囊尾蚴随感染时间增加而逐渐增大；感染第120天或第150天时，除肝脏外各器官及组织内仍可见大量成熟囊尾蚴，且无死亡和钙化现象，而此时肝脏内囊尾蚴几乎全部死亡和钙化；在实验全过程中，肾脏和脾脏未见囊尾蚴寄生。结论: 猪囊尾蚴除在四肢肌肉等主要寄生部位生长外，还可以在猪的肝脏内寄生，但是随感染时间增加会逐渐死亡和钙化，表明在当前生猪快速出栏养殖过程中，猪肝脏无囊尾蚴寄生时，其余主要寄生部位如四肢和驱干肌肉内仍有囊尾蚴寄生，提示在生猪检验检疫工作中应予以重视。
【关键词】 囊尾蚴； 有钩绦虫，猪肉绦虫； 猪； 肝； 心脏； 脑； 肺； 肌，骨骼
［Abstract］ Objective: To study the distribution and development process of Cysticercus cellulosae in organs of pigs infected with Taenia solium. Methods: Four pigs of 20～30 day-old were infected with T. solium eggs at a dose of 8×104 each pig. The pigs were reared for different periods of time after the infection before sacrificed and the locations, sizes, and quantity of Cysticercus cellulosae in pigs were observed. Results: Immature cysticerci were found in liver, heart, brain, lungs, tongue, and muscles of limbs and body on the 40th day. On the 80th day, cysticerci were bigger and matured. On the 120th and 150th days, large quantity of mature and alive cysticerci were found in all infected organs except liver in which the cysticerci gradually died. Cysticerci were not found to grow in kidney or spleen all the time. Conclusions: Cysticercus ellulosae could live in liver not only in muscle as we thought before. During the fast process of sending pigs to go into the market, it should be aware that even though cysticerci are not found in liver, they may be still in suitable locations of muscles, and more attention should be paid to pig quarantine.
［Key words］cysticercus; Taenia solium；swine；liver; heart; brain; lung; muscle, skeletal
猪带绦虫病是在世界范围内流行、严重危害人类健康的肠道蠕虫病之一[1]。猪带绦虫幼虫寄生于中间宿主猪，也可寄生于人体，引起严重的囊尾蚴病，该病不仅给养殖业带来巨大经济损失,而且给人民健康带来严重威胁。文献记载寄生在猪体内的囊尾蚴主要分布在其全身运动较多的肌肉以及脑、眼等处[2]。为了进一步了解囊尾蚴可否在中间宿主的其他部位寄生，实验采用猪带绦虫虫卵感染4头家猪，观察不同宰杀时期囊尾蚴在家猪体内的分布及成熟情况，结果发现除肌肉、脑是囊尾蚴寄生的主要部位外，肝脏也是囊尾蚴寄生的部位，但肝脏寄生的囊尾蚴会随感染时间增加逐渐死亡和钙化，而同一时期寄生在肌肉和脑组织内的囊尾蚴未出现死亡和钙化现象。
1 材料和方法
1.1 实验动物及虫源
1.1.1 实验动物
20～30日龄的三元杂交仔猪4头，体重4.5～7 kg，雌雄各半，由贵州大学农学院动物养殖中心提供，经粪便检查和间接血凝集实验（IHA）检查证实无猪囊尾蚴及其他寄生虫感染。
1.1.2 猪带绦虫成虫
采自四川省甘孜州雅江县呷拉乡，虫体由0.9%生理盐水保存。对虫体孕节经卡红染色压片观察，证实为猪带绦虫成虫（Taenia solium），（图1）。
1.2 虫卵分离及收集
在大玻璃皿内用细小针头将浸泡在生理盐水中的猪带绦虫虫体后段全部孕节的子宫挑开，再用生理盐水冲洗数次使虫卵尽量溢出，收集全部漂洗液，3 000 r /min离心15 min，收集沉淀的虫卵。
1.3 虫卵成活率检测和计数
取虫卵悬液1 ml进行胆汁孵育试验，以台盼蓝染色记数六钩蚴法测得虫卵存活率为80%。 再取虫卵悬液0.1 ml, 在光镜下计数虫卵(重复操作6次,取均值）。通过计算明确容器中虫卵的总数，最后用生理盐水稀释调节虫卵浓度约10万/ml，即存活虫卵数量约8万/ml的虫卵悬液。
1.4 感染实验猪及观察
1.4.1 感染方法
4头仔猪胃管分别灌入虫卵悬液1ml ,然后立即注入灭菌生理盐水10 ml冲洗胃管。
1.4.2 喂养观察
感染后的仔猪饲养于独立水泥地面猪舍内，由专人负责以熟食喂养，整个实验过程中严格圈养，防止其它病原体感染。分别在感染后第40、80、120和150天各剖杀1头仔猪, 取全身器官和组织仔细肉眼检查，观察囊尾蚴在各脏器上分布数量、囊尾蚴大小及成熟情况等，对判断成熟的囊尾蚴进行孵育试验。
2 结果
2.1 猪带绦虫囊尾蚴大小及成熟情况
感染后第40天剖杀仔猪，各脏器如肝脏、心脏、脑、肺、舌、四肢及驱干肌肉内已有大量未成熟囊尾蚴寄生（图2A~F），肝脏内囊尾蚴的大小平均约为3.0 mm×3.5 mm，四肢及驱干肌肉、心肌、舌肌等肌肉组织内囊尾蚴大小平均约为3.3 mm×5.8 mm（图2G），脑组织内囊尾蚴大小平均约为3.0 mm×5.4 mm，肺组织内囊尾蚴大小平均约为 3.0 mm×4.9 mm。第80天剖检，在肝脏及全身肌肉和其他内脏器官囊尾蚴发育成熟且体积增大，此时肝脏内囊尾蚴的大小平均约为3.4 mm×4.6 mm，肌肉组织内囊尾蚴大小平均约为4.8 mm×7.4 mm，脑组织内囊尾蚴大小平均约为4.4 mm×7.2 mm，肺组织内囊尾蚴大小平均约为 4.1 mm×6.5 mm。经压片镜下观察囊尾蚴可见到虫体头部的吸盘、顶突及顶突的小钩（图2H）。第120天及150天剖查，肉眼观察肝脏内囊尾蚴几乎全部死亡及钙化，其余各器官及组织上寄生的囊尾蚴未见死亡及钙化；第120天时肌肉组织内囊尾蚴平均大小约为5.9 mm×9.3 mm，脑组织内囊尾蚴大小平均约为5.9 mm×9.2 mm，肺组织内囊尾蚴大小平均约为 4.7 mm×7.1 mm（图2I~M），成熟囊尾蚴呈囊泡状（图2N）。成熟的囊尾蚴经胆汁孵育后可见摆动的头节翻出（图2O，图3）。第150天时肌肉组织内囊尾蚴平均约6.7mm×10.7mm，脑组织内囊尾蚴大小平均约为6.5 mm×10.4 mm，肺组织内囊尾蚴大小平均约为6.0 mm×8.5 mm。肾脏和脾脏内未见到囊尾蚴生长。
2.2 猪带绦虫囊尾蚴在各脏器组织分布
数量感染后的不同时间剖杀的仔猪，各器官组织内囊尾蚴分布的数量不同，见表1。表1 猪带绦虫囊尾蚴在实验猪各组织和内脏分布的数量（略）
3 讨论
一般认为，囊尾蚴主要寄生在宿主运动较多的肌肉，在股内侧肌肉多见。猪带绦虫虫卵经食道感染宿主，在小肠内通过消化液作用24~72 h 后胚膜破裂，六钩蚴逸出，钻入肠壁，经血液循环或淋巴系统到达宿主身体各部位[2]。约10周后虫卵发育为囊尾蚴并成熟，第6天后为实体，约0.4 mm×0.3 mm；第12天后发育成囊状，体积变大。第20~30天，头节可识别；第40~50天头节上的小钩、吸盘、顶突均可鉴别；第60~70天发育为成熟囊尾蚴，大小为5.6~8.5mm×3.1~6.5 mm。囊尾蚴于猪体内发育第60天后后经胆汁处理，90%以上颈部可伸出，活动自如，4个吸盘明显，32个小钩角化完全[3]。本次实验结果与上述文献报道基本相符，却有新的发现，即除肌肉、脑是囊尾蚴寄生的主要部位外，肝脏也是囊尾蚴寄生的重要部位，但随感染时间延长囊尾蚴在肝脏会逐渐死亡和钙化；而同一时期内在肌肉和脑组织中寄生的囊尾蚴均未出现死亡和钙化现象。
此外，肌肉及脑组织内寄生的囊尾蚴发育正常,而在肝脏和肺寄生的囊尾蚴表现为粟粒状,剖开可见病灶中心为浆液状物质,宿主包囊较厚。本次实验还发现肝组织中的囊尾蚴要小于多数肌肉组织中的囊尾蚴，刘永杰等[4]也发现肝组织中的虫体比骨骼肌中虫体的发育缓慢，究其原因可能和炎症反应有关。有文献报道猪带绦虫虫卵感染仔猪后，通过组织切片观察囊尾蚴寄生的肝组织，发现肝组织内有粟粒状病灶,病灶中心有一虫体,经连续切片观察,发现虫体为囊状,无头节,周围炎症反应范围超过虫体1倍以上[4]。说明在中间宿主体内囊尾蚴的发育受一些免疫反应的控制。
在实验全过程中均未发现肾脏和脾脏内有囊尾蚴寄生，这与国内学者马云祥等[5]在肾脏见到囊尾蚴生长略有不同，这可能与实验所用的猪种不同有关。实验结果表明，对于猪带绦虫的中间宿主猪体来说，除了运动较多的肌肉是囊尾蚴寄生的主要部位外，肝脏也是囊尾蚴寄生的部位，但是随感染时间增加，肝脏感染的囊尾蚴会逐渐死亡和钙化。提示在当前生猪快速出栏养殖过程中，猪肝脏无囊尾蚴寄生时，其余主要寄生部位如四肢和驱干肌肉内仍存有囊尾蚴，这在生猪检验检疫工作中应予特别关注。
【参考文献】
[1]Simanjuntak GM,Margono SS,Okamoto M.TaeniasisPcysticercosis in Indonesia as an emerging disease[J].Parasitol Today,1997(13):321-323.
[2]李雍龙.人体寄生虫学[M].6版.北京：人民卫生出版社，2005：141-146.
[3]Singh G,Prabhakar S.Taenia Solium Cysticercosis:From Basic to Clinical Science[M]. New York:CABI Publisers，2002:1-13.
[4]刘永杰,李庆章，郝艳红, 等. 猪带绦虫囊尾蚴的发育过程及形态观察[J].中国寄生虫学与寄生虫病杂志，2002(5):305-307.
[5]马云祥，刘建候，王运章，等. 猪带绦虫囊尾蚴发育规律的实验[J].中国寄生虫防治杂志，1992(5):38-40.
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