人溶菌酶转基因山羊乳腺生物反应器的研制--博士论文下载

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人溶菌酶转基因山羊乳腺生物反应器的研制

论文目录

摘要	第1-3页
前言	第3-4页
1 材料与方法	第4-10页
·试验材料	第4-5页
·菌种和细胞株	第4页
·基因和质粒载体	第4页
·主要试剂材料	第4页
·主要仪器设备	第4-5页
·主要试剂的配制	第5页
·人溶菌酶基因的乳腺特异表达载体的构建	第5-6页
·共转染山羊的胎儿成纤维细胞以及抗性克隆的筛选鉴定	第6页
·外源基因的整合鉴定	第6-7页
·体细胞核移植	第7-8页
·卵母细胞制备与受体羊的同步	第7页
·供核细胞的饥饿处理	第7页
·重构卵的制备与激活	第7-8页
·重构卵的包埋、回收与发育胚胎的移植	第8页
·转基因山羊的诱导泌乳和重组人溶菌酶的表达检测	第8页
·重组人溶菌酶的纯化	第8-9页
·溶菌酶的活性检测	第9页
·重组人溶菌酶的N-端氨基酸测序	第9页
·其他未述及的方法均参照参照《分子克隆试验指南》	第9-10页
2 结果	第10-20页
·人溶菌酶基因的乳腺特异表达载体的获得	第10-11页
·体细胞克隆用转基因单克隆细胞的获得	第11页
·转基因克隆羊的获得	第11-13页
·转基因山羊乳汁中重组人溶菌酶的表达检测	第13-16页
·转基因山羊乳汁中重组人溶菌酶的纯化与性质测定	第16-20页
3 讨论	第20-25页
·转基因家畜的乳腺是廉价大量生产重人溶菌酶的理想场所	第20-22页
·体细胞遗传修饰结合核移植技术是制备转基因家畜的高效方法	第22-25页
4 结论	第25-26页
致谢	第26页

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