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耐辐射异常球菌转录调节蛋白IrrE增强大肠杆菌盐胁迫抗性的全局调控机制
 
     论文目录
 
摘要第1-7页
Abstract第7-19页
第一章 绪论第19-51页
   ·耐辐射异常球菌研究进展第19-26页
     ·耐辐射异常球菌的分离及其生理特性第19-20页
     ·耐辐射异常球菌的极端抗性第20-23页
     ·耐辐射异常球菌DNA损伤修复机制第23-26页
   ·耐辐射异常球菌胁迫抗性全局调控蛋白IrrE第26-36页
     ·IrrE蛋白的发现第26-27页
     ·IrrE的蛋白结构域分析第27-30页
     ·IrrE的功能鉴定第30-31页
     ·耐辐射异常球菌IrrE的作用机制第31-33页
     ·IrrE的异源表达提高宿主的胁迫抗性第33-36页
   ·细菌渗透调节机制研究进展第36-42页
     ·细菌渗透胁迫应答机制第36-40页
     ·细菌耐盐抗渗机制中的重要功能蛋白第40-41页
     ·细菌耐盐抗渗机制中的重要调控蛋白第41-42页
   ·蛋白质组学关键技术及其在微生物功能基因组学研究中的应用第42-49页
     ·双向电泳技术是蛋白质组学研究的核心技术之一第42-47页
     ·蛋白质组学在微生物功能基因组研究中的应用第47-49页
   ·立题依据和技术路线第49-51页
     ·立题依据第49-50页
     ·技术路线第50-51页
第二章 IrrE重组大肠杆菌的基因调控网络分析第51-97页
   ·材料与方法第51-72页
     ·菌株、质粒来源第51-52页
     ·培养基、酶类及生化试剂第52-57页
     ·主要仪器设备第57-58页
     ·培养条件第58-59页
     ·菌株基因组及质粒的提取第59-60页
     ·PCR反应第60-62页
     ·高保真Taq酶扩增产物末端加A方法第62页
     ·DNA片段的回收与纯化第62-63页
     ·DNA片段的酶切与连接第63-64页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备与转化第64页
     ·生长曲线的测定第64-65页
     ·融合蛋白的表达与纯化第65-66页
     ·SDS-PAGE电泳第66-67页
     ·Western Blot 杂交检测第67-68页
     ·菌株底物代谢变化BioLog分析第68页
     ·蛋白质组学分析样品的蛋白制备第68-69页
     ·蛋白质组学分析样品的蛋白定量第69页
     ·双向聚丙烯酰胺凝胶电泳(2D-PAGE)第69-71页
     ·凝胶图像采集与分析第71页
     ·蛋白点的切取和胶内酶切第71页
     ·MALDI-TOF/MS分析第71页
     ·数据库查询第71-72页
     ·IrrE重组大肠杆菌基因芯片数据分析第72页
   ·结果第72-86页
     ·IrrE蛋白组成型表达载体的构建第72-74页
     ·IrrE大肠杆菌高效表达载体的构建第74-76页
     ·IrrE蛋白的原核高效表达与纯化第76-77页
     ·Western Blot检测IrrE在大肠杆菌中的表达第77-78页
     ·IrrE重组大肠杆菌的生长曲线分析第78-79页
     ·IrrE重组大肠杆菌的底物代谢谱测定第79-81页
     ·IrrE的表达对重组菌代谢网络影响的蛋白质组学分析第81-82页
     ·正常生长条件下IrrE重组菌株的上调蛋白第82-85页
     ·正常生长条件下IrrE重组菌株的下调蛋白第85-86页
   ·讨论第86-97页
     ·IrrE提高重组菌一般胁迫抗性第86页
     ·IrrE提高重组菌山梨醇利用能力第86-87页
     ·IrrE对重组菌麦芽糖代谢的影响第87-88页
     ·IrrE对重组菌氨基酸代谢的影响第88页
     ·IrrE对重组菌的全局调控作用第88-89页
     ·IrrE对抗逆相关蛋白的调控第89-90页
     ·IrrE的转录级联调控作用第90-96页
     ·全局调控蛋白IrrE的水平转移第96-97页
第三章 盐胁迫下IrrE重组大肠杆菌的蛋白表达谱分析第97-129页
   ·材料与方法第97-104页
     ·菌株、质粒来源第97页
     ·培养基、酶类及生化试剂第97-100页
     ·主要仪器设备和软件第100页
     ·培养条件第100-101页
     ·生长曲线的测定第101页
     ·生理生化及耐盐实验分析第101-103页
     ·蛋白质组学分析的样品制备第103页
     ·蛋白样品的定量第103页
     ·双向聚丙烯酰胺凝胶电泳(2D-PAGE)第103页
     ·凝胶图像采集与分析第103页
     ·蛋白点的切取和胶内酶切第103页
     ·MALDI-TOF/MS分析第103页
     ·数据库查询第103页
     ·细胞甘油含量的测定第103-104页
     ·盐冲击下IrrE重组大肠杆菌基因芯片数据分析第104页
   ·结果第104-118页
     ·IrrE表达对大肠杆菌氧化抗性的影响第104-105页
     ·IrrE表达对大肠杆菌高温耐受力的影响第105-106页
     ·IrrE表达对大肠杆菌抗酸碱能力的影响第106页
     ·IrrE表达对提高大肠杆菌耐盐性的研究第106-108页
     ·盐冲击条件下IrrE重组菌株蛋白谱差异分析第108-109页
     ·盐冲击条件下IrrE重组菌株上调蛋白第109-112页
     ·盐冲击条件下IrrE重组菌株下调蛋白第112-115页
     ·盐冲击条件下,IrrE增强核苷酸合成蛋白的表达第115-116页
     ·盐冲击条件下,IrrE增强胁迫抗性相关蛋白的表达第116-117页
     ·盐冲击条件下,IrrE抑制甘油降解途径相关蛋白的表达第117页
     ·盐冲击条件下,IrrE提高细胞甘油含量的积累第117-118页
   ·讨论第118-129页
     ·IrrE重组菌株的高温和氧化抗性第118-119页
     ·渗透保护物质甘油的积累第119-121页
     ·盐冲击下IrrE对胁迫抗性蛋白调控作用第121-125页
     ·盐冲击下IrrE对RpoS的调控作用第125-126页
     ·IrrE提高细胞盐胁迫抗性第126-129页
第四章 IrrE蛋白N-端结构域的截短分析第129-154页
   ·材料与方法第129-139页
     ·菌株、质粒来源第129-130页
     ·培养基、酶类及生化试剂第130-132页
     ·主要仪器设备第132页
     ·细菌培养第132页
     ·菌株基因组DNA及质粒DNA的提取第132-134页
     ·PCR引物反应及反应条件第134-135页
     ·DNA片段的回收与纯化第135-136页
     ·DNA片段的酶切与连接第136-137页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备与转化第137页
     ·耐辐射异常球菌的线性DNA转化第137-138页
     ·氨基酸多序列比对第138页
     ·细菌生存曲线的测定第138-139页
     ·电离辐照后菌体生长的测定第139页
   ·结果第139-151页
     ·耐辐射异常球菌突变株ΔIrrE的构建第139-141页
     ·耐辐射异常球菌突变株ΔIrrE的纯化与验证第141-142页
     ·ΔIrrE突变株电离辐射后生长情况和生存率第142-144页
     ·IrrE蛋白的结构分析及截断设计第144-146页
     ·不同IrrE基因片段功能回补质粒的构建第146-148页
     ·电离辐射后回补截断IrrE菌株的生长第148-149页
     ·回补截短IrrE菌株的辐射生存率曲线第149-151页
   ·讨论第151-154页
第五章 结论第154-156页
参考文献第156-170页
致谢第170-171页
作者简介第171-172页

 
 
论文编号BS158228,这篇论文共172
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