摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-9页 |
目录 | 第9-12页 |
插图和附表清单 | 第12-16页 |
第一章 文献综述 | 第16-32页 |
·云南红梨简介及研究进展 | 第16页 |
·红梨及其它植物中花青素生物合成途径的研究进展 | 第16-21页 |
·影响花青素合成的环境因素 | 第21-24页 |
·光照的影响 | 第22页 |
·温度的影响 | 第22-23页 |
·其它因素的影响 | 第23-24页 |
·植物中花青素生物合成途径调控模式 | 第24-25页 |
·MYB、bHLH和WD40转录因子研究进展 | 第25-30页 |
·MYB转录因子 | 第25-27页 |
·bHLH转录因子 | 第27-28页 |
·WD40转录因子 | 第28-29页 |
·MYB-bHLH-WD40蛋白复合物的作用与功能 | 第29-30页 |
·本研究的目的及意义 | 第30-32页 |
第二章 云南红梨“云红梨1号”果皮转录因子MYB、bHLH和WD40互作的研究 | 第32-55页 |
·材料和方法 | 第32-41页 |
·植物材料及套袋处理 | 第32-33页 |
·菌株及载体 | 第33页 |
·酶与试剂 | 第33页 |
·PyMYB、PybHLH和PyWD40基因的TA克隆 | 第33-35页 |
·PyMYB、PybHLH和PyWD40基因的原核表达载体的构建及诱导表达 | 第35-37页 |
·亲和层析柱分离纯化目的蛋白的方法 | 第37-38页 |
·蛋白质的提取、Western blotting和免疫共沉淀分析 | 第38-39页 |
·双分子荧光互补载体的构建、洋葱转化和荧光定位观察 | 第39-40页 |
·GST融合蛋白pull-down分析 | 第40-41页 |
·Far Western blotting检测 | 第41页 |
·结果与分析 | 第41-52页 |
·PyMYB、PybHLH和PyWD40基因的克隆 | 第41-42页 |
·PyMYB、PybHLH和PyWD40重组蛋白的表达及纯化 | 第42-47页 |
·PyMYB、PybHLH和PyWD40重组蛋白表达条件的优化 | 第42-44页 |
·PyMYB、PybHLH和PyWD40重组蛋白表达形式的鉴定 | 第44-45页 |
·PyMYB、PybHLH和PyWD40重组蛋白的纯化 | 第45-47页 |
·PyMYB,PybHLH和PyWD40表达水平检测 | 第47-48页 |
·体内实验验证PyMYB、PybHLH和PyWD40之间的相互作用 | 第48-50页 |
·体外实验验证PyMYB、PybHLH和PyWD40的相互作用 | 第50-52页 |
·讨论 | 第52-55页 |
第三章 云南红梨“云红梨1号”果皮MYB转录因子结合花青素结构基因启动子的分析 | 第55-73页 |
·材料和方法 | 第55-62页 |
·植物材料 | 第55-56页 |
·菌株及质粒 | 第56页 |
·酶和试剂 | 第56页 |
·PyANS、PyDFR、PyUFGT和PyF3H基因启动子的扩增及序列分析 | 第56-58页 |
·染色质免疫共沉淀技术分离MYB蛋白结合的花青素结构基因 | 第58-59页 |
·电泳迁移率实验分析MYB蛋白结合的靶DNA | 第59-62页 |
·结果分析 | 第62-71页 |
·PyANS、PyDFR、PyUFGT和PyF3H基因启动子的克隆 | 第62-63页 |
·启动子序列分析 | 第63-67页 |
·体内分析MYB蛋白与花青素结构基因转录启动子的结合 | 第67-69页 |
·体外分析MYB蛋白与PyANS、PyDFR和PyUFGT启动子的结合 | 第69-71页 |
·讨论 | 第71-73页 |
第四章 总结和展望 | 第73-75页 |
致谢 | 第75-76页 |
参考文献 | 第76-89页 |
附录A 攻读硕士期间发表论文 | 第89页 |