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当前位置:教育论文中心首页--硕士论文--吸水链霉菌谷氨酰胺转胺酶在解脂耶氏酵母中的表达及酶学性质研究
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吸水链霉菌谷氨酰胺转胺酶在解脂耶氏酵母中的表达及酶学性质研究
 
     论文目录
 
摘要第1-5页
Abstract第5-7页
目录第7-10页
第一章 绪论第10-18页
   ·谷氨酰胺转胺酶概述第10-13页
     ·谷氨酰胺转胺酶催化特性及来源第10页
     ·谷氨酰胺转胺酶的应用第10-11页
     ·链霉菌谷氨酰胺转胺酶的活化机制第11页
     ·谷氨酰胺转胺酶的作用机制第11-12页
     ·重组谷氨酰胺转胺酶的生产第12-13页
   ·解脂耶氏酵母表达系统第13-15页
     ·解脂耶氏酵母简介第13-14页
     ·解脂耶氏酵母表达系统第14-15页
   ·蛋白质糖基化第15-16页
     ·蛋白质糖基化的形成第15页
     ·糖基化对酶蛋白质结构和性质的影响第15-16页
     ·蛋白质的去糖基化第16页
   ·立题依据及意义第16-17页
   ·本论文的主要研究内容第17-18页
第二章 S. hygroscopicus pro-TGase 在 Yarrowia lipolytica 中的分泌表达和发酵优化第18-33页
   ·前言第18页
   ·材料与方法第18-22页
     ·菌株与质粒第18页
     ·试剂和仪器第18-19页
     ·培养基与培养条件第19页
     ·DNA 操作第19-20页
     ·S. hygroscopicus pro-TGase 基因的克隆第20-21页
     ·重组菌基因组验证第21页
     ·表达载体 pINA1296/pro-TGase 和 pINA1297/pro-TGase 的构建与转化第21页
     ·N-糖基化位点突变体质粒的构建与转化第21-22页
     ·分析方法第22页
   ·结果与讨论第22-31页
     ·表达载体 pINA1296/pro-TGase 和 pINA1297/pro-TGase 的构建第22-23页
     ·重组酵母的构建与 pro-TGase 的分泌表达第23-26页
     ·N-糖基化位点突变表达载体的构建第26页
     ·重组酵母菌 N-糖基化位点突变体的构建与 pro-TGase 的表达第26页
     ·碳源对突变体 N355Q 产量的影响第26-28页
     ·氮源对突变体 N355Q 产量的影响第28页
     ·无机盐对突变体 N355Q 产量的影响第28页
     ·pH 对突变体 N355Q 产量的影响第28-29页
     ·发酵培养基的正交设计优化第29-31页
     ·3 L 罐突变体 N355Q 的发酵生产第31页
   ·本章小结第31-33页
第三章 S. hygroscopicus TGase 基因在 Y. lipolytica 中的活性表达第33-42页
   ·前言第33页
   ·材料与方法第33-37页
     ·菌株和质粒第33页
     ·培养基第33页
     ·试剂和仪器第33页
     ·DNA 操作第33-34页
     ·TGase 与其酶原区共表达载体的构建与转化第34-37页
     ·插入蛋白酶 Kex2 识别位点的突变体质粒的构建与转化第37页
     ·重组 TGase 的生产第37页
     ·分析方法第37页
   ·结果与讨论第37-40页
     ·Pro 与 TGase 在单启动子下共表达第37-38页
     ·Pro 与 TGase 在双启动子下共表达第38-39页
     ·Pro 与 TGase 间插入蛋白酶 Kex2 识别位点的突变体的构建第39页
     ·Pro 与 TGase 间插入蛋白酶 Kex2 识别位点的突变体的表达第39-40页
   ·本章小结第40-42页
第四章 重组 pro-TGase 的分离纯化和酶学性质研究第42-48页
   ·前言第42页
   ·材料与方法第42-44页
     ·菌株第42页
     ·培养基第42页
     ·试剂和仪器第42页
     ·重组 pro-TGase 的生产第42页
     ·胞外重组 pro-TGase 的分离纯化第42-43页
     ·分析方法第43-44页
   ·结果与讨论第44-47页
     ·重组 pro-TGase 与突变体的纯化第44页
     ·活化的 pro-TGase 最适反应温度和热稳定性的测定第44-45页
     ·活化的 pro-TGase 最适 pH 和 pH 稳定性测定第45-46页
     ·Pro-TGase 动力学参数分析第46页
     ·Pro-TGase 与突变体的二级结构分析第46页
     ·Pro-TGase 与突变体的三级结构分析第46-47页
   ·本章小结第47-48页
主要结论与展望第48-50页
致谢第50-51页
参考文献第51-56页
附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文第56页

 
 
论文编号BS2200678,这篇论文共56
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