| 中文摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 1.前言 | 第12-19页 |
| 1.1 产气荚膜梭菌介绍 | 第12-14页 |
| 1.2 产气荚膜梭菌主要毒素的介绍 | 第14-18页 |
| 1.2.1 α毒素 | 第14-15页 |
| 1.2.2 β毒素 | 第15-17页 |
| 1.2.2.1 β1 毒素 | 第15-16页 |
| 1.2.2.2 β2 毒素 | 第16-17页 |
| 1.2.3 ε 毒素 | 第17页 |
| 1.2.4 ι 毒素 | 第17页 |
| 1.2.5 天然β毒素的优点 | 第17-18页 |
| 1.3 本课题的研究目的及意义 | 第18-19页 |
| 2.材料与方法 | 第19-33页 |
| 2.1 材料 | 第19-21页 |
| 2.1.1 实验动物、菌株及细胞 | 第19页 |
| 2.1.2 主要的试剂及溶液的配制 | 第19-21页 |
| 2.1.3 主要试验仪器 | 第21页 |
| 2.2 天然β毒素的制备及纯化 | 第21-23页 |
| 2.2.1 天然β毒素的制备 | 第21-22页 |
| 2.2.2 天然β毒素的纯化 | 第22-23页 |
| 2.2.2.1.C型产气荚膜梭菌外毒素的粗提 | 第22页 |
| 2.2.2.2.C型产气荚膜梭菌外毒素的精提 | 第22-23页 |
| 2.2.2.3.采用SephadexG-200分离蛋白 | 第23页 |
| 2.3 SDS-PAGE（聚丙烯酰胺凝胶电泳）操作步骤如下 | 第23-25页 |
| 2.4 BALB/c小鼠的免疫 | 第25页 |
| 2.5 间接ELISA方法检测血清抗体效价的操作步骤如下 | 第25-26页 |
| 2.6 杂交瘤细胞株的建立 | 第26-29页 |
| 2.6.1 骨髓瘤细胞（Sp2/0）的复苏与培养 | 第26页 |
| 2.6.2 饲养细胞的制备 | 第26页 |
| 2.6.3 脾细胞的准备 | 第26-27页 |
| 2.6.4 骨髓瘤细胞（Sp2/0）的制备 | 第27页 |
| 2.6.5 细胞的融合 | 第27-28页 |
| 2.6.6 筛选阳性杂交瘤细胞 | 第28页 |
| 2.6.7 阳性杂交瘤细胞的克隆化 | 第28-29页 |
| 2.7 BALB/c小鼠单克隆抗体腹水的制备 | 第29-31页 |
| 2.7.1 单克隆抗体腹水的纯化 | 第30页 |
| 2.7.2 单克隆抗体生物活性的鉴定 | 第30-31页 |
| 2.7.2.1 单克隆抗体效价的测定 | 第30-31页 |
| 2.7.2.2 单克隆抗体特异性的鉴定 | 第31页 |
| 2.8 单克隆抗体Western Blot方法的测定 | 第31-33页 |
| 2.8.1 阳性杂交瘤细胞株分泌单克隆抗体稳定性的测定 | 第32页 |
| 2.8.2 小鼠单克隆抗体Ig亚类的鉴定 | 第32-33页 |
| 3.结果和分析 | 第33-39页 |
| 3.1 β毒素的制备过程 | 第33页 |
| 3.2 天然β毒素的纯化 | 第33-34页 |
| 3.3 产气荚膜梭菌单克隆抗体的制备及特异性鉴定 | 第34-35页 |
| 3.3.1 免疫BALB/c小鼠抗体效价的检测结果 | 第34页 |
| 3.3.2 阳性杂交瘤细胞株的建立 | 第34-35页 |
| 3.4 阳性杂交瘤细胞株分泌单克隆抗体稳定性测定 | 第35页 |
| 3.5 单克隆抗体亚类鉴定 | 第35-36页 |
| 3.6 腹水的纯化及浓度测定 | 第36-37页 |
| 3.7 单克隆抗体的特性鉴定 | 第37-39页 |
| 3.7.1 单克隆抗体效价的测定 | 第37页 |
| 3.7.2 单克隆抗体特异性鉴定 | 第37页 |
| 3.7.3 Western Blot实验结果 | 第37-39页 |
| 4.讨论 | 第39-42页 |
| 4.1 天然毒素比表达毒素的优势 | 第39页 |
| 4.2 天然β毒素的制备及纯化 | 第39页 |
| 4.3 杂交瘤细胞的融合和筛选 | 第39-40页 |
| 4.4 阳性杂交瘤细胞的扩大培养 | 第40-41页 |
| 4.5 单克隆抗体的纯化 | 第41页 |
| 4.6 抗β毒素单克隆抗体特异性的鉴定 | 第41-42页 |
| 5.结论 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-48页 |
| 致谢 | 第48页 |
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