| 摘要 | 第5-7页 |
| abstract | 第7-8页 |
| 引言 | 第12-15页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-23页 |
| 1．我国水产养殖及育种现状 | 第15页 |
| 2．鱼类性别决定和性别分化 | 第15-19页 |
| 2.1 鱼类性别的多样性 | 第16-17页 |
| 2.2 鱼类性别相关基因 | 第17-18页 |
| 2.2.1 芳香化酶 | 第17页 |
| 2.2.2 DMRT1 | 第17页 |
| 2.2.3 Sox9 | 第17-18页 |
| 2.2.4 foxl2 | 第18页 |
| 2.3 环境因素与性别决定 | 第18-19页 |
| 2.3.1 温度 | 第18-19页 |
| 2.3.2 激素 | 第19页 |
| 3．半滑舌鳎的遗传学研究 | 第19-21页 |
| 3.1 半滑舌鳎的生活习性 | 第19页 |
| 3.2 半滑舌鳎性别相关研究 | 第19-21页 |
| 4.aqp1、lipocalin的研究进展 | 第21-22页 |
| 4.1 aqp1基因的研究进展 | 第21页 |
| 4.2 lipocalin基因的研究进展 | 第21-22页 |
| 5.本研究的目的和意义 | 第22-23页 |
| 第二章 半滑舌鳎aqp1aa基因的克隆和表达分析 | 第23-57页 |
| 1．实验材料 | 第23-24页 |
| 1.1 实验用鱼 | 第23-24页 |
| 1.2 试验样品的采集 | 第24页 |
| 2.实验方法 | 第24-40页 |
| 2.1 生理性别和遗传性别的鉴定 | 第24-27页 |
| 2.1.1 生理性别的鉴定 | 第24-25页 |
| 2.1.2 遗传性别的鉴定 | 第25-27页 |
| 2.2 半滑舌鳎总RNA的提取以及cDNA的合成 | 第27-28页 |
| 2.2.1 半滑舌鳎样品总RNA提取 | 第27页 |
| 2.2.2 半滑舌鳎cDNA的合成 | 第27-28页 |
| 2.3 半滑舌鳎aqp1aa基因的克隆 | 第28-33页 |
| 2.3.1 aqp1aa基因中间片段序列的验证 | 第28-30页 |
| 2.3.2 aqp1aa基因 5′3′端的扩增 | 第30-32页 |
| 2.3.3 aqp1aa序列分析及进化分析 | 第32-33页 |
| 2.4 荧光定量（qRT-PCR）表达分析 | 第33-34页 |
| 2.5 组织切片原位杂交 | 第34-37页 |
| 2.5.1 探针的制备 | 第34-36页 |
| 2.5.2 性腺切片的制作： | 第36页 |
| 2.5.3 斑点杂交： | 第36页 |
| 2.5.4 原位杂交： | 第36-37页 |
| 2.6 染色体荧光原位杂交 | 第37-40页 |
| 2.6.1 染色体的制备 | 第37-38页 |
| 2.6.2 阳性克隆的筛选 | 第38页 |
| 2.6.3 Cot-1 DNA的制备 | 第38-39页 |
| 2.6.4 探针的制备 | 第39页 |
| 2.6.5 荧光原位杂交 | 第39-40页 |
| 3.实验结果及分析 | 第40-54页 |
| 3.1 半滑舌鳎cDNA的序列特征 | 第40-42页 |
| 3.2 半滑舌鳎aqp1aa基因的氨基酸序列比对及进化分析 | 第42-46页 |
| 3.3 半滑舌鳎aqp1aa基因在mRNA水平的表达模式 | 第46-50页 |
| 3.3.1 半滑舌鳎aqp1aa基因在不同组织中的表达 | 第46-48页 |
| 3.3.2 半滑舌鳎aqp1aa基因在不同表型性腺中的表达 | 第48-49页 |
| 3.3.3 半滑舌鳎aqp1aa基因在不同发育时期性腺中的表达 | 第49-50页 |
| 3.4 半滑舌鳎aqp1aa基因在雌雄鱼性腺切片中的原位杂交分析 | 第50-52页 |
| 3.5 半滑舌鳎aqp1aa基因在雌雄鱼染色体上的原位杂交分析 | 第52-54页 |
| 4.讨论 | 第54-56页 |
| 5.小结 | 第56-57页 |
| 第三章 半滑舌鳎lipocalin基因的克隆和表达分析 | 第57-71页 |
| 1.材料与方法 | 第57-60页 |
| 1.1 实验用鱼 | 第57-58页 |
| 1.2 实验方法 | 第58-60页 |
| 1.2.1 总RNA的提取和cDNA的合成 | 第58页 |
| 1.2.2 lipocalin基因的克隆 | 第58页 |
| 1.2.3 序列分析及进化分析 | 第58-59页 |
| 1.2.4 qRT-PCR表达分析 | 第59页 |
| 1.2.5 性腺组织原位杂交 | 第59-60页 |
| 2.结果与讨论 | 第60-67页 |
| 2.1 半滑舌鳎lipocalin基因序列特征分析 | 第60-63页 |
| 2.2 半滑舌鳎lipocalin基因表达模式分析 | 第63-66页 |
| 2.3 原位杂交 | 第66-67页 |
| 3．讨论 | 第67-69页 |
| 4.小结 | 第69-71页 |
| 参考文献 | 第71-85页 |
| 学习期间发表的学术论文与研究成果 | 第85-87页 |
| 致谢 | 第87页 |
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