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当前位置:教育论文中心首页--硕士论文--西方蜜蜂(Apis mellifera)王浆蛋白mrjp6和mrjp8的表达与功能研究
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西方蜜蜂(Apis mellifera)王浆蛋白mrjp6和mrjp8的表达与功能研究
 
     论文目录
 
摘要第9-11页
Abstract第11-12页
第一章 蜜蜂王浆蛋白研究概述第13-23页
    1 蜂王浆及其生物学功能第13-14页
        1.1 蜂王浆的组分第13页
        1.2 蜂王浆的功能和作用第13-14页
    2 王浆蛋白(MRJPs)家族第14-19页
        2.1 MRJPs的发现和命名第14-15页
        2.2 MRJPs的分子研究概况第15-16页
        2.3 MRJPs的表达与功能研究概况第16-18页
        2.4 MRJPs的分子系统进化分析第18-19页
    3 荧光定量技术第19页
        3.1 荧光定量技术的发展及应用第19页
        3.2 比较CT法第19页
    4 基因干扰技术及其在蜜蜂RNAi中的应用第19-21页
        4.1 试剂盒合成dsRNA介导的RNAi第19-20页
        4.2 L4440-HT115工程菌介导的RNAi第20-21页
    5 本论文拟解决的问题第21-23页
第二章 西方蜜蜂体内王浆蛋白MRJP6基因的表达第23-32页
    1 材料和方法第23-25页
        1.1 试验材料第23-24页
            1.1.1 供试蜜蜂第23页
            1.1.2 试剂和仪器第23-24页
        1.2 试验方法第24-25页
            1.2.1 RNA提取与cDNA合成第24页
            1.2.2 mrjp6克隆与定量引物验证第24页
            1.2.3 荧光定量PCR第24-25页
            1.2.4 数据分析第25页
    2 试验结果与分析第25-29页
        2.1 mrjp6引物验证第25-26页
            2.1.1 蓝白斑筛选与酶切验证第25-26页
            2.1.2 mrjp6基因片段的序列分析第26页
        2.2 引物特异性检验第26页
        2.3 标准曲线建立第26-27页
        2.4 mrjp6在各期三型蜂中的表达第27-28页
        2.5 mrjp6在哺育蜂和采集蜂不同组织的表达第28-29页
    3 结论与讨论第29-32页
第三章 利用试剂盒合成dsRNA干扰西方蜜蜂mrjp8的研究第32-48页
    1 材料和方法第32-36页
        1.1 试验材料第32-33页
            1.1.1 供试蜜蜂第32页
            1.1.2 试剂和仪器第32-33页
        1.2 试验方法第33-36页
            1.2.1 RNA提取和cDNA合成第33页
            1.2.2 试剂盒合成并纯化dsRNA第33-34页
                1.2.2.1 试剂盒合成dsRNA第33-34页
                1.2.2.2 纯化mrjp8 dsRNA第34页
            1.2.3 试剂盒合成并纯化egfp dsRNA第34-35页
            1.2.4 dsRNA干扰试验第35-36页
                1.2.4.1 dsRNA饲喂干扰工蜂第35页
                1.2.4.2 dsRNA注射干扰工蜂第35-36页
                1.2.4.3 dsRNA饲喂干扰蜂王第36页
        1.3 数据分析第36页
    2 试验结果与分析第36-46页
        2.1 mrjp8的PCR扩增、质粒重组及基因克隆第36-37页
        2.2 mrjp8和egfp dsRNA的合成第37-39页
        2.3 dsRNA干扰结果与分析第39-46页
            2.3.1 dsRNA干扰工蜂试验第39-44页
                2.3.1.1 以1μg dsRNA饲喂干扰工蜂第39-40页
                2.3.1.2 以50ng dsRNA持续饲喂干扰工蜂第40-42页
                2.3.1.3 dsRNA注射干扰工蜂第42-44页
            2.3.2 dsRNA饲喂干扰蜂王第44-46页
    3 结论与讨论第46-48页
第四章 利用细菌表达dsRNA干扰西方蜜蜂mrjp8的表达研究第48-58页
    1 材料和方法第48-51页
        1.1 试验材料第48-49页
            1.1.1 供试蜜蜂第48页
            1.1.2 试剂和仪器第48-49页
        1.2 试验方法第49-51页
            1.2.1 mrjp8 dsRNA表达载体的构建第49-50页
            1.2.2 mrjp8 dsRNA诱导表达及纯化第50页
            1.2.3 对照基因egfp dsRNA表达载体构建与诱导纯化第50页
            1.2.4 IPTG诱导合成dsRNA的工程菌饲喂干扰工蜂试验第50-51页
        1.3 数据分析第51页
    2 试验结果与分析第51-56页
        2.1 mrjp8 dsRNA细菌表达载体的构建第51-52页
        2.2 mrjp8 dsRNA的诱导表达及纯化第52-53页
        2.3 egfp dsRNA表达体系的构建与诱导表达纯化第53页
        2.4 工程菌饲喂干扰工蜂结果分析第53-56页
            2.4.1 不同浓度工程菌饲喂干扰工蜂死亡率统计第53-54页
            2.4.2 运用qRT-PCR分析不同浓度工程菌饲喂干扰结果第54-55页
            2.4.3 运用光密度定量分析高浓度连续饲喂干扰结果第55-56页
    3 结论与讨论第56-58页
第五章 总结与研究展望第58-61页
参考文献第61-67页
附录第67-71页
致谢第71页

 
 
论文编号BS3364728,这篇论文共71
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