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当前位置:教育论文中心首页--硕士论文--非小细胞肺癌中MAGE-D4的表达、血清抗体分析及基因沉默细胞株的构建
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非小细胞肺癌中MAGE-D4的表达、血清抗体分析及基因沉默细胞株的构建
 
     论文目录
 
个人简历第3-7页
英文缩略语表第7-9页
摘要第9-12页
ABSTRACT第12-14页
技术路线第16-17页
前言第17-20页
第一部分 MAGE-D4 在非小细胞肺癌的表达及临床意义第20-32页
    1 实验材料与仪器设备第20-22页
    2 实验方法第22-25页
        2.1 癌基因芯片数据库分析第22页
        2.2 免疫组织化学法检测第22-25页
        2.3 统计学分析第25页
    3 实验结果第25-29页
        3.1 Oncomine肺癌数据集MAGE-D4 mRNA分析结果第25-26页
        3.2 非小细胞肺癌中MAGE-D4 的表达第26页
        3.3 MAGE-D4 蛋白与患者临床病理参数关系的分析第26-29页
    4 讨论第29-32页
第二部分 非小细胞肺癌血清MAGE-D4 抗体的检测第32-44页
    1 实验材料与仪器设备第32-34页
    2 实验方法第34-37页
        2.1 MAGE-D4 包被蛋白浓度的测定第34-35页
        2.2 最适抗原包被浓度与血清稀释度的确定第35页
        2.3 间接ELISA法检测血清中的MAGE-D4 抗体第35-36页
        2.4重复性实验第36页
        2.5 阳性血清的判定第36-37页
        2.6 统计学分析第37页
    3 实验结果第37-40页
        3.1 包被蛋白的浓度测定第37页
        3.2 非小细胞肺癌血清MAGE-D4 抗体的检测及意义第37-40页
        3.3 肺癌中MAGE-D4 表达与血清抗体出现的关系第40页
    4 讨论第40-44页
第三部分 MAGE-D4 稳定沉默肺癌细胞株的构建第44-73页
    1 实验材料与仪器设备第44-51页
    2 实验方法第51-64页
        2.1 清洗与消毒第51-52页
        2.2 细胞培养第52-54页
        2.3 目标细胞的筛选第54-58页
        2.4 嘌呤霉素最佳筛选浓度的确定第58页
        2.5 慢病毒用量的确定第58-59页
        2.6 基因沉默细胞株的构建第59-60页
        2.7 RT-qPCR检测MAGE-D4 mRNA的沉默效率第60-61页
        2.8 WB检测MAGE-D4蛋白的沉默效率第61-64页
    3 实验结果第64-70页
        3.1 目标细胞的筛选第64页
        3.2 嘌呤霉素最佳筛选浓度的确定第64页
        3.3 慢病毒用量的确定第64-67页
        3.4 MAGE-D4 稳定沉默肺癌细胞株的筛选第67页
        3.5 MAGE-D4 沉默效率的检测第67-70页
    4 讨论第70-73页
第四部分 MAGE-D4/pEGFP-C1 真核表达载体的构建第73-88页
    1 实验材料与仪器设备第73-76页
    2 实验方法第76-82页
        2.1 引物设计及PCR扩增第76页
        2.2 胶回收PCR产物第76-77页
        2.3 双酶切MAGE-D4基因片段第77-78页
        2.4 质粒扩增与提取第78-79页
        2.5 双酶切质粒第79页
        2.6 MAGE-D4 与载体的连接第79页
        2.7 转化第79-80页
        2.8 重组质粒的筛选及鉴定第80页
        2.9 提取MAGE-D4/pEGFP-C1 重组质粒第80-81页
        2.10 细胞培养第81页
        2.11 MAGE-D4/pEGFP-C1 重组质粒转染A549 细胞第81-82页
    3 实验结果第82-85页
        3.1 目的基因的扩增第82页
        3.2 MAGE-D4 重组质粒的鉴定第82页
        3.3 重组质粒转染A549 细胞第82-85页
    4 讨论第85-88页
全文小结第88-89页
参考文献第89-95页
综述 黑素瘤相关抗原与肺癌的关系第95-113页
    参考文献第105-113页
致谢第113-114页
攻读硕士期间发表的论文第114页

 
 
论文编号BS4164028,这篇论文共114
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