| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 缩略词 | 第11-12页 |
| 第1章 文献综述 | 第12-27页 |
| 1 布氏杆菌病概况 | 第12页 |
| 2 布氏杆菌分子生物学检测方法 | 第12-15页 |
| ·属特异性PCR检测 | 第12-13页 |
| ·布氏杆菌种和生物型的PCR检测 | 第13-15页 |
| ·PCR检测样品DNA提取 | 第15页 |
| 3 布氏杆菌新型疫苗 | 第15-27页 |
| ·DNA疫苗 | 第16-18页 |
| ·重组蛋白疫苗 | 第18-19页 |
| ·活载体疫苗 | 第19-20页 |
| ·多价苗 | 第20页 |
| ·基因缺失苗 | 第20-23页 |
| ·BP26基因缺失突变株 | 第21-22页 |
| ·LPS合成相关基因基因缺失突变株 | 第22页 |
| ·OMP基因缺失突变株 | 第22页 |
| ·生长代谢及毒力相关基因缺失突变株 | 第22-23页 |
| ·胶囊疫苗 | 第23-24页 |
| ·疫苗的展望 | 第24-27页 |
| ·新型疫苗组分的筛选 | 第24-25页 |
| ·生物佐剂的使用 | 第25页 |
| ·基因缺失苗 | 第25-26页 |
| ·多价苗和CTL效应 | 第26-27页 |
| 第2章 表达布氏杆菌SODC蛋白的重组沙门氏杆菌的构建 | 第27-43页 |
| ·材料 | 第27-29页 |
| ·菌种、质粒 | 第27页 |
| ·实验动物 | 第27页 |
| ·主要试剂和试剂盒 | 第27-28页 |
| ·主要培养基及试剂的配制 | 第28-29页 |
| ·实验方法 | 第29-34页 |
| ·Cu-Zn SOD基因克隆 | 第29-30页 |
| ·重组质粒pYA-sodc的构建 | 第30-31页 |
| ·重组沙门氏菌菌株构建 | 第31-32页 |
| ·重组菌株的鉴定 | 第32页 |
| ·重组菌株生物学特性鉴定 | 第32-33页 |
| ·重组菌株对小鼠的免疫试验 | 第33-34页 |
| ·结果与分析 | 第34-40页 |
| ·sodc基因的克隆 | 第34页 |
| ·重组质粒pYA-sodc的构建与鉴定 | 第34-35页 |
| ·重组菌株C501(pYA-sodc)的构建与鉴定 | 第35-36页 |
| ·重组菌株C501(pYA-sodc)的分泌表达 | 第36页 |
| ·重组菌株C501(pYA-sodc)的表型鉴定 | 第36页 |
| ·重组菌株C501(pYA-sodc)的生长特性研究 | 第36-37页 |
| ·重组菌株C501(pYA-sodc)的遗传稳定性 | 第37-39页 |
| ·重组菌株C501(pYA-sodc)对小鼠的免疫试验 | 第39-40页 |
| ·讨论 | 第40-43页 |
| ·活载体在布氏杆菌疫苗研究中的应用 | 第40-41页 |
| ·Cu/Zn-SOD | 第41页 |
| ·sodc基因在C500crp-/asd-缺失株平衡致死系统中的表达 | 第41-43页 |
| 第3章 鉴别牛、羊和猪3个布氏杆菌种多重PCR的建立 | 第43-53页 |
| ·材料 | 第43-44页 |
| ·菌种和基因组DNA | 第43页 |
| ·试剂及主要试剂盒 | 第43-44页 |
| ·细菌培养基 | 第44页 |
| ·主要仪器设备 | 第44页 |
| ·溶液的配置 | 第44页 |
| ·方法 | 第44-47页 |
| ·引物的设计 | 第44页 |
| ·布氏杆菌的培养 | 第44-45页 |
| ·布氏杆菌基因组DNA的提取 | 第45页 |
| ·牛奶样品基因组的提取 | 第45-46页 |
| ·PCR扩增 | 第46页 |
| ·多重PCR反应条件优化 | 第46页 |
| ·多重PCR敏感性检测 | 第46页 |
| ·多重PCR特性性检测 | 第46页 |
| ·多重PCR检测方法的初步临床应用 | 第46-47页 |
| ·试验结果 | 第47-50页 |
| ·布氏杆菌的纯化培养 | 第47页 |
| ·多重PCR的建立 | 第47-48页 |
| ·多重PCR敏感性检测 | 第48-50页 |
| ·多重PCR特异性检测 | 第50页 |
| ·多重PCR检测方法的初步临床应用 | 第50页 |
| ·讨论 | 第50-53页 |
| 第4章 结论 | 第53-54页 |
| ·表达布氏杆菌SODC蛋白的重组沙门氏菌的构建 | 第53页 |
| ·多重PCR的构建 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-62页 |
| 致谢 | 第62页 |
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