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茶树叶片中硒代半胱氨酸甲基转移酶转录与表达水平的研究
 
     论文目录
 
摘要第1-5页
Abstract第5-11页
1 文献综述第11-17页
   ·硒第11-12页
   ·茶叶中的硒第12-13页
   ·硒对茶树的作用第13页
   ·植物的硒代谢途径第13-15页
   ·硒代半胱氨酸甲基转移酶(SMT)第15页
   ·关于富硒食品的研究第15-16页
   ·植物对硒污染土壤的修复作用第16-17页
2 引言第17-19页
   ·研究意义及目的第17页
   ·研究内容第17-18页
     ·SMT 在富硒茶与非富硒茶中转录水平的研究第17-18页
     ·SMT 在富硒茶与非富硒茶中表达水平的研究第18页
   ·技术路线第18-19页
3 材料与方法第19-37页
   ·实验材料第19页
   ·仪器与试剂第19-24页
     ·主要实验仪器第19页
     ·主要试剂第19-20页
     ·实验中常用试剂配方第20-24页
   ·实验方法第24-37页
     ·总RNA 的提取和检测第24-25页
     ·α-tubulin 原核表达载体的构建第25-30页
       ·cDNA 第一链的合成第25页
       ·α-tubulin 全长cDNA 的扩增第25页
       ·凝胶电泳回收PCR 产物第25-26页
       ·E. coli DH5α感受态的制备第26-27页
       ·PCR 产物与载体的连接第27页
       ·重组质粒的转化第27页
       ·重组子的鉴定第27-28页
       ·α-tubulin 原核表达载体的构建第28页
       ·α-tubulin 的原核表达第28-30页
       ·α-tubulin 原核表达条件优化第30页
     ·α-tubulin 的纯化第30-31页
       ·His 标签融合蛋白的纯化(按照Novagen 公司使用说明进行)第30-31页
       ·包涵体蛋白的纯化第31页
     ·α-tubulin 兔多克隆抗体的制备第31-33页
       ·抗原的制备第31-32页
       ·α-tubulin 兔抗血清的制备第32页
       ·多克隆抗体的纯化第32-33页
     ·茶树叶片总蛋白粗提液的制备第33页
     ·Western blot 检测抗体特异性第33-34页
     ·SMT 兔多克隆抗体的制备及检测第34页
     ·SMT 在富硒茶与非富硒茶中表达水平的研究第34-35页
     ·SMT 在富硒茶与非富硒茶中转录水平的研究第35-37页
       ·富硒茶与非富硒茶叶片总RNA 的提取与定量第35页
       ·cDNA 一链的合成及定量第35页
       ·半定量PCR 引物设计第35页
       ·PCR 反应条件的优化第35-36页
         ·退火温度的优化第35页
         ·模板量的优化第35-36页
         ·循环数的优化第36页
       ·SMT 在富硒茶与非富硒茶中转录水平的研究第36-37页
4 结果与分析第37-48页
   ·RNA 的提取与质量检测第37-38页
     ·RNA 的琼脂糖凝胶电泳第37页
     ·紫外分光光度法检测RNA 纯度第37-38页
   ·cDNA 第一链的电泳检测及浓度测定第38页
   ·α-tubulin 原核表达载体的构建第38-39页
     ·α-tubulin 全长基因克隆第38-39页
     ·菌落PCR第39页
     ·双酶切鉴定第39页
   ·α-tubulin 的原核表达第39-40页
   ·α-tubulin 原核表达的优化第40-42页
     ·最佳诱导温度第40-41页
     ·最佳诱导IPTG 浓度第41页
     ·最佳诱导菌液浓度第41-42页
     ·最佳诱导时间第42页
   ·α-tubulin 的纯化第42-43页
   ·茶树叶片总蛋白粗提液的制备第43页
   ·α-tubulin 和 SMT 兔多克隆抗体特异性鉴定第43-44页
   ·SMT 在富硒茶与非富硒茶中表达水平的研究第44-45页
   ·SMT 在富硒茶与非富硒茶中转录水平的研究第45-48页
     ·PCR 反应条件的优化第45-47页
       ·退火温度的优化第45页
       ·模板量的优化第45-46页
       ·循环数的优化第46-47页
     ·SMT 在富硒茶与非富硒茶中转录水平的研究第47-48页
5 讨论第48-51页
   ·CTAB-LiCl 法提取总 RNA第48页
   ·半定量PCR第48页
   ·His-Tua 的纯化方式第48-49页
   ·多克隆抗体的制备方法第49页
   ·SMT 转录与表达水平差异形成的可能原因第49页
   ·由SMT 转录与表达水平所得的一些关于生产富硒茶的建议第49-51页
6 结论第51-52页
   ·α-tubulin 的原核表达第51页
   ·α-tubulin 和 SMT 多克隆抗体的制备第51页
   ·富硒茶与非富硒茶叶片中SMT 表达水平研究第51页
   ·富硒茶与非富硒茶叶片中SMT 转录水平研究第51-52页
参考文献第52-56页
附录A 中英文缩写与注释第56-58页
附录B α-tubulin 测序及比对结果第58-63页
附录C 蛋白序列比对结果第63-64页
致谢第64-65页
作者简介第65页
成果清单第65页

 
 
论文编号BS694128,这篇论文共65
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