中文摘要 | 第1-3页 |
英文摘要 | 第3-6页 |
第一章 综述 | 第6-18页 |
1.1 前言 | 第6页 |
1.2 生物固氮简介 | 第6-8页 |
1.3 共生固氮的分子遗传研究进展 | 第8-11页 |
1.4 竞争结瘤的分子遗传研究进展 | 第11-17页 |
1.5 本工作的目的 | 第17-18页 |
第二章 材料和方法 | 第18-37页 |
2.1 菌株与质粒 | 第18-19页 |
2.2 植物材料 | 第19页 |
2.3 培养基及生长条件 | 第19-21页 |
2.4 抗生素 | 第21页 |
2.5 溶液、缓冲液和试剂 | 第21-22页 |
2.6 质粒DNA的制备 | 第22-24页 |
2.7 质粒DNA的纯化、定量与沉淀 | 第24-25页 |
2.8 电泳 | 第25页 |
2.9 DNA酶切 | 第25-26页 |
2.10 DNA酶切片段的分离与回收 | 第26-28页 |
2.11 DNA的连接 | 第28页 |
2.12 质粒DNA的转化 | 第28-30页 |
2.13 根瘤菌总DNA的提取 | 第30-31页 |
2.14 DNA—DNA杂交 | 第31-33页 |
2.15 三亲本结合 | 第33-34页 |
2.16 转座子诱变野生型菌染色体DNA | 第34页 |
2.17 Tn5gusA5插入标记置换 | 第34页 |
2.18 β—葡糖苷酸酶活性检测 | 第34页 |
2.19 大豆植株的结瘤试验 | 第34-36页 |
2.20 DNA序列分析 | 第36-37页 |
第三章 转座子Tn5gusA5对重组质粒pGXN201的诱变 | 第37-51页 |
3.1 引言 | 第37-38页 |
3.2 转座子诱变pGXN201 | 第38-39页 |
3.3 3.4kb EcoRI片段的亚克隆 | 第39-41页 |
3.4 亚克隆pGXN201C的序列测定及分析 | 第41-47页 |
3.5 Tn5 gusA5在3.4kb EcoRI片段上的插入片段的亚克隆 | 第47页 |
3.6 克隆pGXN215c、pGXN216c、pGXN217c的测序 | 第47-49页 |
3.7 pGXN217c中Tn5gusA5所在ORF编码氨基酸的同源性比较 | 第49-50页 |
3.8 讨论 | 第50-51页 |
第四章 慢生型大豆根瘤菌GX201突变体及其功能互补菌株的构建 | 第51-55页 |
4.1 引言 | 第51页 |
4.2 慢生型根瘤菌GX201突变体的构建 | 第51-52页 |
4.3 GX201突变菌株的GUS活性检测 | 第52页 |
4.4 Southern杂交分析Tn5 gusA5是否插在染色体上 | 第52-53页 |
4.5 pGXN201C的3.4kb EcoRI片段的亚克隆 | 第53页 |
4.6 GX201突变体的功能互补菌株的构建 | 第53-54页 |
4.7 讨论 | 第54-55页 |
第五章 植株试验 | 第55-58页 |
5.1 引言 | 第55页 |
5.2 植株全部结瘤时间的检测 | 第55-56页 |
5.3 竞争结瘤 | 第56页 |
5.4 共生固氮效应的测定 | 第56-57页 |
5.5 讨论 | 第57-58页 |
第六章 总结与讨论 | 第58-60页 |
参考文献 | 第60-65页 |
硕士期间发表的论文 | 第65-66页 |
致谢 | 第66页 |