摘要 | 第1-8页 |
前言 | 第8-15页 |
1 文献综述 | 第8-15页 |
·散斑壳属真菌的分类研究概况 | 第8-11页 |
·散斑壳的传统分类学 | 第8-9页 |
·生物学技术在分类研究中的应用 | 第9-11页 |
·散斑壳属真菌的致病性 | 第11页 |
·散斑壳菌的生活史 | 第11-12页 |
·散斑壳真菌的分离培养 | 第12页 |
·核酸序列分析在真菌系统学中的应用 | 第12-15页 |
·核酸序列分析的研究进展 | 第12-13页 |
·rRNA基因ITS区序列分析在真菌系统学中的应用 | 第13-15页 |
第一部分 散斑壳属不同种的形态学鉴定 | 第15-22页 |
1 材料和方法 | 第15-16页 |
·散斑壳属种的形态特征分类及鉴定 | 第15页 |
·样品的采集 | 第15页 |
·形态特征分类 | 第15页 |
·散斑壳属的生物学特性 | 第15-16页 |
·病原菌的分离和培养 | 第15页 |
·子囊果组织分离法 | 第15页 |
·子囊果研磨法 | 第15页 |
·子囊孢子分离法 | 第15页 |
·病原菌产孢特性的研究 | 第15-16页 |
·诱发子囊果的产生 | 第15-16页 |
·子囊孢子的释放与萌发 | 第16页 |
2 结果与分析 | 第16-20页 |
·四川省散斑壳病菌Lophodermium种的鉴定 | 第16-18页 |
·散斑壳菌的产孢特性 | 第18-20页 |
·诱发子实体的产生 | 第18页 |
·子囊孢子的释放和萌发 | 第18-20页 |
3 讨论 | 第20-22页 |
·四川省散斑壳病菌Lophodermium种的鉴定 | 第20-21页 |
·散斑壳菌的产孢特性 | 第21-22页 |
第二部分 散斑壳属若干种rRNA基因ITS区的PCR、克隆和序列分析 | 第22-37页 |
1 试验材料及仪器 | 第22-23页 |
·试验菌株 | 第22页 |
·药品和试剂 | 第22-23页 |
·常规药品和化学试剂 | 第22页 |
·培养基 | 第22-23页 |
·分子生物学试剂 | 第23页 |
·主要设备仪器 | 第23页 |
2 试验方法 | 第23-27页 |
·散斑壳真菌细胞总DNA的提取 | 第23-24页 |
·不同种散斑壳菌丝体的获得 | 第23页 |
·不同方法提取散斑壳真菌细胞总DNA | 第23-24页 |
·氯化苄法 | 第23页 |
·改良二次沉淀法 | 第23-24页 |
·散斑壳属不同种rRNA基因ITS区的PCR扩增 | 第24-25页 |
·扩增引物 | 第24页 |
·PCR扩增反应体系 | 第24页 |
·PCR扩增反应循环 | 第24-25页 |
·PCR产物电泳检测 | 第25页 |
·不同种散斑壳rRNA基因ITS区的PCR扩增片段的克隆 | 第25-27页 |
·PCR扩增DNA片段的纯化和回收 | 第25页 |
·JM109载体菌感受态细胞的制备 | 第25页 |
·回收的DNA片段与pUCm-T载体的连接 | 第25-26页 |
·重组质粒转入JM109感受态细胞 | 第26页 |
·阳性克隆菌株的筛选和鉴定 | 第26-27页 |
·阳性克隆菌株的筛选 | 第26页 |
·阳性克隆菌株的酶切鉴定 | 第26-27页 |
·克隆片段的DNA序列测定及分析 | 第27页 |
·DNA序列的测定 | 第27页 |
·DNA序列的分析 | 第27页 |
3 结果与分析 | 第27-34页 |
·散斑壳真菌细胞总DNA的提取 | 第27-28页 |
·散斑壳属不同种rRNA基因ITS区的PCR扩增 | 第28页 |
·阳性克隆菌株的酶切鉴定 | 第28-29页 |
·散斑壳属不同菌株rRNA基因ITS区序列 | 第29-33页 |
·散斑壳属不同菌株rRNA基因ITS序列的系统发育分析 | 第33-34页 |
4 讨论 | 第34-37页 |
·散斑壳真菌细胞总DNA的提取 | 第34页 |
·散斑壳属不同种rRNA基因ITS区的PCR扩增 | 第34-35页 |
·散斑壳属不同菌株rRNA基因ITS序列的系统发育分析 | 第35-37页 |
结论 | 第37-38页 |
参考文献 | 第38-43页 |
英文摘要 | 第43-45页 |
致谢 | 第45-46页 |
附录 | 第46-49页 |