摘要 | 第6-7页 |
ABSTRACT | 第7-8页 |
第一章 文献综述 | 第11-17页 |
1.1 白藜芦醇的生物活性与研究进展 | 第11-12页 |
1.2 芪合成酶基因研究进展 | 第12-13页 |
1.3 转基因植物启动子研究进展 | 第13-15页 |
1.3.1 转基因植物应用启动子类型 | 第13-15页 |
1.3.2 芪合成酶基因启动子研究进展 | 第15页 |
1.4 本研究的目的与意义 | 第15-17页 |
第二章 中国野生毛葡萄‘丹凤-2’果实芪合成酶基因启动子的克隆及功能分析 | 第17-31页 |
2.1 材料 | 第17-18页 |
2.1.1 植物材料 | 第17页 |
2.1.2 植物表达载体 | 第17页 |
2.1.3 主要试剂 | 第17页 |
2.1.4 仪器设备 | 第17页 |
2.1.5 引物 | 第17-18页 |
2.1.6 培养基名称与配方 | 第18页 |
2.2 方法 | 第18-21页 |
2.2.1 中国野生毛葡萄‘丹凤-2’果实基因组DNA提取 | 第18-19页 |
2.2.2 芪合成酶基因果实高表达特异启动子PvqSTS6的克隆 | 第19页 |
2.2.3 启动子顺式作用元件预测 | 第19页 |
2.2.4 启动子PvqSTS6融合GUS载体构建 | 第19页 |
2.2.5 农杆菌介导的PvqSTS6番茄遗传转化与检测 | 第19-20页 |
2.2.6 组织化学染色和GUS蛋白定量检测PvqSTS6转基因番茄不同组织GUS表达量 | 第20页 |
2.2.7 实时定量PCR检测PvqSTS6转基因番茄不同组织GUS表达量 | 第20-21页 |
2.2.8 缺失启动子设计、载体构建与核心序列确定 | 第21页 |
2.3 结果与分析 | 第21-29页 |
2.3.1 中国野生毛葡萄‘丹凤-2’芪合成酶基因VqSTS6在欧洲葡萄中的同源性分析 | 第21页 |
2.3.2 启动子的克隆 | 第21-22页 |
2.3.3 启动子PvqSTS6顺式作用元件分析 | 第22-24页 |
2.3.4 启动子融合载体PvqSTS6-GUS的番茄转化与检测 | 第24-25页 |
2.3.5 启动子转基因番茄不同组织GUS检测 | 第25-26页 |
2.3.6 启动子转基因番茄不同组织GUS表达量的荧光实时定量PCR分析 | 第26-27页 |
2.3.7 果实特异高表达启动子缺失载体构建和核心顺式作用元件的确定 | 第27-29页 |
2.4 讨论 | 第29-31页 |
第三章 中国野生毛葡萄‘丹凤-2’芪合成酶基因双向启动子的克隆及功能分析 | 第31-42页 |
3.1 材料 | 第31-32页 |
3.1.1 植物材料 | 第31页 |
3.1.2 植物表达载体 | 第31页 |
3.1.3 主要试剂 | 第31-32页 |
3.1.4 仪器设备 | 第32页 |
3.1.5 引物 | 第32页 |
3.2 方法 | 第32-33页 |
3.2.1 中国野生毛葡萄‘丹凤-2’芪合成酶基因双向启动子的克隆 | 第32页 |
3.2.2 双向启动子顺式作用元件预测 | 第32页 |
3.2.3 中国野生毛葡萄‘丹凤-2’果实总RNA提取 | 第32-33页 |
3.2.4 芪合成酶基因VqSTS12/VqSTS33的荧光实时定量PCR分析 | 第33页 |
3.2.5 双向启动子GUS融合瞬时表达载体构建 | 第33页 |
3.2.6 双向启动子瞬时转化葡萄叶片 | 第33页 |
3.2.7 生物与非生物胁迫处理双向启动子瞬转葡萄叶片 | 第33页 |
3.2.8 双向启动子GUS组织化学染色与荧光定量分析 | 第33页 |
3.3 结果与分析 | 第33-40页 |
3.3.1 中国野生毛葡萄‘丹凤-2’双向启动子所启动基因的同源性分析 | 第33-34页 |
3.3.2 双向启动子的克隆 | 第34-35页 |
3.3.3 双向启动子顺式作用元件分析 | 第35-38页 |
3.3.4 双向启动子所启动基因在果实发育不同时期的荧光实时定量PCR分析 | 第38页 |
3.3.5 生物和非生物胁迫对双向启动子瞬时转化表达的影响 | 第38-40页 |
3.4 讨论 | 第40-42页 |
全文结论 | 第42-43页 |
参考文献 | 第43-51页 |
致谢 | 第51-52页 |
作者简介 | 第52页 |