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当前位置:教育论文中心首页--硕士论文--耐高温脂肪酶高产菌株的筛选及其脂肪酶表达、纯化和性质研究
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耐高温脂肪酶高产菌株的筛选及其脂肪酶表达、纯化和性质研究
 
     论文目录
 
致谢第5-6页
摘要第6-8页
Abstract第8-9页
第一章 绪论第15-27页
    1.1 脂肪酶简介第15-19页
        1.1.1 脂肪酶及其活性中心第15-16页
        1.1.2 脂肪酶的来源第16页
        1.1.3 脂肪酶的分类第16-18页
        1.1.4 脂肪酶的生产方法第18-19页
    1.2 Aureobasidium pullulans简介第19-20页
    1.3 脂肪酶的发酵优化生产第20-21页
        1.3.1 发酵培养基的优化第20页
        1.3.2 发酵条件的优化第20-21页
    1.4 脂肪酶的分离纯化及性质研究第21-24页
        1.4.1 分离纯化方法第21-22页
        1.4.2 脂肪酶性质研究第22-24页
            1.4.2.1 最适反应温度及温度稳定性第22-23页
            1.4.2.2 最适反应pH及pH稳定性第23页
            1.4.2.3 有机溶剂耐受性第23页
            1.4.2.4 脂肪酶激活剂和抑制剂第23-24页
    1.5 脂肪酶的应用第24-26页
        1.5.1 脂肪酶在食品工业上的应用第24-25页
            1.5.1.1 面类食品中的应用第24页
            1.5.1.2 油脂工业中的应用第24-25页
            1.5.1.3 乳品工业中的应用第25页
        1.5.2 其他应用第25-26页
    1.6 本论文的研究目的、意义和研究内容第26-27页
第二章 高产耐高温脂肪酶菌株的筛选第27-36页
    2.1 前言第27页
    2.2 材料试剂与设备第27-28页
        2.2.1 实验材料第27页
        2.2.2 培养基及试剂第27-28页
        2.2.3 仪器与设备第28页
    2.3 实验方法第28-30页
        2.3.1 高产脂肪酶菌株的筛选第28页
            2.3.1.1 菌种初筛第28页
            2.3.1.2 菌种分离纯化第28页
            2.3.1.3 菌种复筛第28页
        2.3.2 脂肪酶酶活测定第28-29页
        2.3.3 脂肪酶酶活标准曲线的绘制第29页
        2.3.4 粗酶液的最适反应温度及热稳定性测定第29页
        2.3.5 菌种保存第29-30页
    2.4 结果与分析第30-35页
        2.4.1 产胞外酶菌株的筛选第30-31页
        2.4.2 酶活标准曲线的绘制第31-32页
        2.4.3 粗酶液的最适反应温度第32-33页
        2.4.4 粗酶液的热稳定性第33-35页
    2.5 本章小结第35-36页
第三章 高产耐高温脂肪酶菌株的鉴定第36-41页
    3.1 前言第36页
    3.2 材料试剂与设备第36-37页
        3.2.1 实验材料第36页
        3.2.2 培养基及试剂第36页
        3.2.3 仪器与设备第36-37页
    3.3 实验方法第37-38页
        3.3.1 菌株S3显微镜观察第37页
        3.3.2 26S rDNA鉴定之DNA提取与PCR第37页
        3.3.3 26S rDNA琼脂糖凝胶电泳检测与系统发育树构建第37页
        3.3.4 ITS序列鉴定之DNA提取与PCR第37-38页
        3.3.5 ITS序列琼脂糖凝胶电泳检测与系统发育树构建第38页
    3.4 结果与分析第38-40页
        3.4.1 菌株S3菌落观察和显微镜观察第38页
        3.4.2 琼脂糖凝胶电泳第38-39页
        3.4.3 系统发育树构建第39-40页
    3.5 本章小结第40-41页
第四章 AUREOBASIDIUM PULLULANS产脂肪酶发酵优化第41-59页
    4.1 前言第41页
    4.2 材料试剂与设备第41页
        4.2.1 实验材料第41页
        4.2.2 培养基及试剂第41页
        4.2.3 仪器与设备第41页
    4.3 实验方法第41-43页
        4.3.1 菌体生物量的测定第41页
        4.3.2 脂肪酶酶活的测定第41-42页
        4.3.3 种子液生长曲线的测定第42页
        4.3.4 种子液的制备第42页
        4.3.5 菌株S3产酶曲线和生长曲线的绘制第42页
        4.3.6 摇瓶发酵条件的优化第42页
            4.3.6.1 接种量对产酶的影响第42页
            4.3.6.2 装液量对产酶的影响第42页
        4.3.7 摇瓶发酵培养基的优化第42-43页
            4.3.7.1 氮源的优化第42页
            4.3.7.2 碳源的优化第42-43页
            4.3.7.3 诱导剂的优化第43页
            4.3.7.4 表面活性剂的优化第43页
            4.3.7.5 金属离子的优化第43页
    4.4 结果与分析第43-58页
        4.4.1 种子液生长曲线第43-44页
        4.4.2 菌株S3产酶曲线和生长曲线第44-45页
        4.4.3 接种量对产酶的影响第45-46页
        4.4.4 装液量对产酶的影响第46-47页
        4.4.5 氮源对产酶和菌体生物量的影响第47-50页
            4.4.5.1 筛选最佳氮源第47-48页
            4.4.5.2 酵母提取物的添加量第48-49页
            4.4.5.3 胰蛋白胨的添加量第49-50页
        4.4.6 碳源对产酶和菌体生物量的影响第50-53页
            4.4.6.1 筛选最佳碳源第50-51页
            4.4.6.2 葡萄糖的添加量第51-52页
            4.4.6.3 麦芽糖的添加量第52-53页
        4.4.7 诱导剂对产酶的影响第53-55页
            4.4.7.1 筛选最佳诱导剂第53-54页
            4.4.7.2 玉米油的添加量第54-55页
        4.4.8 表面活性剂对产酶的影响第55-57页
            4.4.8.1 筛选最佳表面活性剂第55-56页
            4.4.8.2 Tw 20的添加量第56-57页
        4.4.9 不同金属离子对产酶的影响第57-58页
    4.5 本章小结第58-59页
第五章 AUREOBASIDIUM PULLULANS脂肪酶的分离纯化与性质研究第59-73页
    5.1 引言第59页
    5.2 材料试剂与设备第59-61页
        5.2.1 实验材料第59页
        5.2.2 培养基及试剂第59-60页
        5.2.3 仪器与设备第60-61页
    5.3 实验方法第61-65页
        5.3.1 脂肪酶的分离纯化第61-63页
            5.3.1.1 粗酶液的制备第61页
            5.3.1.2 蛋白质测定第61页
            5.3.1.3 粗酶液过滤除菌与超滤浓缩第61页
            5.3.1.4 DEAE-Sepharose FF阴离子交换层析第61-62页
            5.3.1.5 超滤浓缩及冻干第62页
            5.3.1.7 SDS-PAGE电泳检测第62-63页
        5.3.2 脂肪酶性质研究第63-65页
            5.3.2.1 最适反应温度及热稳定性测定第63-64页
            5.3.2.2 最适反应pH及pH稳定性测定第64页
            5.3.2.3 有机溶剂耐受性测定第64页
            5.3.2.4 金属离子对脂肪酶活性的影响第64页
            5.3.2.5 表面活性剂及抑制剂对脂肪酶活性的影响第64页
            5.2.3.6 脂肪酶对可食用油脂的水解第64-65页
    5.4 结果与分析第65-72页
        5.4.1 蛋白质标准曲线的绘制第65页
        5.4.2 DEAE-Sephorose Fast Flow阴离子交换层析柱纯化第65-66页
        5.4.3 脂肪酶纯化参数及不连续SDS-PAGE电泳第66-67页
        5.4.4 脂肪酶的最适反应温度及热稳定性第67-68页
        5.4.5 脂肪酶的最适pH及pH稳定性第68-69页
        5.4.6 脂肪酶的有机溶剂耐受性第69-70页
        5.4.7 金属离子对脂肪酶的影响第70页
        5.4.8 表面活性剂及抑制剂对脂肪酶的影响第70-71页
        5.4.9 脂肪酶水解可食用油脂实验第71-72页
    5.5 本章小结第72-73页
第六章 结论与展望第73-75页
    6.1 主要结论第73页
    6.2 存在的问题及展望第73-75页
参考文献第75-83页
作者简介第83页

 
 
论文编号BS2950879,这篇论文共83
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