中文摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-7页 |
主要符号表 | 第13-15页 |
第一章 绪论 | 第15-39页 |
1.1 糖胺聚糖 | 第15-16页 |
1.2 肝素/硫酸类肝素 | 第16-20页 |
1.2.1 肝素/硫酸类肝素的结构 | 第16-19页 |
1.2.2 肝素/硫酸类肝素的功能 | 第19-20页 |
1.3 含N-未被取代葡萄糖胺残基的肝素/硫酸类肝素 | 第20-23页 |
1.3.1 N-未被取代葡萄糖胺残基的生成 | 第20-21页 |
1.3.2 N-未被取代葡萄糖胺残基肝素/硫酸类肝素的功能 | 第21-22页 |
1.3.3 N-未被取代葡萄糖胺残基的检测及其分布 | 第22-23页 |
1.4 肝素/硫酸类肝素的结构分析 | 第23-35页 |
1.4.1 肝素/硫酸类肝素结构分析的意义 | 第24页 |
1.4.2 肝素酶解和化学裂解法 | 第24-28页 |
1.4.3 高效液相色谱法 | 第28-31页 |
1.4.3.1 强阴离子交换高效液相色谱 | 第28页 |
1.4.3.2 反相高效液相色谱 | 第28-29页 |
1.4.3.3 超高压液相色谱 | 第29-30页 |
1.4.3.4 亲水作用色谱 | 第30页 |
1.4.3.5 石墨化碳色谱 | 第30-31页 |
1.4.4 电泳法 | 第31-32页 |
1.4.5 X晶体衍射法 | 第32页 |
1.4.6 串联质谱法 | 第32-35页 |
1.4.6.1 电离方式 | 第33-34页 |
1.4.6.2 离子活化方式 | 第34-35页 |
1.4.7 核磁共振 | 第35页 |
1.5 肝素/硫酸类肝素寡糖测序概要 | 第35-37页 |
1.6 定量 | 第37-38页 |
1.6.1 无标记的定量 | 第37页 |
1.6.2 有标记的定量 | 第37-38页 |
1.7 本论文研究工作 | 第38-39页 |
第二章 肝素寡糖的制备与表征 | 第39-54页 |
2.1 引言 | 第39-41页 |
2.2 实验部分 | 第41-43页 |
2.2.1 试剂、材料和仪器 | 第41页 |
2.2.2 酒精沉淀法 | 第41-42页 |
2.2.3 Bio-Gel P-10分离低分子量肝素 | 第42页 |
2.2.4 强阴离子交换高效液相色谱(SAX-HPLC) | 第42页 |
2.2.5 二糖组分鉴定 | 第42页 |
2.2.6 尺寸排阻高效液相色谱(SE-HPLC)分析 | 第42-43页 |
2.3 结果与讨论 | 第43-53页 |
2.3.1 分离制备肝素寡糖 | 第43-45页 |
2.3.2 分析肝素四糖、六糖 | 第45-46页 |
2.3.3 鉴定肝素四糖、六糖的二糖组分 | 第46-51页 |
2.3.4 精制肝素四糖、六糖 | 第51-53页 |
2.4 小结 | 第53-54页 |
第三章 N-非取代葡萄糖胺(GlcNH_3~+)肝素寡糖糖库的建立与表征 | 第54-85页 |
3.1 引言 | 第54-55页 |
3.2 实验部分 | 第55-59页 |
3.2.1 试剂、材料和仪器 | 第55-56页 |
3.2.2 含GlcNH_3~+肝素二糖的制备 | 第56页 |
3.2.3 含GlcNH_3~+肝素四糖的制备 | 第56-57页 |
3.2.4 含GlcNH_3~+肝素六糖的制备与优化 | 第57页 |
3.2.5 肝素酶解法 | 第57-58页 |
3.2.6 SAX-HPLC分析 | 第58页 |
3.2.7 SE-HPLC分析 | 第58页 |
3.2.8 LC/MS-IT-TOF分析 | 第58-59页 |
3.3 结果讨论 | 第59-84页 |
3.3.1 含GlcNH_3~+肝素二糖的制备与表征 | 第59-62页 |
3.3.1.1 制备△HexA(2S)-GlcNH_3~+(6S) | 第59-60页 |
3.3.1.2 SE-HPLC分析 | 第60-61页 |
3.3.1.3 MS-IT-TOF分析 | 第61-62页 |
3.3.2 含GlcNH_3~+肝素四糖的制备与表征 | 第62-73页 |
3.3.2.1 制备含GlcNH_3~+基团的肝素四糖 | 第62-63页 |
3.3.2.2 二糖组分鉴定 | 第63-64页 |
3.3.2.3 SE-HPLC分析 | 第64-65页 |
3.3.2.4 RPIP-LC/MS-IT-TOF分析 | 第65-73页 |
3.3.3 含GlcNH_3~+肝素六糖的制备与表征 | 第73-84页 |
3.3.3.1 制备含GlcNH_3~+肝素六糖及鉴定其二糖组分 | 第73-75页 |
3.3.3.2 优化肝素六糖部分脱N位硫酸根反应 | 第75-77页 |
3.3.3.3 SE-HPLC分析 | 第77-78页 |
3.3.3.4 RPIP-LC/MS-IT-TOF分析 | 第78-84页 |
3.4 小结 | 第84-85页 |
第四章 N-非取代葡萄糖胺(GlcNH_3~+)肝素/硫酸类肝素寡糖序列测定的一种新方法 | 第85-114页 |
4.1 引言 | 第85-86页 |
4.2 实验部分 | 第86-89页 |
4.2.1 试剂、材料和仪器 | 第86-87页 |
4.2.2 亚硝酸(pH 4.0)裂解 | 第87-88页 |
4.2.3 尺寸排阻高效液相色谱(SE-HPLC) | 第88页 |
4.2.4 制备不饱和脱氨基二糖 | 第88页 |
4.2.5 制备饱和脱氨基二糖 | 第88页 |
4.2.6 LC/MS-IT-TOF分析 | 第88-89页 |
4.3 结果讨论 | 第89-113页 |
4.3.1 含GlcNH_3~+肝素寡糖糖链系列测定方法的建立 | 第89页 |
4.3.2 亚硝酸(pH 4.0)裂解法和SE-HPLC法的优化 | 第89-93页 |
4.3.3 PGC-LC/MS-IT-TOF分析亚硝酸裂解肝素四糖的产物 | 第93-96页 |
4.3.4 SE-HPLC分析HNO_2裂解产物二糖 | 第96-97页 |
4.3.5 RPIP-LC/MS-IT-TOF分析HNO_2裂解产物二糖 | 第97-100页 |
4.3.6 含GlcNH_3~+肝素四糖的测序 | 第100-102页 |
4.3.7 含两个GlcNH_3~+ dp6-2a的测序 | 第102-104页 |
4.3.8 含两个GlcNH_3~+ dp6-2b的测序 | 第104-106页 |
4.3.9 含两个GlcNH_3~+ dp6-2c的测序 | 第106-107页 |
4.3.10 含一个GlcNH_3~+ dp6-1a的测序 | 第107-109页 |
4.3.11 含一个GlcNH_3~+ dp6-1b的测序 | 第109-111页 |
4.3.12 制备含GlcNH_3~+肝素六糖糖库 | 第111-113页 |
4.4 小结 | 第113-114页 |
第五章 含饱和及不饱和结构的肝素/硫酸类肝素二糖UV 232 nm的吸收情况及其在肝素寡糖系列测定上的应用 | 第114-129页 |
5.1 引言 | 第114-116页 |
5.2 实验部分 | 第116-119页 |
5.2.1 试剂、材料和仪器 | 第116-117页 |
5.2.2 制备非还原端饱和结构的肝素二糖 | 第117页 |
5.2.3 制备N-非取代且含不同硫酸根数目的肝素 | 第117-118页 |
5.2.4 亚硝酸裂解 | 第118页 |
5.2.5 尺寸排阻高效液相色谱(SE-HPLC) | 第118页 |
5.2.6 LC/MS-IT-TOF分析 | 第118-119页 |
5.2.7 肝素二糖UV吸收表征 | 第119页 |
5.3 结果讨论 | 第119-128页 |
5.3.1 SE-HPLC分析非还原端饱和结构的肝素二糖 | 第119-122页 |
5.3.2 RPIP-LC/MS-IT-TOF分析非还原端饱和结构的肝素二糖 | 第122-124页 |
5.3.3 肝素二糖UV 232 nm吸收情况 | 第124-126页 |
5.3.4 非还原端饱和结构的UV 232 nm吸收在肝素寡糖测序上的应用 | 第126-128页 |
5.4 小结 | 第128-129页 |
第六章 N-非取代葡萄糖胺(GlcNH_3~+)肝素寡糖LC/MS-IT-TOF裂解规律初探 | 第129-142页 |
6.1 引言 | 第129-130页 |
6.2 实验部分 | 第130-131页 |
6.2.1 试剂、材料和仪器 | 第130页 |
6.2.2 LC/MS-IT-TOF分析 | 第130-131页 |
6.3 结果讨论 | 第131-141页 |
6.3.1 dp4s的裂解规律 | 第131-137页 |
6.3.2 dp6s的裂解规律 | 第137-141页 |
6.4 小结 | 第141-142页 |
结论 | 第142-144页 |
参考文献 | 第144-164页 |
致谢 | 第164-165页 |
作者简介、在学期间的研究成果及发表的学术论文 | 第165页 |