中文摘要 | 第5-6页 |
ABSTRACT | 第6页 |
前言 | 第7-10页 |
材料和方法 | 第10-34页 |
1. 材料 | 第10-15页 |
1.1 细胞系及质粒 | 第10-12页 |
1.2 shRNA及siRNA | 第12页 |
1.3 试剂和抗体 | 第12-14页 |
1.4 耗材和仪器 | 第14-15页 |
2. 方法 | 第15-34页 |
2.1 细胞培养 | 第15-16页 |
2.2 细胞迁移实验 | 第16-17页 |
2.3 MTT比色实验 | 第17页 |
2.4 siRNA干扰 | 第17-18页 |
2.5 质粒构建 | 第18-19页 |
2.6 质粒瞬时转染 | 第19-20页 |
2.7 稳定细胞株的建立 | 第20-21页 |
2.8 双荧光素酶报告基因的检测 | 第21-22页 |
2.9 RT-PCR和qPCR | 第22-23页 |
2.10 ChIP (Chromatin Immunoprecipitation,染色质免疫沉淀) | 第23-25页 |
2.11 Western blotting(免疫印记) | 第25-30页 |
2.12 GST-Pulldown检测 | 第30-31页 |
2.13 免疫荧光 | 第31-32页 |
2.14 免疫组化 | 第32-33页 |
2.15 统计学分析 | 第33-34页 |
结果 | 第34-58页 |
1.EGF诱导SGC-7901 胃癌细胞发生EMT | 第34-36页 |
2.Wnt5a参与EGF诱导的SGC-7901 胃癌细胞EMT | 第36-40页 |
3.Arf6中介EGF诱导的SGC-7901 胃癌细胞EMT | 第40-44页 |
4.磷酸化ERK参与EGF/Arf6信号通路诱导的SGC-7901 胃癌细胞EMT | 第44-48页 |
5.磷酸化ERK抑制Wnt5a基因的转录 | 第48-53页 |
6.人胃癌组织中Wnt5a和磷酸化ERK的表达量与胃癌分化程度相关 | 第53-58页 |
讨论 | 第58-62页 |
参考文献 | 第62-74页 |
综述 | 第74-109页 |
参考文献 | 第88-109页 |
缩略词 | 第109-112页 |
攻读学位期间发表论文 | 第112-114页 |
致谢 | 第114-115页 |