| 摘要 | 第3-8页 |
| ABSTRACT | 第8-13页 |
| 缩略说明 | 第14-20页 |
| 第一章 文献综述 胞质分裂调控蛋白1的研究进展概述 | 第20-28页 |
| 1.1 前言 | 第20-21页 |
| 1.2 PRC1结构及与微管蛋白间的关系 | 第21-23页 |
| 1.3 PRC1在纺锤体组装及胞质分裂中的作用 | 第23-25页 |
| 1.4 PRC1与肿瘤发生 | 第25-26页 |
| 1.5 PRC1在生殖领域研究的意义与展望 | 第26-28页 |
| 第二章 实验研究 PRC1在小鼠卵子减数分裂中的功能研究 | 第28-78页 |
| 2.1 引言 | 第28-30页 |
| 2.2 实验材料与研究方法 | 第30-45页 |
| 2.2.1 实验材料 | 第30-33页 |
| 2.2.1.1 实验动物及伦理学声明 | 第30页 |
| 2.2.1.2 主要仪器设备 | 第30-31页 |
| 2.2.1.3 主要实验相关试剂耗材 | 第31-33页 |
| 2.2.1.4 相关实验抗体 | 第33页 |
| 2.2.2 实验方法 | 第33-45页 |
| 2.2.2.1 小鼠卵子培养相关试剂的配制 | 第33-34页 |
| 2.2.2.2 小鼠各时期卵子的收集与培养 | 第34页 |
| 2.2.2.3 蛋白质免疫印迹 | 第34-35页 |
| 2.2.2.4 免疫荧光染色及激光共聚焦显微镜扫描 | 第35-37页 |
| 2.2.2.5 微管特异性药物处理 | 第37页 |
| 2.2.2.6 Prc1MO卵胞质显微注射 | 第37-39页 |
| 2.2.2.7 体外转录载体的构建 | 第39-44页 |
| 2.2.2.8 活细胞实时观察 | 第44-45页 |
| 2.2.2.9 统计学方法 | 第45页 |
| 2.3 实验结果及分析 | 第45-74页 |
| 2.3.1 PRC1在小鼠卵子减数分裂进程中蛋白表达趋势及定位研究 | 第45-49页 |
| 2.3.1.1 PRC1在小鼠卵子减数分裂进程中蛋白表达趋势 | 第45-46页 |
| 2.3.1.2 PRC1在卵子减数分裂进程中的蛋白定位 | 第46-48页 |
| 2.3.1.3 微管干扰药物处理卵子后PRC1的定位 | 第48-49页 |
| 2.3.2 PRC1在小鼠卵子减数分裂过程中的功能研究 | 第49-74页 |
| 2.3.2.1 利用特异性Prc1MO敲减PRC1对卵子减数分裂的影响 | 第49-66页 |
| 2.3.2.1.1 Prc1MO敲减效率的检测 | 第49-50页 |
| 2.3.2.1.2 PRC1敲减不影响卵子GVBD进程 | 第50-52页 |
| 2.3.2.1.3 PRC1敲减导致卵子第一极体排放失败 | 第52-53页 |
| 2.3.2.1.4 PRC1敲减导致卵子第一极体形态异常 | 第53-55页 |
| 2.3.2.1.5 PRC1敲减导致纺锤体组装及染色体聚集失败 | 第55-56页 |
| 2.3.2.1.6 PRC1敲减降低纺锤体极的稳定性 | 第56-57页 |
| 2.3.2.1.7 PRC1敲减导致染色体异倍性增加 | 第57-58页 |
| 2.3.2.1.8 PRC1敲减导致动粒微管捕捉动粒失败 | 第58-61页 |
| 2.3.2.1.9 PRC1敲减导致纺锤体迁移失败 | 第61-63页 |
| 2.3.2.1.10 PRC1敲减导致纺锤体中央区桥梁微管组装失败 | 第63-65页 |
| 2.3.2.1.11 PRC1敲减导致微丝分布异常 | 第65-66页 |
| 2.3.2.1.12 PRC1调控纺锤体组装与染色体分离机制总结 | 第66页 |
| 2.3.2.2 过表达研究PRC1在卵子成熟中的功能 | 第66-74页 |
| 2.3.2.2.1 PRC1过表达体系的验证 | 第67-69页 |
| 2.3.2.2.2 PRC1过表达不影响卵子GVBD进程 | 第69-70页 |
| 2.3.2.2.3 PRC1过表达导致卵子PB1排放失败 | 第70-71页 |
| 2.3.2.2.4 PRC1过表达不影响卵子PB1的形态 | 第71-72页 |
| 2.3.2.2.5 PRC1过表达导致纺锤体组装及染色体聚集失败 | 第72-73页 |
| 2.3.2.2.6 PRC1过表达导致染色体异倍性增加 | 第73-74页 |
| 2.4 讨论 | 第74-78页 |
| 2.4.1 PRC1在卵子减数分裂中的定位与表达 | 第74-75页 |
| 2.4.2 PRC1在卵子纺锤体组装与染色体聚集分离中的功能 | 第75-77页 |
| 2.4.3 PRC1在卵子胞质不对称分裂中的功能研究 | 第77-78页 |
| 第三章 实验研究 PRC1在小鼠着床前胚胎发育过程中的功能研究 | 第78-94页 |
| 3.1 引言 | 第78-79页 |
| 3.2 实验材料与研究方法 | 第79-81页 |
| 3.2.1 实验材料 | 第79页 |
| 3.2.2 实验方法 | 第79-81页 |
| 3.2.2.1 小鼠精子获能 | 第79页 |
| 3.2.2.2 体内成熟卵子获取与体外受精 | 第79页 |
| 3.2.2.3 着床前胚胎的培养 | 第79-80页 |
| 3.2.2.4 蛋白质免疫印迹 | 第80页 |
| 3.2.2.5 免疫荧光染色及激光共聚焦显微镜扫描 | 第80页 |
| 3.2.2.6 Prc1MO卵胞质显微注射 | 第80页 |
| 3.2.2.7 活细胞实时成像观察 | 第80-81页 |
| 3.2.2.8 统计学方法 | 第81页 |
| 3.3 实验结果及分析 | 第81-92页 |
| 3.3.1 PRC1在小鼠着床前胚胎中的定位研究 | 第81-82页 |
| 3.3.2 PRC1在小鼠着床前胚胎发育中的功能研究 | 第82-92页 |
| 3.3.2.1 PN期胚胎PRC1敲减对小鼠着床前胚胎发育的影响 | 第83-87页 |
| 3.3.2.1.1 Prc1MO干扰效率检测 | 第83-84页 |
| 3.3.2.1.2 PRC1敲减导致着床前胚胎发育率下降 | 第84-85页 |
| 3.3.2.1.3 PRC1敲减导致着床前胚胎卵裂异常 | 第85-87页 |
| 3.3.2.2 2-cell期胚胎PRC1敲减对小鼠着床前胚胎的影响 | 第87-92页 |
| 3.3.2.2.1 Prc1MO干扰效率检测 | 第87-88页 |
| 3.3.2.2.2 PRC1敲减导致胞质分裂失败 | 第88-89页 |
| 3.3.2.2.3 PRC1敲减导致纺锤体组装及染色体排列异常 | 第89-92页 |
| 3.4 讨论 | 第92-94页 |
| 参考文献 | 第94-102页 |
| 结论 | 第102-103页 |
| 附件 | 第103-104页 |
| 致谢 | 第104-106页 |
| 攻读博士期间发表的论文 | 第106-107页 |
| 参加会议及受邀报告 | 第107-108页 |
| 附录 | 第108-112页 |
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