| 摘要 | 第8-11页 |
| ABSTRACT | 第11-14页 |
| 缩写词表 | 第15-17页 |
| 第一章 前言 | 第17-32页 |
| 1.1 糖类、糖苷酶及糖苷酶在糖类合成中的应用 | 第17-22页 |
| 1.1.1 糖类化合物的功能 | 第17页 |
| 1.1.2 糖类化合物的结构解析 | 第17-19页 |
| 1.1.3 糖苷酶及其作用机制 | 第19-21页 |
| 1.1.4 糖苷酶在糖类合成中的应用 | 第21-22页 |
| 1.2 岩藻糖基化寡糖及其功能 | 第22-23页 |
| 1.3 α-L-岩藻糖苷酶合成岩藻糖苷的研究进展 | 第23-30页 |
| 1.3.1 岩藻糖苷合成方法 | 第23-24页 |
| 1.3.2 α-L-糖苷酶合成岩藻糖苷的原理 | 第24-26页 |
| 1.3.3 岩藻糖苷酶合成岩藻糖苷的现状及展望 | 第26-30页 |
| 1.4 本论文的研究工作以及意义 | 第30-32页 |
| 第二章 α-L-岩藻糖苷酶的异源表达及转糖基活性的筛选 | 第32-49页 |
| 2.1 材料和方法 | 第33-37页 |
| 2.1.1 主要试剂和仪器 | 第33页 |
| 2.1.2 菌株、质粒 | 第33页 |
| 2.1.3 α-L-岩藻糖苷酶在大肠杆菌中的重组表达以及酶蛋白纯化 | 第33-35页 |
| 2.1.4 TLC分析技术 | 第35页 |
| 2.1.5 α-L-岩藻糖苷酶的底物水解特异性 | 第35-36页 |
| 2.1.6 α-L-岩藻糖苷酶转糖基活性的筛选 | 第36-37页 |
| 2.2 结果 | 第37-48页 |
| 2.2.1 α-L-岩藻糖苷酶的序列分析 | 第37-43页 |
| 2.2.2 α-L-岩藻糖苷酶的异源表达及纯化 | 第43-44页 |
| 2.2.3 α-L-岩藻糖苷酶底物水解特异性 | 第44-45页 |
| 2.2.4 α-L-岩藻糖苷酶不同受体的转糖基反应筛选 | 第45-47页 |
| 2.2.5 讨论 | 第47-48页 |
| 本章小结 | 第48-49页 |
| 第三章 α-L-岩藻糖苷酶BF29A2的酶学性质及转糖基活性研究 | 第49-63页 |
| 3.1 材料和方法 | 第49-52页 |
| 3.1.1 试剂与仪器 | 第49-50页 |
| 3.1.2 BF29A2的酶学性质 | 第50页 |
| 3.1.3 BF29A2以GalNAc为受体的转糖基反应产物确定 | 第50-51页 |
| 3.1.4 BF29A2以GalNAc为受体的转糖基反应的优化 | 第51-52页 |
| 3.1.5 Bio-gel-P2凝胶过滤层析、HPLC产物纯化 | 第52页 |
| 3.1.6 寡糖产物的结构鉴定 | 第52页 |
| 3.2 结果 | 第52-61页 |
| 3.2.1 BF29A2的酶学性质 | 第52-54页 |
| 3.2.2 BF29A2以GalNAc为受体的转糖基反应产物确定 | 第54-56页 |
| 3.2.3 BF29A2以GaINAc为受体的转糖基反应的优化 | 第56-59页 |
| 3.2.4 Bio-gel-P2凝胶过滤层析、HPLC产物纯化 | 第59页 |
| 3.2.5 寡糖产物的结构鉴定 | 第59-61页 |
| 3.2.6 讨论 | 第61页 |
| 本章小结 | 第61-63页 |
| 第四章 α-L-岩藻糖苷酶BF29A4的酶学性质及转糖基活性研究 | 第63-77页 |
| 4.1 材料和方法 | 第63-64页 |
| 4.1.1 材料 | 第63页 |
| 4.1.2 BF29A4的酶学性质 | 第63页 |
| 4.1.3 BF29A4以GlcNAc为受体的转糖基反应产物确定 | 第63-64页 |
| 4.1.4 BF29A4以GlcNAc为受体的转糖基反应的优化 | 第64页 |
| 4.1.5 Bio-gel-P2凝胶过滤层析 | 第64页 |
| 4.1.6 寡糖产物的MS分析及离子色谱结构鉴定 | 第64页 |
| 4.2 结果 | 第64-76页 |
| 4.2.1 BF29A4的酶学性质 | 第64-67页 |
| 4.2.2 BF29A4以GlcNAc为受体的转糖基反应产物确定 | 第67-68页 |
| 4.2.3 BF29A4以GlcNAc为受体的转糖基反应产率的优化 | 第68-72页 |
| 4.2.4 寡糖产物的产物分离 | 第72-73页 |
| 4.2.5 寡糖产物的质谱分析以及离子色谱结构鉴定 | 第73-75页 |
| 4.2.6 讨论 | 第75-76页 |
| 本章小结 | 第76-77页 |
| 附录 | 第77-80页 |
| 1. BfAfc3水解机制~1H NMR图谱 | 第77页 |
| 2. BF29A2转糖基产物核磁共振(NMR)图谱 | 第77-80页 |
| 参考文献 | 第80-88页 |
| 致谢 | 第88-89页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第89页 |
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