摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-8页 |
主要英文对照表 | 第9-12页 |
第一部分 文献综述 | 第12-24页 |
综述 | 第13-24页 |
1. MDV研究现状 | 第13页 |
2. 外泌体概述 | 第13-15页 |
2.1 外泌体简介 | 第13-15页 |
2.2 外泌体的分离 | 第15页 |
3. MICRORNA概述 | 第15-18页 |
3.1 miRNA简介 | 第15-18页 |
4 外泌体MIRNA在癌症中的研究进展 | 第18-23页 |
4.1 外泌体与癌症 | 第18页 |
4.2 miRNA的细胞间通讯功能及在癌症中的作用 | 第18-20页 |
4.3 与癌症相关的抑癌因子PTEN研究进展 | 第20-23页 |
5 鸡马立克氏病中的miRNA研究进展 | 第23-24页 |
第二部分 试验部分 | 第24-67页 |
第一章 MDV感染CEF细胞来源的外泌体提取及鉴定 | 第25-34页 |
1 材料 | 第25-26页 |
1.1 主要试剂 | 第25-26页 |
1.2 主要仪器 | 第26页 |
2 试验方法 | 第26-29页 |
2.1 CEF制备 | 第26页 |
2.2 外泌体的提取 | 第26-27页 |
2.3 外泌体的鉴定 | 第27-28页 |
2.4 质谱分析 | 第28页 |
2.5 外泌体示踪 | 第28-29页 |
3 试验结果 | 第29-32页 |
3.1 透射电镜观察外泌体形态 | 第29页 |
3.2 BCA测定外泌体浓度 | 第29-30页 |
3.3 Western-blot检测外泌体表面标志物 | 第30页 |
3.4 MDV感染对CEF细胞外泌体蛋白组成的影响 | 第30-32页 |
3.5 外泌体示踪 | 第32页 |
4 讨论 | 第32-33页 |
5 本章小结 | 第33-34页 |
第二章 外泌体对鸡淋巴细胞的免疫学作用 | 第34-39页 |
1 材料 | 第34页 |
1.1 主要试剂 | 第34页 |
1.2 主要仪器 | 第34页 |
2 方法 | 第34-36页 |
2.1 脾脏淋巴细胞的制备 | 第34-35页 |
2.2 外泌体对鸡淋巴细胞的增殖情况 | 第35页 |
2.3 外泌体对CD4~+、CD8~+淋巴细胞的影响 | 第35页 |
2.4 外泌体对淋巴细胞的IFN-γ的影响 | 第35-36页 |
3 结果 | 第36-37页 |
3.1 CCK-8检测细胞增殖情况 | 第36页 |
3.2 流式细胞术检测淋巴细胞中CD4~+、CD8~+水平 | 第36-37页 |
3.3 外泌体对淋巴细胞的IFN-γ表达影响 | 第37页 |
4 讨论 | 第37-38页 |
5 本章小结 | 第38-39页 |
第三章 外泌体SRNA预测及靶基因PTEN | 第39-67页 |
1 材料 | 第39-41页 |
1.1 主要试剂 | 第39-40页 |
1.2 主要仪器 | 第40-41页 |
2 方法 | 第41-54页 |
2.1 通量测序预测miRNA及靶基因 | 第41页 |
2.2 miRNA靶向的抑癌蛋白PTEN相关作用 | 第41-53页 |
2.3 预测可能靶向PTEN的miRNA的作用研究 | 第53-54页 |
3. 结果 | 第54-63页 |
3.1 MDV感染后PTEN的mRNA水平变化情况 | 第54-55页 |
3.2 高通量测序结果 | 第55-57页 |
3.3 HA-PTEN质粒构建及表达 | 第57页 |
3.4 PTEN过表达后对于LMH细胞的影响 | 第57-59页 |
3.5 PTEN过表达后对于CEF细胞的影响 | 第59-61页 |
3.6 PTEN过表达后病毒的复制情况 | 第61-62页 |
3.7 预测靶向PTEN的miRNA过表达后对CEF的影响 | 第62-63页 |
4 讨论 | 第63-66页 |
5 本章小结 | 第66-67页 |
全文总结 | 第67-68页 |
参考文献 | 第68-79页 |
致谢 | 第79页 |