| 中文摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-16页 |
| 第一章 绪论 | 第16-78页 |
| ·PP2A研究进展 | 第16-59页 |
| ·PP2A的组成与结构 | 第16-28页 |
| ·催化亚基 | 第18-21页 |
| ·结构亚基(A亚基或PR65) | 第21-23页 |
| ·调节亚基B亚基 | 第23-28页 |
| ·PP2A亚基间的相互作用 | 第28-34页 |
| ·催化亚基与结构亚基间的相互作用 | 第29-30页 |
| ·调节亚基与核心酶之间的相互作用 | 第30-34页 |
| ·PP2A参与调节一些重要细胞信号转导途径 | 第34-44页 |
| ·PP2A通过调节MAPK信号通路 | 第34-37页 |
| ·PP2A调节WNT信号通路 | 第37-40页 |
| ·PP2A通过抑制p53磷酸化水平调节p53相关信号通路 | 第40-43页 |
| ·PP2A通过对Rb去磷酸化调节Rb/E2F信号通路 | 第43-44页 |
| ·PP2A与癌症发生的关系 | 第44-57页 |
| ·C亚基在癌症发生中的作用 | 第45-46页 |
| ·A亚基在癌症发生中的作用 | 第46-50页 |
| ·B亚基与癌症的关系 | 第50-57页 |
| ·展望 | 第57-59页 |
| ·定量蛋白质组学研究方法及进展 | 第59-78页 |
| ·双向电泳(2-DE)定量技术 | 第60-64页 |
| ·传统的2-DE定量技术 | 第60-61页 |
| ·荧光差异显示双向凝胶电泳(Fluorescence 2D Differential Gel Electrophoresis,F-2D DIGE)技术 | 第61-64页 |
| ·基于质谱的稳定同位素标记蛋白质组定量技术 | 第64-76页 |
| ·体内标记法 | 第65-67页 |
| ·体外标记法 | 第67-76页 |
| ·展望 | 第76-78页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第78-93页 |
| ·材料与试剂 | 第78-79页 |
| ·材料 | 第78页 |
| ·药品与试剂 | 第78-79页 |
| ·仪器与设备 | 第79-80页 |
| ·实验方法 | 第80-93页 |
| ·细胞及细胞培养 | 第80页 |
| ·通过Western-Blot检测并确认pCI-PP-2Acs转染的稳定过表达细胞系 | 第80-81页 |
| ·差异蛋白组学研究方法 | 第81-90页 |
| ·蛋白质样品制备 | 第81页 |
| ·蛋白质含量测定 | 第81-82页 |
| ·基于双向聚丙烯酰胺凝胶电泳(2-DE)的差异蛋白质组学分析方法 | 第82-85页 |
| ·基于~(18)O标记的差异蛋白质组学分析方法 | 第85-87页 |
| ·生物信息学分析 | 第87-90页 |
| ·基因芯片分析方法 | 第90页 |
| ·蛋白质印迹分析 | 第90-91页 |
| ·凝胶迁移滞后方法(Electrophoretic Mobility Shift Assay,EMSA)分析p53与Ctsb基因启动子序列的体外相互作用 | 第91-93页 |
| 第三章 实验结果及分析 | 第93-113页 |
| ·pCI-PP-2Aca-JB6及pCI-PP-2Aca-H1299是pCI-PP-2Aca稳定过表达的细胞系 | 第93页 |
| ·PP2Aca过表达的差异细胞蛋白质组实验结果及分析 | 第93-106页 |
| ·PP2Aca过表达的JB6细胞的差异蛋白质组实验结果 | 第94-102页 |
| ·基于聚丙烯酰胺凝胶电泳(2-DE)的PP2Aca过表达的JB6细胞的差异蛋白质组实验结果 | 第94-100页 |
| ·基于~(18)O标记的PP2Aca过表达的JB6细胞的差异蛋白质组实验结果 | 第100-102页 |
| ·PP2Aca过表达的p53~(-/-) H1299细胞的差异蛋白质组实验结果 | 第102-106页 |
| ·双向凝胶电泳图谱获得及分析 | 第102-104页 |
| ·差异蛋白质点的质谱鉴定结果 | 第104页 |
| ·差异蛋白质点的功能注释及分类 | 第104-105页 |
| ·差异蛋白质点的相互作用关系网络 | 第105-106页 |
| ·PP2Aca过表达的pCI-PP2Aca-JB6的基因芯片差异分析结果 | 第106-108页 |
| ·PP2Aca过表达对小鼠上皮细胞(JB6)功能的影响机制 | 第108-113页 |
| ·PP2Aca过表达对小鼠上皮细胞(JB6)中p53及其P-p53-ser-15磷酸化状态的影响 | 第108-109页 |
| ·PP2Aca过表达对Cathepsin B在mRNA水平及蛋白水平的影响 | 第109页 |
| ·凝胶迁移滞后(Electrophoretic Mobility Shift Assay,EMSA)实验检测p53在体外与小鼠Ctsb基因启动子序列的结合 | 第109-112页 |
| ·不同剂量p53对ctsb在mRNA水平的影响 | 第112-113页 |
| 第四章 讨论 | 第113-185页 |
| ·pCI-PP-2Aca-JB6及pCI-PP-2Aca-1299都是PP-2Aca稳定过表达的细胞 | 第113-115页 |
| ·PP2ACa过表达对pCI-PP2Aca-JB6蛋白质组水平的影响 | 第115-154页 |
| ·通过2-DE结合质谱鉴定的差异蛋白质功能分析 | 第116-147页 |
| ·PP2ACa过表达显著影响pCI-PP2Aca-JB6细胞中与碳水化合物及能量代谢相关蛋白的表达 | 第116-118页 |
| ·PP2ACa过表达显著下调pCI-PP2Aca-JB6细胞中与应激保护相关蛋白的表达 | 第118-125页 |
| ·PP2ACa过表达影响pCI-PP2Aca-JB6细胞中与蛋白质折叠相关蛋白的表达 | 第125-129页 |
| ·PP2ACa过表达显著影响pCI-PP2Aca-JB6细胞中细胞骨架相关蛋白的表达 | 第129-134页 |
| ·PP2ACa过表达显著影响pCI-PP2Aca-JB6细胞中与蛋白质降解及跨膜运输相关蛋白的表达 | 第134-138页 |
| ·PP2ACa过表达显著影响pCI-PP2Aca-JB6细胞中一些多功能蛋白的表达 | 第138-144页 |
| ·PP2ACa过表达显著影响pCI-PP2Aca-JB6细胞中与转录及翻译相关蛋白的表达 | 第144-146页 |
| ·PP2ACa过表达影响pCI-PP2Aca-JB6细胞中其它蛋白的表达 | 第146页 |
| ·PP2ACa过表达显著影响pCI-PP2Aca-JB6细胞中一些功能未知蛋白的表达 | 第146-147页 |
| ·通过~(18)O标记结合质谱鉴定到的差异蛋白质的功能分析 | 第147-154页 |
| ·PP2ACa过表达显著影响pCI-PP2Aca-JB6细胞中与氨基酸及能量代谢相关蛋白的表达 | 第147-149页 |
| ·PP2ACa过表达显著影响pCI-PP2Aca-JB6细胞中与蛋白质代谢及跨膜运输相关蛋白的表达 | 第149-151页 |
| ·PP2ACa过表达显著影响pCI-PP2Aca-JB6细胞中细胞骨架相关蛋白的表达 | 第151页 |
| ·PP2ACa过表达显著影响pCI-PP2Aca-JB6细胞中与转录及翻译相关蛋白的表达 | 第151-152页 |
| ·PP2ACa过表达显著影响pCI-PP2Aca-JB6细胞中一些多功能蛋白的表达 | 第152-154页 |
| ·PP2ACa过表达显著影响pCI-PP2Aca-JB6细胞中一些功能未知蛋白的表达 | 第154页 |
| ·PP2ACa过表达对细胞mRNA表达水平的影响 | 第154-172页 |
| ·PP2ACa过表达显著影响pCI-PP2Aca-JB6细胞中趋化作用 | 第155-160页 |
| ·PP2ACa过表达显著影响pCI-PP2Aca-JB6细胞中p53相关信号通路 | 第160-162页 |
| ·PP2ACa过表达显著影响pCI-PP2Aca-JB6细胞中细胞氧化压力相关基因的表达 | 第162-165页 |
| ·PP2ACa过表达对pCI-PP2Aca-JB6细胞中其它信号通路也有显著影响 | 第165-167页 |
| ·PP2ACa过表达与SV40小T抗原过表达引起细胞mRNA表达水平变化的比较 | 第167-172页 |
| ·PP2Aca过表达促进细胞转变机制的初步研究 | 第172-177页 |
| ·PP2Aca过表达引起p53及其P-p53-ser-15磷酸化状态的显著变化 | 第173-174页 |
| ·PP2Aca过表达引起Cathepsin B mRNA水平及蛋白水平的显著上调 | 第174-176页 |
| ·凝胶迁移滞后实验(Electrophoretic Mobility Shift Assay,EMSA)结果表明p53与Ctsb基因启动子序列存在相互作用 | 第176-177页 |
| ·用不同剂量的p53转染细胞会影响ctsb的转录 | 第177页 |
| ·pCI-PP2Aca过表达影响pCI-PP2Aca-H1299细胞内蛋白表达的变化 | 第177-180页 |
| ·小结 | 第180-185页 |
| 缩写表(中英文对照) | 第185-194页 |
| 参考文献 | 第194-211页 |
| 致谢 | 第211-213页 |
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