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当前位置:教育论文中心首页--硕士论文--红冬孢酵母类胡萝卜素合成关键酶基因Pdh和Lc的研究
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红冬孢酵母类胡萝卜素合成关键酶基因Pdh和Lc的研究
 
     论文目录
 
摘要第6-9页
Abstract第9-11页
第一章 前言第18-36页
    1.1 类胡萝卜素的简介第18-19页
    1.2 类胡萝卜素在各领域的应用第19-21页
        1.2.1 类胡萝卜素在饲料中的应用第19-21页
        1.2.2 类胡萝卜素在食品中的应用第21页
    1.3 类胡萝卜素的功能及对人体的生理作用第21-25页
        1.3.1 着色功能第21-22页
        1.3.2 增强免疫力第22页
        1.3.3 促进生长和成熟,改善卵质第22页
        1.3.4 抗氧化剂和脂质过氧化的抑制剂第22-23页
        1.3.5 增强对低氧的耐受性第23页
        1.3.6 抗紫外辐射的光保护作用第23页
        1.3.7 具有维生素A活性第23-24页
        1.3.8 类胡萝卜素对人体的生理作用第24-25页
    1.4 国内外利用微生物发酵生产β-胡萝卜素的研究进展第25-30页
        1.4.1 利用霉菌发酵生产类胡萝卜素第25-27页
        1.4.2 利用红酵母类微生物生产类胡萝卜素第27-28页
        1.4.3 从光合细菌中提取类胡萝卜素第28-29页
        1.4.4 从藻类生物中提取类胡萝卜素第29页
        1.4.5 基因工程菌生产类胡萝卜素第29-30页
    1.5 不同微生物生产类胡萝卜素特点比较第30页
    1.6 酵母应对环境胁迫的调节机制第30-31页
    1.7 类胡萝卜素合成关键酶基因的概述第31页
    1.8 类胡萝卜素的提取方法第31-33页
    1.9 研究背景与意义第33-34页
    1.10 技术路线第34-36页
第二章 红冬孢酵母类胡萝卜素提取及其组分分析第36-44页
    2.1 材料第36页
        2.1.1 菌种和质粒第36页
        2.1.2 主要试剂和培养基配方第36页
    2.2 方法第36-38页
        2.2.1 总类胡萝卜素的提取第36-38页
        2.2.2 类胡萝卜素分离与鉴定第38页
    2.3 结果和分析第38-42页
        2.3.1 类胡萝卜素的提取方法比较第38-39页
        2.3.2 类胡萝卜素的分离与定性第39-42页
    2.4 讨论第42-44页
第三章 类胡萝卜素合成关键酶基因Pdh和Lc的克隆第44-58页
    3.1 材料第44-45页
        3.1.1 菌种和质粒第44页
        3.1.2 主要试剂和培养基配方第44-45页
        3.1.3 引物合成和测序第45页
    3.2 类胡萝卜素合成关键酶基因Pdh及Lc的克隆第45-50页
        3.2.1 红冬孢酵母YM25235总RNA的提取第45-46页
        3.2.2 总RNA反转录第46-47页
        3.2.3 Pdh和Lc全长cDNA的扩增第47-48页
        3.2.4 Pdh和Lc基因扩增片段回收第48页
        3.2.5 Pdh和Lc基因回收片段测序验证第48-50页
    3.4 结果与分析第50-55页
        3.4.1 Pdh和Lc的克隆第50-55页
    3.5 讨论第55-58页
第四章 红冬孢酵母中Pdh、Lc基因功能分析第58-78页
    4.1 菌种与材料第58-60页
        4.1.1 菌种和质粒第58页
        4.1.2 主要试剂和培养基配方第58-59页
        4.1.3 引物第59-60页
    4.2 重组表达质粒pRHPdh、pRHLc的构建第60-64页
        4.2.1 Pdh、Lc基因的扩增第60页
        4.2.2 Pdh和Lc基因扩增片段回收第60页
        4.2.3 质粒基因片段的双酶切第60-62页
        4.2.4 Pdh和Lc基因与质粒pRH2034片段连接转化第62-64页
    4.3 Pdh和Lc基因过表达红冬孢酵母的制各第64-66页
        4.3.1 重组质粒转化农杆菌第64-65页
        4.3.2 农杆菌转化YM25235及验证第65-66页
    4.4 Pdh和Lc基因表达水平分析第66-67页
        4.4.1 红冬孢酵母半定量分析第66-67页
        4.4.2 实时荧光定量PCR(RT-PCR)分析第67页
    4.5 类胡萝卜素产物水平分析第67-68页
        4.5.1 类胡萝卜素的提取第67页
        4.5.2 类胡萝卜素定量分析第67-68页
    4.6 结果和分析第68-75页
        4.6.1 重组质粒pRHPdh、pRHLc的构建第68-69页
        4.6.2 转基因菌株的鉴定第69-70页
        4.6.3 Pdh和Lc基因mRNA表达水平分析第70-72页
        4.6.4 类胡萝卜素产物分析第72-75页
            4.6.4.1 标注曲线绘制第72-73页
            4.6.4.2 Pdh和Lc基因与类胡萝卜素合成的相关性分析第73-75页
    4.7 讨论第75-78页
第五章 低温条件下类胡萝卜素合成与红冬孢酵母低温生长适应的相关性分析第78-90页
    5.1 材料第78-79页
        5.1.1 菌种第78页
        5.1.2 主要试剂和培养基配方第78-79页
    5.2 低温培养条件下过表达菌株中Pdh和Lc基因表达水平比较第79页
    5.3 低温培养条件下类胡萝卜素产量比较第79-80页
    5.4 结果和分析第80-87页
        5.4.1 野生型菌株YM25235中Pdh、Lc基因表达水平分析第80-81页
        5.4.2 过表达菌株mRNA表达水平相关性分析第81-85页
        5.4.3 类胡萝卜素合成水平相关性分析第85-87页
    5.5 讨论第87-90页
第六章 总结与展望第90-92页
致谢第92-93页
参考文献第93-102页
附录A 攻读硕士期间发表论文目录第102-103页
附录B 试验药品与设备第103-105页
    B.1 主要溶液及其配制第103页
        B.1.1 溴化乙锭溶液第103页
        B.1.2 1%琼脂糖凝胶的配制第103页
        B.1.3 TAE电泳缓冲液第103页
        B.1.4 TBE电泳缓冲液第103页
    B.2 主要仪器第103-104页
    B.3 试剂及酶制品第104-105页

 
 
论文编号BS2754153,这篇论文共105
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