摘要 | 第10-12页 |
Abstract | 第12-14页 |
缩略词表(Abbreviation) | 第15-16页 |
第一章 文献综述 | 第16-36页 |
1 S.minor的研究进展 | 第16-23页 |
1.1 S.minor的分类地位 | 第16页 |
1.2 S.minor的生物学特性 | 第16-17页 |
1.3 S.minor的寄主范围 | 第17页 |
1.4 S.minor的侵染循环 | 第17页 |
1.5 S.minor的风险 | 第17-18页 |
1.6 S.minor的地理分布 | 第18页 |
1.7 S.minor的致病机制 | 第18-19页 |
1.7.1 草酸 | 第18-19页 |
1.7.2 致病相关酶类 | 第19页 |
1.8 S.minor交配型基因(MAT)的研究进展 | 第19-20页 |
1.9 S.minor的多样性 | 第20-21页 |
1.10 S.minor的防治 | 第21-23页 |
2 真菌病毒的研究进展 | 第23-36页 |
2.1 真菌病毒的分类 | 第23-30页 |
2.1.1 双链RNA病毒 | 第23-27页 |
2.1.2 正单链RNA病毒 | 第27-28页 |
2.1.3 逆转录RNA病毒 | 第28-29页 |
2.1.4 真菌DNA病毒 | 第29页 |
2.1.5 负单链RNA病毒 | 第29-30页 |
2.2 植物病原真菌弱毒现象 | 第30页 |
2.3 植物病原真菌弱毒现象的机制 | 第30-31页 |
2.4 真菌病毒的传播 | 第31-32页 |
2.5 真菌病毒与真菌之间的互作 | 第32-34页 |
2.5.1 CHV1-EP713的基因组信息 | 第32页 |
2.5.2 CHV1-EP713编码的相关蛋白(p29,p40和p48)对寄主真菌的影响 | 第32-33页 |
2.5.3 CHV1-EP713调节寄主的基因表达 | 第33-34页 |
2.6 真菌病毒应用于生物防治的研究进展 | 第34-35页 |
2.7 本文的研究目的与意义 | 第35-36页 |
第二章 小核盘菌菌株生物学特性及遗传多样性研究 | 第36-73页 |
1 材料和方法 | 第36-44页 |
1.1 培养基及试剂 | 第36-37页 |
1.2 样品的采集与分离纯化 | 第37页 |
1.2.1 样品的采集 | 第37页 |
1.2.2 菌株的分离、纯化和保存 | 第37页 |
1.3 DNA的提取及PCR扩增 | 第37-38页 |
1.3.1 DNA的提取 | 第37-38页 |
1.3.2 PCR扩增 | 第38页 |
1.4 菌株种的鉴定及新寄主的鉴定 | 第38-39页 |
1.5 小核盘菌菌株间生物学特性比较 | 第39-40页 |
1.5.1 菌落形态的观察 | 第39页 |
1.5.2 菌株生长速率测定 | 第39页 |
1.5.3 菌株菌核产量测定 | 第39页 |
1.5.4 菌株致病力测定 | 第39-40页 |
1.6 菌丝亲和群(Mycelial compatibility grouping)的测定 | 第40页 |
1.7 小核盘菌菌株的MAT基因类型 | 第40-41页 |
1.7.1 MAT基因的PCR扩增 | 第40页 |
1.7.2 PCR产物的纯化、回收与测序 | 第40-41页 |
1.8 湖北省小核盘菌菌株SSR遗传多样性分析 | 第41-43页 |
1.8.1 供试菌株 | 第41页 |
1.8.2 引物的筛选 | 第41页 |
1.8.3 聚丙烯酰胺凝胶电泳、染色和显影 | 第41-43页 |
1.9 数据处理 | 第43-44页 |
1.9.1 生物学特性相关数据分析 | 第43页 |
1.9.2 遗传多样性相关数据分析 | 第43-44页 |
2 结果与分析 | 第44-69页 |
2.1 小核盘菌菌株收集 | 第44-46页 |
2.2 小核盘菌菌株的分离及纯化 | 第46-49页 |
2.3 小核盘菌菌株的鉴定 | 第49页 |
2.4 小核盘菌新寄主的鉴定 | 第49-51页 |
2.5 S.minor菌株的菌落形态的差异 | 第51页 |
2.6 S.minor菌株菌落生长速度的差异 | 第51-52页 |
2.7 S.minor菌株菌核产量的差异 | 第52页 |
2.8 S.minor菌株致病力的分化 | 第52-54页 |
2.9 生长速率、菌核产量及致病力的相关性分析 | 第54-55页 |
2.10 95个S.minor的菌丝亲和性测定结果 | 第55-57页 |
2.11 不同菌丝亲和群的多样性分析 | 第57-59页 |
2.12 湖北省S.minor菌株的微卫星标记引物扩增结果 | 第59页 |
2.13 湖北省S.minor菌株的遗传多样性 | 第59-64页 |
2.14 湖北省Sclerotinia minor菌株中Inv-和Inv+菌株的分布情况 | 第64-65页 |
2.15 Inv-和Inv+ type在湖北省Sclerotinia minor菌株中稳定性评估 | 第65-68页 |
2.16 不同菌丝亲和群间生物学特性的比较 | 第68-69页 |
2.17 不同MAT类型菌株的生物学特性的比较 | 第69页 |
3 讨论 | 第69-73页 |
第三章 小核盘菌菌株LC22中真菌病毒SmEV1的研究 | 第73-110页 |
1 材料和方法 | 第73-84页 |
1.1 小核盘菌菌株及培养基 | 第73-74页 |
1.2 细菌菌株及培养基 | 第74页 |
1.3 载体和引物 | 第74-75页 |
1.4 酶及其它试剂材料 | 第75页 |
1.5 仪器及设备 | 第75-76页 |
1.6 dsRNA片段cDNA序列的克隆 | 第76-80页 |
1.6.1 菌丝的培养 | 第76页 |
1.6.2 小核盘菌菌丝中dsRNA的提取 | 第76页 |
1.6.3 dsRNA样品的去DNA处理 | 第76-77页 |
1.6.4 dsRNA样品回收与纯化 | 第77页 |
1.6.5 用随机引物合成cDNA | 第77-78页 |
1.6.6 dsRNA中间部分序列的cDNA克隆 | 第78页 |
1.6.7 dsRNA末端cDNA序列的获取 | 第78-79页 |
1.6.8 cDNA的A-Tailing | 第79页 |
1.6.9 dsRNA片段cDNA序列的拼接及分析 | 第79-80页 |
1.7 Northern杂交 | 第80-82页 |
1.7.1 试剂 | 第80页 |
1.7.2 RNA样品的预处理 | 第80页 |
1.7.3 变性胶的制备 | 第80页 |
1.7.4 电泳、转膜及固定 | 第80-81页 |
1.7.5 探针标记 | 第81页 |
1.7.6 预杂交与杂交 | 第81-82页 |
1.7.7 洗膜及显色 | 第82页 |
1.8 小核盘菌菌株LC22的生物学特性及致病力 | 第82页 |
1.8.1 菌落形态、生长速度及菌核产量的测定 | 第82页 |
1.8.2 致病力测定 | 第82页 |
1.8.3 菌丝顶端形态的观察 | 第82页 |
1.9 小核盘菌菌株LC22中dsRNA的传播特性 | 第82-84页 |
1.9.1 dsRNA在不同菌丝亲和群的小核盘菌菌株间的水平传播 | 第82-83页 |
1.9.2 dsRNA在小核盘菌菌株菌核后代中的垂直传播 | 第83页 |
1.9.3 dsRNA在小核盘菌菌株原生质体后代中的传播 | 第83-84页 |
1.10 数据分析 | 第84页 |
2 结果与分析 | 第84-106页 |
2.1 小核盘菌菌株LC22的弱致病性、培养特性和dsRNA的检测 | 第84-85页 |
2.2 小核盘菌菌株LC22中dsRNA片段全长cDNA序列的拼接及鉴定 | 第85-86页 |
2.3 病毒SmEV1基因组结构的分析以及缺刻特性的Northern杂交验证 | 第86-87页 |
2.4 SmEV1保守域序列分析及系统发育树的构建 | 第87-98页 |
2.5 SmEV1在不同菌株间水平传播特性 | 第98-102页 |
2.5.1 SmEV1在不同菌丝亲和群小核盘菌菌株间水平传播特性 | 第98-99页 |
2.5.2 不同S.minor菌株在传毒前后的生物学特性比较 | 第99-102页 |
2.6 SmEV1在小核盘菌LC22菌核后代中的垂直传播特性 | 第102-105页 |
2.6.1 SmEV1在小核盘菌LC22的菌核后代中能稳定的存在 | 第102-103页 |
2.6.2 8个不同S.minor菌株LC22的菌核后代的生物学特性 | 第103-105页 |
2.7 原生质体再生菌株的菌落形态 | 第105页 |
2.8 菌株LC22的生防潜能评估 | 第105-106页 |
3 讨论 | 第106-110页 |
第四章 小核盘菌菌株LC38致病力衰退机制研究 | 第110-123页 |
1 材料和方法 | 第110-113页 |
1.1 供试菌株和植物 | 第110页 |
1.2 供试培养基及试剂 | 第110-111页 |
1.3 仪器设备 | 第111页 |
1.4 生物学特性 | 第111页 |
1.5 菌丝形态观察 | 第111页 |
1.6 致病力测定 | 第111-112页 |
1.6.1 离体烟草叶片的致病力测定 | 第111-112页 |
1.6.2 活体拟南芥植株的致病力测定 | 第112页 |
1.7 草酸的测定 | 第112-113页 |
1.7.1 草酸的定性测定 | 第112页 |
1.7.2 草酸的定量测定 | 第112-113页 |
1.8 数据分析 | 第113页 |
2 结果和分析 | 第113-121页 |
2.1 S.minor菌株LC38和LC41的菌落形态、生长速度及菌核产量 | 第113-115页 |
2.2 S.minor菌株LC41和LC38在培养基及病斑组织中的菌丝形态 | 第115页 |
2.3 S.minor菌株LC41和LC38在离体烟草叶片上的致病力测定 | 第115-116页 |
2.4 对不同生态型拟南芥的致病力测定 | 第116-117页 |
2.5 对不同拟南芥突变体的致病力测定 | 第117-118页 |
2.6 草酸的测定 | 第118-121页 |
2.6.1 草酸的定性测定 | 第118-119页 |
2.6.2 草酸的定量测定 | 第119-121页 |
3 讨论 | 第121-123页 |
第五章 小核盘菌危害油菜的风险研究 | 第123-134页 |
1 材料和方法 | 第123-126页 |
1.1 供试菌株及培养基 | 第123-124页 |
1.2 油菜品种 | 第124页 |
1.3 对离体油菜叶片、茎杆及荚果的致病力测定 | 第124页 |
1.4 小核盘菌菌株对油菜的危害风险 | 第124-125页 |
1.4.1 小核盘菌菌核不同接种浓度对油菜的致病力测定 | 第124-125页 |
1.4.2 小核盘菌菌核不同接种距离对油菜的致病力测定 | 第125页 |
1.5 油菜菌核病的田间调查 | 第125页 |
1.5.1 油菜收获期病害的调查 | 第125页 |
1.5.2 油菜苗期病害的调查 | 第125页 |
1.6 数据分析 | 第125-126页 |
2 结果和分析 | 第126-132页 |
2.1 小核盘菌菌株对离体油菜叶片、茎杆和荚的致病力测定 | 第126-129页 |
2.2 小核盘菌菌核不同接种浓度对油菜的发病率 | 第129-130页 |
2.3 小核盘菌菌核不同接种距离对油菜的发病率 | 第130页 |
2.4 油菜收获期病害的调查结果 | 第130-131页 |
2.5 油菜苗期病害的调查结果 | 第131-132页 |
3 讨论 | 第132-134页 |
第六章 全文结论、创新点及展望 | 第134-137页 |
1 结论 | 第134-135页 |
2 创新点 | 第135-136页 |
3 展望 | 第136-137页 |
参考文献 | 第137-153页 |
致谢 | 第153-155页 |
发表论文情况 | 第155页 |