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TALENs介导的山羊BLG基因敲除和hLF基因敲入的研究
 
     论文目录
 
中文摘要第3-5页
Abstract第5-6页
符号说明第9-10页
第一章 文献综述第10-23页
    1. 动物基因打靶的研究进展第10-15页
        1.1 动物基因打靶的简介第10-11页
        1.2 动物基因打靶技术的应用和前景第11-12页
        1.3 基因打靶的新技术第12-14页
        1.4 动物基因打靶中存在的障碍和优化措施第14-15页
    2. TALENs基因定点修饰技术研究进展第15-19页
        2.1 TALENs基因修饰技术简介第15-16页
        2.2 TALENs的基本结构与技术原理第16-17页
        2.3 TALENs的设计与构建第17-18页
        2.4 TALENs的应用和展望第18-19页
    3. 人乳铁蛋白的研究进展第19-23页
        3.1 人乳铁蛋白的基因及其蛋白第20页
        3.2 人乳铁蛋白的主要生理作用第20-21页
        3.3 转基因动物乳腺特异性表达重组hLF的研究进展第21-23页
第二章 山羊BLG基因TALENs的设计与构建第23-29页
    1. 实验材料第23-24页
        1.1 主要试剂第23页
        1.2 试验仪器及器材第23-24页
        1.3 主要试剂的配制第24页
    2. 实验方法第24-28页
        2.1 BLG基因的检索第24页
        2.2 TALENs的设计第24-25页
        2.3 TALENs表达载体的构建与鉴定第25-28页
    3. 结果第28-29页
第三章 乳腺特异性表达hLF基因打靶载体的构建第29-41页
    1. 试验材料第29-31页
        1.1 菌种及质粒第29页
        1.2 试验仪器第29-30页
        1.3 分子生物学试剂第30页
        1.4 主要试剂的配制第30-31页
    2. 实验方法第31-33页
        2.1 PCR引物合成和测序第31页
        2.2 常规分子生物学的操作方法第31页
        2.3 质粒酶切反应第31-32页
        2.4 酶切产物的回收第32-33页
        2.5 连接反应第33页
    3. 乳腺特异性打靶载体的构建第33-39页
        3.1 PCR扩增BLG5’、BLG3’调控序列和乳腺特异性表达载体功能区第33-36页
        3.2 山羊BLG5’调控序列和乳腺特异性表达载体功能区相连第36页
        3.3 山羊BLG3’调控序列和表达载体BF相连第36页
        3.4 含单个负筛选HSV-TK基因与乳腺特异性表达载体BFN-7相连第36-39页
    4. 结果第39-41页
        4.1 山羊BLG5’和BLG3’调控序列的扩增第39页
        4.2 PCR扩增乳腺特异性表达载体功能区第39-40页
        4.3 乳腺特异性表达hLF基因打靶载体的构建第40-41页
第四章 基因打靶细胞系和基因打靶山羊的制备第41-53页
    1. 试验材料第41-42页
        1.1 试验仪器第41页
        1.2 试验器械第41-42页
        1.3 主要试剂第42页
        1.4 试验动物第42页
    2. 试验方法第42-49页
        2.1 胎儿成纤维细胞的准备第42-44页
        2.2 打靶载体与TALENs转染胎儿成纤维细胞第44-45页
        2.3 细胞株PCR检测第45-48页
        2.4 体细胞核移植制作基因打靶山羊胎儿第48-49页
    3. 结果第49-51页
        3.1 抗性细胞株的整合检测第49-51页
        3.2 转染基因打靶载体细胞统计结果第51页
    4. 讨论第51-53页
第五章 全文总结第53-55页
参考文献第55-60页
致谢第60-61页

 
 
论文编号BS2595280,这篇论文共61
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