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当前位置:教育论文中心首页--硕士论文--乙羧氟草醚降解菌株的分离鉴定、降解特性研究及酯酶基因的克隆与表达
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乙羧氟草醚降解菌株的分离鉴定、降解特性研究及酯酶基因的克隆与表达
 
     论文目录
 
摘要第7-9页
ABSTRACT第9-10页
符号与缩略语说明第11-12页
前言第12-13页
第一章 文献综述第13-27页
    1 二苯醚类除草剂的简介第13-15页
        1.1 二苯醚类除草剂的基本概述第13页
        1.2 二苯醚类除草剂的应用第13-14页
        1.3 二苯醚类除草剂的基本特征第14页
        1.4 二苯醚类除草剂的作用机制以及选择性第14-15页
    2 二苯醚类除草剂的毒性以及环境危害第15页
    3 二苯醚类除草剂在环境中的检测以及生物修复第15-16页
    4 二苯醚类除草剂微生物降解研究进展第16-20页
    5 酯酶的研究第20-22页
    6 乙羧氟草醚降解目前存在的问题、研究思路及内容第22-23页
    参考文献第23-27页
第二章 乙羧氟草醚降解菌株KS-1的分离与鉴定第27-41页
    1 材料和方法第27-32页
        1.1 培养基与试剂第27页
        1.2 降解菌株的分离和筛选第27-28页
        1.3 菌体培养与生长量的测定第28页
        1.4 菌株对乙羧氟草醚降解情况的测定第28页
        1.5 降解菌株的16S rRNA基因序列分析第28-31页
        1.6 降解菌株系统发育地位的确定第31页
        1.7 环境条件对降解菌株生长的影响第31-32页
    2 结果与分析第32-38页
        2.1 污染土壤中乙羧氟草醚降解菌株的分离、筛选第32-33页
        2.2 降解菌株的菌落形态及生理生化特征第33-34页
        2.3 降解菌株的系统发育树分析第34-35页
        2.4 不同环境条件对菌株KS-1生长情况的影响第35-38页
    3 本章小结第38-39页
    参考文献第39-41页
第三章 乙羧氟草醚降解菌株KS-1的降解特性、代谢途径以及降解底物谱的研究第41-55页
    1 材料与方法第41-43页
        1.1 菌株、试剂、培养基第41页
        1.2 菌种的培养与种子液的制备第41页
        1.3 菌株KS-1降解乙羧氟草醚降解曲线第41-42页
        1.4 不同影响因子对菌株KS-1降解乙羧氟草醚的影响第42-43页
        1.5 粗酶液的制备第43页
        1.6 乙羧氟草醚及其降解产物的提取与鉴定第43页
        1.7 菌株KS-1降解底物谱第43页
    2 结果与分析第43-53页
        2.1 菌株KS-1降解乙羧氟草醚降解曲线的测定第43-44页
        2.2 不同影响因子对菌株KS-1降解乙羧氟草醚的影响的测定第44-47页
        2.3 粗酶效果的验证第47-48页
        2.4 菌株KS-1降解乙羧氟草醚的代谢途径的初步研究第48-51页
        2.5 菌株KS-1降解的底物谱第51-53页
    3 本章小结第53-54页
    参考文献第54-55页
第四章 乙羧氟草醚酯酶基因(fluE)的克隆、表达及纯化第55-75页
    第一节 乙羧氟草醚酯酶基因的克隆第55-62页
        1 材料与方法第55-59页
            1.1 培养基与试剂第55页
            1.2 菌株与质粒第55-56页
            1.3 菌株总DNA的提取以及质粒DNA的提取第56页
            1.4 鸟枪法构建基因文库的路线图第56-57页
            1.5 菌株KS-1总DNA Sau3AI酶切以及酶切片段的回收第57-58页
            1.6 酶连与转化第58页
            1.7 菌株KS-1可降解乙羧氟草醚的阳性克隆子筛选及效果检测第58-59页
            1.8 阳性克隆子的基因序列分析与比对第59页
        2 结果与分析第59-62页
            2.1 菌株KS-1总DNA的提取和Sau3 AI酶切第59-60页
            2.2 基因文库中阳性克隆子的筛选第60页
            2.3 阳性克隆子的测序以及ORF分析第60-62页
            2.4 fluE的核苷酸序列以及氨基酸序列分析第62页
    第二节 乙羧氟草醚酯酶FluE的表达与纯化第62-73页
        1 材料与方法第62-69页
            1.1 培养基与化学试剂第62页
            1.2 菌株与质粒第62-63页
            1.3 菌株总DNA的提取以及质粒DNA的提取第63页
            1.4 普通感受态细胞Escherichia coli BL21 (DE3)的制备第63-64页
            1.5 乙羧氟草醚酯酶基因的PCR扩增第64-65页
            1.6 PCR产物的纯化以及表达载体的构建第65-66页
            1.7 表达菌株的构建和诱导表达第66-67页
            1.8 FluE蛋白的纯化第67-68页
            1.9 乙羧氟草醚酯酶SDS-PAGE凝胶电泳分析第68-69页
            1.10 FluE的酶活测定第69页
        2 结果与分析第69-72页
            2.1 FluE表达引物的扩增以及重组表达载体的构建第69-70页
            2.2 FluE酯酶基因在大肠杆菌中的表达第70-71页
            2.3 FluE蛋白的纯化以及电泳分析第71-72页
            2.4 FluE的底物谱以及对应的动力学参数第72页
        3 本章小结第72-73页
    参考文献第73-75页
全文总结第75-77页
硕士论文创新点第77-79页
附录Ⅰ 培养基及试剂配方第79-81页
附录Ⅱ 基因及氨基酸序列第81-83页
攻读硕士学位期间发表或已接受的学术论文第83-85页
致谢第85页

 
 
论文编号BS3202230,这篇论文共85
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